آثار مكملات المغنيسيوم الفسيولوجية على فرط النشاط عند الأطفال الذين يعانون من اضطراب نقص الانتباه وفرط النشاط (adhd). ردا إيجابيا على المغنيسيوم عن طر

[رافت ابراهيم]

 

نبتة سانت جون (بيرفوراتوم): التفاعلات المخدرات والنتائج السريرية

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...2.01683.x/full


ملخص

ويهدف الهدف من هذا العمل هو تحديد الأدوية التي تتفاعل مع نبتة العلاج بالاعشاب سانت جون (SJW)، والآليات المسؤولة.

وقد أجريت مراجعة منهجية لجميع الأدلة المتاحة، بما في ذلك الكتابات المنشورة في جميع أنحاء العالم وتقارير الحالة العفوية التي تقدمها المتخصصين في الرعاية الصحية والسلطات التنظيمية في أوروبا الأساليب.

النتائج تم تحديد عدد من التفاعلات الهامة سريريا مع الأدوية الموصوفة بما في ذلك الوارفارين، فينوبروكومون، السيكلوسبورين، مثبطات الأنزيم البروتيني فيروس نقص المناعة البشرية، الثيوفيلين، الديجوكسين وسائل منع الحمل عن طريق الفم مما أدى إلى انخفاض في تركيز أو تأثير الأدوية. هذه التفاعلات هي على الأرجح نتيجة لتحريض السيتوكروم P450 متشابهات الانزيم CYP3A4، CYP2C9، CYP1A2 والبروتين النقل P-بروتين سكري من قبل التأسيسية (ق) في SJW. درجة الاستقراء لا يمكن التنبؤ بها بسبب عوامل مثل نوعية متغيرة وكمية التأسيسية (ق) في الأعمال التحضيرية SJW. وبالإضافة إلى ذلك، تم تحديد التفاعلات الدوائية المحتملة مع السيروتونين الانتقائية مثبطات إعادة امتصاص السيروتونين و(5-HT 1D) مستقبلات منبهات مثل أدوية التريبتان تستخدم لعلاج الصداع النصفي. وترتبط هذه التفاعلات مع زيادة مخاطر ردود الفعل السلبية.

وقد تم تقييم النتائج والسويد والمملكة المتحدة والمخاطر المحتملة للمرضى أن تكون كبيرة، وبالتالي قدمت معلومات عن التفاعلات إلى العاملين في مجال الرعاية الصحية والمرضى. تم تعديل معلومات المنتج من الأدوية المرخصة المعنية لتعكس هذه التفاعلات التي تم تشخيصها حديثا، وقد وصفت الاستعدادات SJW طوعا مع التحذيرات المناسبة.


المقدمة

وينظر إلى التحضيرات العشبية من قبل الكثيرين وكأنها أمر طبيعي وبالتالي آمنة. ولقد أدى هذا، أدى إلى زيادة سريعة في عدد الأشخاص الذين يستخدمون هذه المنتجات. وتشير التقديرات إلى أن هناك زيادة 380٪ في استخدام المستحضرات العشبية بين عامي 1990 و 1997 في الولايات المتحدة وحدها [1]. ومع ذلك، فإن زيادة استخدام جلبت أيضا الضوء على عدد من المشاكل المرتبطة بهذه المستحضرات العشبية آمنة على ما يبدو مثل التفاعلات وردود الفعل السلبية.

نبتة سانت جون

ويمكن شراء في أوروبا والمستحضرات العشبية الولايات المتحدة نبتة سانت جون (SJW) دون وصفة طبية لعلاج مجموعة متنوعة من الظروف. ويمكن أيضا أن توصف المنتجات SJW في بعض البلدان الأوروبية. كأفراد عرض هذه العلاجات آمنة لأنها نادرا ما إبلاغ الأطباء من استخدامها أو آثار غير مرغوب فيها المحتملة [2]. ومع ذلك، تشير التقارير الأخيرة التي SJW يتفاعل مع عدد من الأدوية المختلفة، والتي يمكن أن تؤدي إلى ردود فعل سلبية خطيرة.

وقد استخدمت مقتطفات من SJW لخصائصها الطبية منذ العصور القديمة [3]. SJW (المعروف أيضا باسم عشبة) هو بيرفوراتوم، وهو عضو في الأسرة Hypericaceae. تقليديا، كان SJW عدد من الاستخدامات المختلفة بما في ذلك تطبيقه خارجيا لعلاج الجروح والحروق، أو اتخذت داخليا كما ضخ أو شاي الأعشاب لعلاج الحمى والشروط العصبي بما في ذلك الاكتئاب [4].

حاليا، تخضع لشروط معينة، والأدوية العشبية غير المرخصة يجوز بيع أو توريد كما العلاجات العشبية في المملكة المتحدة، معفاة من شروط الترخيص، بموجب المادة 12 من قانون الأدوية عام 1968. لا تطبق متطلبات السلامة أو الجودة الخاصة العلاجات العشبية غير المرخصة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن إعطاء أي مؤشرات مكتوبة حول الاستخدام المقصود للمنتج عندما يباع المنتج تحت هذا الإعفاء. في السويد، وتطبيق المتطلبات الأساسية المفروضة على المنتجات الطبية في القسم 4 من قانون المنتجات الطبية 1992 أيضا إلى العلاجات العشبية. مرخصة العلاجات العشبية بعد تقييم الجودة والسلامة والفعالية. البيانات الببليوغرافية توثيق استخدام الراسخة هي أساس للموافقة على سلامة وفعالية.

ومن المؤمل أن التوجيه المستقبلي للالعشبية التقليدية المنتجات الطبية ومواءمة تنظيم المنتجات العشبية في جميع أنحاء أوروبا.

المكونات النشطة

وقد تبين SJW لاحتواء ما لا يقل عن تسعة مجموعات من المركبات التي يمكن أن تسهم في التأثير الدوائي له [5]، ولكن الصيدلة من الكثير من مقومات ليست معروفة تماما حتى الآن [6] (الجدول 1). ومع ذلك، فمن المعروف SJW أن يكون لها تأثيرات هامة على الجهاز العصبي المركزي، والتي قد تكون مسؤولة عن تأثيره على الاكتئاب.

الجدول 1. المكونات الرئيسية للنبتة سانت جون. المقوم النسبة المئوية للتكوين مساهمة ممكنة لطريقة العمل Phenylpropanes لم يبلغ عنها - جليكوسيدات الفلافون (بما في ذلك hyperoside) 2-4٪ تثبيط MAO-A Biflavones لم يبلغ عنها تقارب ضعف لمستقبلات البنزوديازيبين العفص وبروانثوسيانيدينس 15٪ - كانثونيس تركيزات منخفضة جدا تثبيط MAO-A Phloroglucinols (hyperforin) 4٪ من البراعم والزهور تقارب لمستقبلات GABA الزيوت الأساسية لم يبلغ عنها - الأحماض الأمينية لم يبلغ عنها - Naphthodianthrones (بما في ذلك hypericin) لم يبلغ عنها -

وقد تبين أن مستخلص SJW لتمنع امتصاص السيروتونين، النورادرينالين والدوبامين [4، 7]. وقد تبين أن مستخلص SJW أن يكون لها تقارب قوي لالأدينوساين، السيروتونين 5HT 1، البنزوديازيبين وγ الغاما حمض (GABA) مستقبلات، وتمنع ضعيف أوكسيديز [1، 7]. كما تم افترض أن النشاط المضاد للاكتئاب SJW قد يكون نتيجة لتأثيره على انترلوكين 6 [5]. وhyperforin التأسيسية وربما كان المرشح الأوفر حظا لتكون مسؤولة عن النشاط المضاد للاكتئاب [8] ويمكن أن تكون حاسمة في الآثار العلاجية للSJW [9]. وهذا يعكس حقيقة أن فقط التأثير على مستقبلات GABA التي كتبها hyperforin يبدو أن من حجم كاف للحصول على تأثير مضاد للاكتئاب بجرعات علاجية من SJW [6]. ومع ذلك، فإن الآلية الدقيقة المسؤولة عن الآثار العلاجية لSJW لا تزال غير واضحة.

على الرغم من حقيقة أن الصيدلة من مختلف مكونات SJW غير معروف تماما، ويستخدم تركيز hypericin عادة لتوحيد مختلف المنتجات SJW. ومع ذلك، فإن كمية hypericin يختلف على نطاق واسع في أجزاء مختلفة من النبات، في ظل ظروف النمو المختلفة، وفي أوقات مختلفة من السنة [5]. بالإضافة إلى ذلك، hypericin ربما لا يكون المكونة الوحيد ذي الصلة. ولذلك فمن المرجح أن الاستعدادات المختلفة تختلف في محتواها من المواد المساهمة في الآثار المضادة للاكتئاب من SJW [10]. وبالتالي هناك إمكانية للمنتجات SJW مختلفة لديهم مستويات مختلفة من الفعالية وربما مختلف الملامح رد فعل سلبي.

سلبي ردود الفعل الشخصي

يمكن أن العلاجات العشبية تنتج ردود فعل سلبية، وبعضها يمكن أن تكون خطيرة وحتى قاتلة [2]. الأفراد الذين يعانون من ردود الفعل السلبية قد لا يربطون هذه مع استخدامها من المستحضرات العشبية. هذا هو أكثر تعقيدا من حقيقة أن معظم المستحضرات العشبية هي-المقررة ذاتيا ولم يذكر عند استشارة الطبيب. ردود الفعل السلبية لذلك يرتبط مع المستحضرات العشبية من المحتمل أن تكون تحت المبلغ عنها.

ردود الفعل السلبية وذكرت الأكثر شيوعا لSJW هي أعراض الجهاز الهضمي، وأمراض الحساسية، والدوخة / الارتباك والتعب / تخدير وجفاف الفم. غالبية هذه التفاعلات ويعتبر عموما أن تكون خفيفة، معتدلة أو عابر [11، 12].

ردود فعل حساسية للضوء التي تؤثر على الجلد هي ردود الفعل السلبية الخطيرة المحتملة المرتبطة SJW. وتشير البيانات الأخيرة أن ردود الفعل حساسية هي الجرعة ذات الصلة، مع زيادة الحساسية المرتبطة جرعات أعلى [13، 14]. ومع ذلك، فإن الجسم الرئيسي من الأدلة يأتي من الأدلة القولية في الحيوانات والماشية البشرة شاحبة على وجه الخصوص، والتي الخانق على ما يبدو بيرفوراتوم مما أدى إلى ردود فعل حساسية للضوء الشمس تقديم بالحدة حرق [15].

ويتبين من استعراض سلامة أن المعدل العام من ردود الفعل السلبية المرتبطة SJW منخفض [11]. التحليل التلوي من 1757 مريض في التجارب السريرية للSJW، أظهرت أن العلاج SJW كان مرتبطا مع 3 فقط (0.8٪) إسقاط الرافضة بسبب ردود الفعل السلبية، بالمقارنة مع 7 (3٪) المتسربين في المرضى الذين يتلقون مضادات الاكتئاب التقليدية. وعلاوة على ذلك، تم الإبلاغ عن ردود الفعل السلبية فقط في 19.8٪ من المرضى الذين يتلقون الاستعدادات SJW، مقارنة مع 52.8٪ من المرضى الذين يتلقون مضادات الاكتئاب التقليدية. كل من هذه الخلافات هي غاية ذات دلالة إحصائية [3]. ومع ذلك، فإنه من المثير للاهتمام أن نلاحظ أن معدل التفاعلات السلبية وذكرت يختلف تبعا لنوع من الدراسة. وكانت ردود الفعل السلبية من المرجح أن يتم الإبلاغ خلال التجارب السريرية مقارنة استخدام SJW مع مضادات الاكتئاب التقليدية من خلال التجارب التي تسيطر عليها وهمي، وقد اقترح من قبل واضعي هذا التحليل أن هذا يعكس على الأرجح جزئيا توقع المريض [11].

تفاعلات SJW

وقد تم تحديد عدد من الدوائية والدوائية التفاعلات الهامة سريريا. الأعشاب لديها القدرة على التأثير على التصرف الأيض وكلاء مع أهميتها السريرية والسمية كبيرة [16، 17]. وتتلخص تفاصيل التفاعلات التي تم تحديدها والآليات الممكنة في الجدول 2.

الجدول 2. الدوائية المحتملة والتفاعلات الدوائية مع SJW. عقار آلية العمل الممكنة التفاعلات الدوائية الوارفارين وفينوبروكومون تحريض CYP2C9 السيكلوسبورين تحريض CYP3A4 والبروتين النقل P-بروتين سكري حبوب منع الحمل تحريض CYP1A2 وCYP3A4 الثيوفيلين تحريض CYP1A2 الديجوكسين تحريض البروتين النقل P-بروتين سكري مثبطات الأنزيم البروتيني فيروس نقص المناعة البشرية تحريض CYP3A4 فيروس نقص المناعة البشرية غير نوكليوزيد مثبطات إنزيم النسخ العكسي تحريض CYP3A4 مضادات الاختلاج (كاربامازيبين، فينيتوين الفينوباربيتون و) تحريض CYP3A4 التفاعلات الدوائية اس اس اراي التقوية تركيزات السيروتونين أدوية التريبتان التقوية تركيزات السيروتونين
الإنزيم الذي يحفز تأثير المكونات

المكونات المسؤولة عن استقلاب الدواء انزيم الاستقراء لم تدرس بشكل منتظم. ولذلك فمن الصعب الحكم الذي محددة مقتطفات التأسيسية (ق) هي المسؤولة عن تحريض. نشرت في الدراسات المختبرية تشير إلى أن hypericin قد تحفز نشاط CYP1A2 [16] وhyperforin قد يحرض أن من CYP3A4 [17-19]. ومع ذلك، لم يتم التحقيق مكونات أخرى من SJW بشأن خصائص الانزيم الاستقراء. كما مختلف المنتجات استخراج تختلف في تكوينها التأسيسية أنه ليس من الممكن لتقييم ما إذا كان إعداد معين من المرجح أن يسبب تحريض من أي إعداد الأخرى.

واحدة فقط من الناخبين غير موحد بانتظام، فإنه من الصعب استقراء هذه في المختبر البيانات إلى الوضع في الجسم الحي. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات وبخاصة التحقيق في الآثار المترتبة على التعرض لفترات طويلة من SJW عن أنشطة الإنزيمات مختلفة. قد يكون هذا أهمية خاصة حيث استخدام SJW في خفيفة الى معتدلة الاكتئاب يتسق مع استخدام على المدى الطويل.

التفاعلات الهامة سريريا

الوارفارين وphenoprocumon

وقد تم التعرف على التفاعل بين SJW والوارفارين أو phenoprocumon من تقارير حالة عفوية [20]. نشرت أربع حالات انخفاض تأثير الوارفارين أثناء العلاج SJW في نشرة السويدية للمنتجات الطبية وكالة (MPA) في نهاية عام 1998. وبين عامي 1998 و ديسمبر 2000 تم الإبلاغ عن 22 حالة عفوية تقارير من التفاعلات مع الوارفارين إلى السلطات التنظيمية في الاتحاد الأوروبي. وأسفرت هذه التفاعلات في كل القيم INR غير مستقرة، مع انخفاض في قيمة INR كونها الأثر الأكثر شيوعا لوحظ من SJW [21، 22].

يتم استقلاب النشط دواء S-جزيئي الوارفارين التي كتبها CYP2C9 [23، 24] والتأثير على قيم INR تشير تحريض CYP2C9 يحدث. ومع ذلك، ما زال لتأكيد هذا في المختبر أو في الجسم الحي.

السيكلوسبورين

تم التعرف على التفاعل مع السيكلوسبورين في البداية من تقارير حالة عفوية في سويسرا. وقد تم نشر أربعة تقارير حالة [25-27]. وبالإضافة إلى ذلك تم الإبلاغ عن حالة عفوية واحد في الاتحاد الأوروبي.

الحالات المنشورة المعنية المرضى الذين تلقوا زرع قلب (ن = 2)، الكلى (ن = 1) والبنكرياس (ن = 1). وقد تم الكشف عن تركيزات الدم انخفضت من السيكلوسبورين خلال لوحظ SJW العلاج وزرع الكسب غير المشروع الرفض في كل حالة من هذه الحالات. بعض المرضى تعافى بشكل عفوي بعد وقف SJW، في حين يتطلب البعض الآخر العلاج ايم munosuppressive إضافية. تراوح الانخفاض في مستويات السيكلوسبورين من 25٪ [5] إلى 62٪ [25] في غضون 3-4 أسابيع من بدء SJW.

تم العثور على الثلاثين المرضى الذين يعانون من الطعوم الكلى في معهد واحد ليكون انخفاض مستويات تركيزات الدم السيكلوسبورين من متوسط ​​47٪ (المدى 33-62٪) بشكل كبير. أدى هذا إلى زيادة جرعات السيكلوسبورين من متوسط ​​46٪ (المدى 15-115٪). بعد توقف SJW، كان تركيز السيكلوسبورين بنسبة بمتوسط ​​187٪ (المدى 84-292٪) والجرعة من السيكلوسبورين أن انخفضت إلى مستويات معينة قبل SJW تم القبض عليه [28].

وقد تبين السيكلوسبورين أن تكون ركيزة من P-بروتين سكري واستقلابه من قبل CYP3A4 [29، 30]. وبالتالي تحريض على حد سواء CYP3A4 وP-بروتين سكري من قبل التأسيسية (ق) من SJW قد تعمل على خفض مستوى البلازما من السيكلوسبورين إلى مستويات subtherapeutic [21]. هذا يمكن أن يؤدي إلى نتائج مهمة سريريا مثل الرفض من العضو المزروع.

حبوب منع الحمل

عملية التمثيل الغذائي للحبوب منع الحمل يمكن أن تختلف بين المنتجات. ومع ذلك، يتم استقلاب كل من الانزيمات السيتوكروم P450. الانزيمات أظهرت أن تكون الناجم عن SJW CYP1A2، 2C9 و3A4 كلها متضمنة [31-34].

تم الإبلاغ عن اختراق النزيف بين النساء اللواتي يتناولن كلا SJW وحبوب منع الحمل عن طريق الفم. اعتبارا من ديسمبر 2001، تم الإبلاغ عن 7 حالات الحمل غير المخطط لها ربما بسبب التفاعلات مع SJW من خلال نظام بطاقة صفراء في المملكة المتحدة، وقد ذكرت حالتين في السويد. ويرد تفصيل هذه التقارير الحال في الجدول 3.

جدول 3. توزيع حالة الحمل غير مقصودة التقارير. عمر (سنة) وسائل منع الحمل عن طريق الفم (OC) مدة العلاج OC مدة العلاج SJW 21 Mercilon 8 أشهر 3 اشهر 30 Trinovum 3 سنوات 3 اشهر 23 Levonelle-2، Cilest 1 سنة على OC 1 منذ أشهر 34 Marvelon - 9 شهور 31 Cilest 8 أشهر 6 اشهر 28 Ovran 30 - 5 شهور 37 Noriday سنتان 4 اشهر 31 Trinovum 7 أشهر 4 اشهر 28 Trinordiol 9 سنوات 6 اشهر

ويعتقد أن هذه التفاعلات أن ذلك يعود إلى خفض مستويات الدواء، نتيجة للتحريض CYP3A4 [21، 22]، على الرغم من أي تركيز الدم وقد سجلت في حالة التقارير الواردة حتى الآن. ومع ذلك، في دراسة التفاعل أولية واحدة، والتي تم تقديمها في شكل المجرد فقط، لم يلاحظ أي تغييرات في تركيز هرمون الاستروجين في الدم بعد إعطاء مستخلص عشبة زي 117 [35].

بشكل عام كل هذه التفاعلات وقعت في النساء الذين كانوا على وسائل منع الحمل عن طريق الفم دون نزيف اختراق ومع وسائل منع الحمل فعالة لمدة 7 أشهر على الأقل قبل SJW التي يجري اتخاذها. ليس هناك أدلة تشير إلى أن هذه التفاعلات وقعت مع منتجات محددة مثل جرعة منخفضة أو البروجستيرون حبوب منع الحمل فقط.

الثيوفيلين

تم التعرف على التفاعل بين SJW والثيوفيلين خلال تحليل لحالة محددة ([16]. ويشير هذا التقرير حالة تحريض على CYP1A2 انزيم الكبد، وهو أمر مهم للتخليص الثيوفيلين [16، 36].

الديجوكسين

وقد تم تحديد هذا التفاعل قد تكون خطيرة في الدراسة الدوائية [8]. ويعتقد أن الدوائية الديجوكسين تتأثر تحريض P-بروتين سكري بعد العلاج جرعة متعددة مع مستخلص عشبة. ويرجع ذلك إلى حقيقة أن هذه ر محطة 1/2 للقضاء الديجوكسين بقي ثابتا، ولكن انخفاض في مئوية كحد أقصى و لوحظ AUC الذي كان يعتقد أن تعكس تأثير على امتصاص أو توزيع، بدلا من عملية التمثيل الغذائي [8].

وقد ثبت محرضات أخرى من إزالة الديجوكسين مثل ريفامبيسين والفينيتوين لخفض تركيز الديجوكسين البلازما، بوساطة المقاومة للأدوية المتعددة الجين (MDR-1) المنتج P-بروتين سكري. لم يتم تحديد أي تقارير حالة عفوية من التفاعلات بين SJW والديجوكسين.

مثبطات الأنزيم البروتيني فيروس نقص المناعة البشرية

وقد تم تحديد هذا التفاعل قد تكون خطيرة من خلال دراسة الدوائية محددة [37]. أظهر جميع المشاركين انخفاض في تركيز اندينافير 8 ساعات بعد الجرعات. تراوحت هذه 49-99٪. انخفاض SJW مفوضية الاتحاد الأفريقي من اندينافير من متوسط ​​57٪. انخفاض بهذا الحجم يمكن أن يؤدي إلى تطوير فشل العلاج ومقاومة الأدوية.

كما تم الإبلاغ عن حالة واحدة عفوية في المملكة المتحدة، حيث واجه المريض زيادة في فيروس نقص المناعة البشرية RNA الحمل الفيروسي في أعقاب استخدام SJW بالتزامن مع اندينافير واميفودين.

التفاعلات الدوائية بين مثبطات السيروتونين الانتقائية إعادة امتصاص (اس اس اراي)

SJW واس اس اراي يؤدي إلى الأعراض المميزة السيروتونين يزيد المركزي [38-41]. وتتميز متلازمة السيروتونين من قبل ثلاثة على الأقل من العناصر التالية: الارتباك، والإثارة، فرط المنعكسات، تعرق غزير، يرتجف أو رعاش، والغثيان، والإسهال، ونقص التنسيق، والحمى والغيبوبة، وبيغ أو انحلال الربيدات [42]. ويعتقد أن السيروتونين الزائد أن ذلك يعود إلى آليات الدوائية عمل مشتركة على السيروتونين، وخاصة في الدماغ، على حد سواء SJW ومضادات الاكتئاب التقليدية [7، 43، 44].

فقد قيل في الأدبيات التي SJW لا ينبغي أن تستخدم مع العقاقير ذات التأثير العقلي أو العقلية، والقدرة على الآثار السلبية قد زادت. في معظم التجارب السريرية للمرضى SJW اتخاذ المنتجات الطبية المضادة للاكتئاب التقليدية تم استبعادها من الدراسات. وبالتالي فإن صورة الأمان الجمع بين هذه العوامل مع SJW غير معروف تماما ومصالح سلامة المرضى ينبغي تجنب هذه المجموعات.

نقاش

حتى وقت قريب نسبيا لم تكن هناك تفاعلات المعترف بها بين SJW والأدوية الموصوفة. المرضى ومع ذلك، فإن غالبية التجارب السريرية تبحث في فعالية استبعاد تتخذ بالفعل العقاقير ذات التأثير العقلي أو العقلية، وبالتالي لم تحقق هذا النوع من التفاعل عشب المخدرات. بعض التجارب السريرية، ومع ذلك، لم تشمل المرضى الذين يتناولون أدوية لارتفاع ضغط الدم، واضطرابات في الدورة الدموية، الربو القصبي وأعراض سن اليأس مع عدم وجود دليل على أي التفاعلات بينها وبين SJW [9].

معظم التفاعلات التي تم تحديدها حتى الآن تشمل الأدوية التي تتطلب الرصد المنتظم لمستويات الدم. ومع ذلك، فإن التفاعل مع تحديد وسائل منع الحمل عن طريق الفم، دون مراقبة الدم، ومن المرجح أن تؤثر على عدد كبير من الأفراد. وبالنظر إلى أن عدد الأدوية التي تتطلب حاليا الرصد منخفضة، مقارنة مع عدد من الأدوية في السوق التي يتم استقلابه من قبل أي CYP1A2، 2C9 أو 3A4، فمن المحتمل جدا أن المزيد من التفاعل مع SJW ستحدد في المستقبل.

الجدول 4 يقدم تفاصيل التفاعلات الهامة سريريا المنشأة، وآثارها وإدارة المحتملة. تدرج فيروس نقص المناعة البشرية غير نوكليوزيد مثبطات إنزيم النسخ العكسي ومضادات الاختلاج في هذه القائمة حيث أنها تعتبر أن التفاعلات مع SJW أيضا تمثل خطرا محتملا لسلامة المرضى نظرا الصيدلة نظرها.

الجدول 4. ملخص التفاعلات والآثار المترتبة عليها. عقار أثر التفاعل على المخدرات إدارة المقترح المرضى الذين يتناولون بالفعل الاستعدادات SJW مثبطات الأنزيم البروتيني فيروس نقص المناعة البشرية (اندينافير، نلفينافير، ريتونافير، ساكوينافير) تركيزات الدم انخفاض مع خسارة ممكنة من قمع فيروس نقص المناعة البشرية. قياس فيروس نقص المناعة البشرية RNA الحمل الفيروسي ووقف SJW. فيروس نقص المناعة البشرية غير نوكليوزيد مثبطات إنزيم النسخ العكسي (ايفافيرنز، نيفيرابين) تركيزات الدم انخفاض مع خسارة ممكنة من قمع فيروس نقص المناعة البشرية. قياس فيروس نقص المناعة البشرية RNA الحمل الفيروسي ووقف SJW. الوارفارين خفض تأثير المضاد للتخثر والحاجة إلى زيادة جرعة الوارفارين. تحقق INR ووقف SJW. رصد INR عن كثب لأن هذا قد يرتفع على وقف SJW. جرعة الوارفارين قد تحتاج تعديل. السيكلوسبورين تركيزات الدم انخفاض مع مخاطر رفض الزرع. تحقق من تركيزات الدم السيكلوسبورين ووقف SJW. تركيزات السيكلوسبورين قد تزيد على وقف SJW. جرعة من السيكلوسبورين قد تحتاج تعديل. حبوب منع الحمل خفض تركيزات الدم مع خطر الحمل غير المرغوب فيه ونزيف اختراق. وقف SJW. مضادات الاختلاج (كاربامازيبين، الفينوباربيتون، الفينيتوين) تركيزات الدم انخفاض مع خطر النوبات. تحقق تركيزات مضاد ووقف SJW. تركيزات مضاد قد تزيد على وقف SJW. جرعة من مضاد قد تحتاج تعديل. الديجوكسين تركيزات الدم انخفاض واحتمال فقدان السيطرة على إيقاع القلب أو فشل القلب تحقق تركيزات الديجوكسين ووقف SJW. تركيزات الديجوكسين قد تزيد على وقف SJW. جرعة الديجوكسين قد تحتاج تعديل. الثيوفيلين تركيزات الدم انخفاض واحتمال فقدان السيطرة على الربو أو الحد الهوائية المزمن. تحقق تركيزات الثيوفيلين ووقف SJW. تركيزات الثيوفيلين قد تزيد على وقف SJW. جرعة من الثيوفيلين قد تحتاج تعديل. أدوية التريبتان (سوماتريبتان، naratriptan، rizatriptan، zolmitriptan) زيادة تأثيرات هرمون السيروتونين مع خطر زيادة حدوث ردود فعل سلبية. وقف SJW. اس اس اراي (سيتالوبرام، فلوكستين، فلوفوكسامين، الباروكستين، سيرترالين) زيادة تأثيرات هرمون السيروتونين مع خطر زيادة حدوث ردود فعل سلبية. وقف SJW.

الارتفاع الكبير في استخدام العلاجات العشبية بما في ذلك SJW يعني أن العديد من المرضى على الأدوية التقليدية يتعرض. ونادرا ما يتم ذكر هذه الأنواع من العلاجات للأطباء، لذلك هناك القليل من المعرفة الذين يتناولون هذه المنتجات ولما المؤشرات.

العديد من الأفراد يعتبرون العلاجات العشبية وكأنها أمر طبيعي وبالتالي آمنة. ومع ذلك، هناك نقص في النصائح العامة متاحة للمرضى الذين يرغبون في استخدام هذه المنتجات. وبما أن غالبية هذه التفاعلات SJW يؤدي إلى نقص فعالية الدواء التقليدي في كثير من الأحيان لا يعرفون على أنهم كما التفاعلات. المرضى الذين لاحظوا أن الطب التقليدي بهم لا يعمل، فضلا عن أنها تستخدم ل، قد طلب المشورة بشأن البدائل المحتملة لهذه الأدوية، في حين أنها لا تزال تستخدم بصورة متزامنة SJW، لا تفكر بأنها الجاني ممكنا أو الإشارة إلى استخدام SJW إلى هم الطبيب المعالج.

مطلوب التعليم المستمر للمستهلكين والمتخصصين في الرعاية الصحية حول إمكانية التفاعل عشب المخدرات لضمان مزيد من التفاعلات لا تحدث.

الإجراءات التنظيمية

بعد استعراض الأدلة المتاحة باشرت السلطات التنظيمية في السويد والمملكة المتحدة عددا من الإجراءات التنظيمية بهدف منع مزيد من التفاعلات التي تحدث. تمت إضافة تحذير المتعلقة بالتفاعل عشب المخدرات إلى معلومات المنتج من المنتجات الطبية المحددة، حيث كانت هناك أدلة كافية أو خطر محتمل التفاعل مع الآثار السريرية خطيرة.

تمت إضافة تحذير عام لتغليف المنتجات SJW في السويد والمملكة المتحدة. في المملكة المتحدة، في أعقاب اتفاق تم التوصل إليه مع الاتحادات التجارية، والدول وسم "ينبغي أن المرضى الذين تحقق مع الطبيب أو الصيدلي قبل تناول منتج SJW إذا كانت تأخذ أي دواء كما SJW قد تؤثر على الطريقة التي يعمل الدواء. في السويد، وقد طلبت MPA الشركات التي تسوق SJW أداء منتج معين في الدراسات المجراة. قبل أن تصبح النتائج النهائية المتاحة، وقد تم تعديل وصفها القول بأن المنتجات SJW لا ينبغي أن تستخدم بالتزامن مع أي منتج دوائي.

بسبب المخاطر المحتملة للمرضى، وقدمت معلومات عن التفاعلات SJW إلى كل العاملين في مجال الرعاية الصحية والجمهور. في السويد، ونشرت العديد من المقالات مع معرفة محدثة بشأن هذه المسألة في النشرة الوطنية للسلامة الدواء وكذلك على شبكة الانترنت في 1999 و 2000. وصدر بيان صحفي في السويد في نوفمبر 1999. في المملكة المتحدة، تم توزيع إلكتروني ل جميع الأطباء والصيادلة مارس 2000. وفي الوقت نفسه، تم تقديم هذه المعلومات أيضا إلى الجمعيات المتخصصة والصحافة. ثم تلت المعلومات الأولية التي كتبها مقال تذكير في طبعة مايو 2000 من مشاكل الحالي في التيقظ الدوائي [23].

عن طريق تقديم المعلومات مباشرة إلى المتخصصين في الرعاية الصحية والجمهور على SJW، كما تم زيادة الوعي سلامة المستحضرات العشبية. ويمكن ملاحظة ذلك من خلال الزيادة 167٪ في عدد من التقارير بطاقات صفراء من قبل CSM / MCA تلقى المنتجات العشبية في السنة التالية.

النتائج

هناك أدلة على أن اتخاذ الاستعدادات SJW يمكن أن يؤدي إلى التفاعلات الدوائية أو الدوائية التي تشكل خطرا على المرضى الذين يتناولون الأدوية. البيانات في الوقت الحاضر غير كافية للإشارة إلى أي مدى استخدام منتجات SJW مختلفة وجرعات قد تنتج نتائج مختلفة من حيث ردود الفعل السلبية.

التفاعلات الدوائية التي تم تحديدها حتى الآن كل نقطة في اتجاه حقيقة أن التأسيسية (ق) من SJW لحث ليس فقط على عدد من الإنزيمات استقلاب الدواء ولكن أيضا نقل البروتينات مثل بروتين سكري P.

حتى الآن هناك أدلة أقل المتعلقة التفاعلات الدوائية. ولكن نظرا لانتشار استخدام هذه المنتجات، وهناك إمكانات كبيرة للتفاعلات سلبية خطيرة تحدث. لذلك يجب النظر أيضا في هذه التفاعلات كما مخاطر السلامة المحتملة.

ولذا فمن الضروري أن المرضى ردا على سؤال حول استخدام أكثر من وصفة طبية، بما في ذلك العلاجات العشبية عندما تتطلب وصفة الدواء أو الحاضر مع رد فعل سلبي. ومن الضروري أيضا أن يقدم تقريرا عن ردود الفعل والتفاعلات السلبية يشتبه المرتبطة العلاجات العشبية من أجل الحصول على معلومات بشأن سلامتهم المزمع إنشاؤها.

نود أن نعترف المشورة والمساعدة من الزملاء التالية: الدكتور راشمي شاه، الدكتور ليندا أندرسون، الدكتور باتريك والر، الدكتور يونيو رين، أستاذ السدير بريكنريدج، أستاذ منير Pirmohamed والبروفيسور مارتن كيندال.

المراجع

• 1
  أيزنبرغ D، ديفيد RB، Ettner SL، وآخرون. الاتجاهات في استخدام الطب البديل في الولايات المتحدة. . 1990-1997 JAMA 1998؛ 280: 1569-1575.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 2
  بارنز J، المطاحن SY، أبوت NC، يلوبي M، ارنست E. معايير مختلفة للإبلاغ عن ردود الفعل السلبية على العلاجات العشبية والأدوية التقليدية OTC: وجها لوجه لقاءات مع 515 مستخدمين من العلاجات العشبية برازيلي J كلين Pharmacol 1998؛ 45: 496-500.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • المادة كاملة (HTML)
  • PDF (76K)
  • المراجع
  • شبكة Science®
• 3
  يتلي D. عشبة استخراج -potential في علاج الاكتئاب CNS المخدرات 1998؛ 9: 431-440.

  • CROSSREF،
  • شبكة Science®
• 4
  تونبريدج، كينت جذر القديسين المشكلة الصيدلي الصيدلي 1999؛ 249: 22 - 26..
• 5
  ري JM، والتر G. بيرفوراتوم (نبتة سانت جون) في الاكتئاب: الآفات أو نعمة MJA 1998؛ 169: 583-586؟.

  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 6
  . SJW مجهول، وهو خيار العشبية لعلاج الاكتئاب المخدرات ذر آفاق 1999؛ 14.
• 7
  . مولر WE، روللي M، شافر C، هافنر U. آثار استخراج عشبة (LI 160) في النماذج البيوكيميائية من النشاط المضاد للاكتئاب Pharmacopsychiat 1997؛ 30 (ملحق): 102-107.

  • CROSSREF،
  • شبكة Science®
• 8
  Johne A، Brockmoller J، باور S، مورير A، Langheinrich M، جذور I. الدوائية والتصرف المخدرات: التفاعل الدوائية الديجوكسين بخلاصة الاعشاب من سانت جون ورت (بيرفوراتوم) كلين Pharmacol ذر 1999؛ 66: 338-345 .

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • المادة كاملة (HTML)
  • PDF (121K)
  • المراجع
  • شبكة Science®
• 9
  Stevinson C، E. إرنست سلامة عشبة في المرضى الذين يعانون من الاكتئاب المخدرات CNS 1999؛ 11: 125-132.

  • CROSSREF،
  • شبكة Science®
• 10
  لينده K، G راميريز، Mulrow CD، بولس A، Weidenhammer W، Melchart DSJW للاكتئاب: لمحة عامة وتحليل تلوي التجارب السريرية العشوائية برازيلي ميد J 1996؛ 313: 253-258.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 604
• 11
  إرنست E، راند JI، الشون J، Stevinson C. الآثار الضارة السيرة الذاتية للاكتئاب العشبية نبتة سانت جون (بيرفوراتوم L.) يورو J كلين Pharmacol 1998؛ 54: 589-594.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 12
  Woelk H، G بوركارد، Grinwald J. فوائد ومخاطر ال 160 عشبة استخراج LI: دراسة مراقبة المخدرات مع 3250 مريضا J Geriatr الطب النفسي Neurol 1994؛ 7 (ملحق 1): 534-538.
• 13
  Brockmoller J، Reum T، باور S، وآخرون عشبة وpseudohypericum: الدوائية والآثار على حساسية لدى البشر Pharmacopsychiatry 1997؛ 30 (ملحق 2): 94-107..

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 14
  دوران N، كلمات PS Hypericin وعملها الضوئي Photochem Photobiol 1986؛ 43:.. 677-680.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • PDF (418K)
  • المراجع
  • شبكة Science®
• 15
  أرايا OS، فورد EJH التحقيق من نوع ضيائية الناجمة عن تناول نبتة سانت جون (بيرفوراتوم) من خلال العجول J شركات Pathol 1981؛ 91: 135-141..

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 16
  . نيبل A، شنايدر BJ، بيكر RK، كرول DJ التفاعل الأيضي المحتملة بين نبتة سانت جون والثيوفيلين آن Pharmacother 1999؛ 33: 502.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 17
  مور LB، جودوين B، جونز SA. وآخرون يستحث نبتة سانت جون استقلاب الدواء كبدي من خلال تفعيل بريغنان X المستقبلة. بروك Natl أكاد العلوم 2000؛ 97: 7500 - 7502.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science® تايمز تذكر: 471،
  • ADS
• 18
  الرصيف R، باور S، Brockmöller J، جذور I. يتأثر البولية معدل إفراز 6-SS-hydroxycortisol عن طريق العلاج مع عشبة استخراج. اليورو J كلين Pharmacol 1997؛ 52: A186 (ملخص).
• 19
  روبي A، كانتور E، أندرسون G، القديس Burstein A. تأثير سانت جونز ورت على النشاط CYP3A4 (ملخص). NCDEV، الاجتماع السنوي ال39، بوكا راتون، فلوريدا، 14 يونيو 1999.
• 20
  مورير A، Johne A، باور S، وآخرون تفاعل سانت جونز استخراج نبتة مع phenoprocumon. اليورو J كلين Pharmacol 1999؛ 55: A22.
• 21
  ارنست E. الأفكار الثانية حول سلامة SJW. انسيت 1999؛ 354: عام 2014 - عام 2016.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 22
  يو QY، بيرجكويست C، Gerden B. سلامة نبتة سانت جون. انسيت 2000؛ 355: 576-577.
• 23
  كامينسكي LS، تشانغ ZY. P450 الإنسان استقلاب الوارفارين. Pharmacol ذر 1997؛ 73: 67 - 74.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 24
  عمال المناجم JO،. بيركت DJ السيتوكروم P450 2C9: انزيم من أهمية كبرى في استقلاب الدواء البشري. برازيلي J كلين Pharmacol 1998؛ 45: 525 - 538.

  رابط مباشر:

  • ملخص
  • المادة كاملة (HTML)
  • PDF (318K)
  • المراجع
  • شبكة Science®
• 25
  Ruschitzka F، ماير PJ، Turina M، Luscher TF، نول G. رفض زرع قلب الحاد بسبب نبتة سانت جون. انسيت 2000؛ 355: 548 - 549.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 26
  بارون GW، Gurley BJ، Ketel BL، لايتفوت ML، أبو العز SR. التفاعلات الدوائية بين نبتة سانت جون وcyclosprine. آن Pharmacother 2000؛ 34: 1013 - 1016.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 27
  ماي I، كروجر H، BUDDE K، وآخرون التفاعل الدوائية الخطرة من نبتة سانت جون (بيرفوراتوم) مع السيكلوسبورين مناعة. الباحث J كلين Pharmacol ذر 2000؛ 38: 500 - 502.

  • CROSSREF،
  • مجلات،
  • شبكة Science®
• 28
  Breidenbach TH، Kliem V، بورغ M، Radermacher J، هوفمان MW. نقص شديد في السيكلوسبورين A كلها مستويات القاع الدم الناجم عن نبتة سانت جون (بي

 

[رافت ابراهيم]

 

عشبة العرن أو حشيشة القلب أو عشبة الورت (سانت جونز) كلها مسميات لهذه العشبة المعمرة ذات السيقان الدقيقة وأزهارها صفراء جميلة، و تنمو برياً في كثير من أنحاء العالم وهي متواجدة في سورية بكثرة وخاصة بجبل عبد العزيز كما كتب عنها الانطاكي قي تذكرته.وقد انتشرت بشكل واسع في اوروبا وامريكا حتى باتت توصف في مستشفيات تلك البلاد بشكل منتظم لمرضى الاكتئاب.
الاسم العلمي لنبتة سانت جونز هو: Hypericum perforatum . والجزء الذي يستخدم من هذه العشبة السيقان المزهرة،
لهذه العشبة فوائد مدهشة فهي تعالج الاكتئاب والقلق والرهاب والحزن ،مهدئة ومريحة للأعصاب، تعالج الوسواس القهري
تعتبر العشبة مقوية للكبد والمرارة، والزيت الأحمر المستخرج من الأوراق مطهر ممتاز ويستخرج خارجياً لعلاج الجروح والحروق ولتفريج المغص وألم العصب.
تم استخدام العشبة لعلاج العديد من الآلام، مثل آلام النساء أو العصب الوركي، و عضات الزواحف السامة, كما أنها علاج شعبي لآلام الكلى و الرئة بالإضافة إلى الضعف و الوهن العام للجسم وكعلاج للهستريا واضطرابات الطمث.
تحتوي هذه النبتة على فلافونيدات وأهم المركبات في هذه العشبة هي زيت طيار والذي يشمل الكارفيلين كما تحتوي على الهيبرسين وشبه الهيبرسين وروتين وهيبرين وكاتيكول وراتنج وبكتين وكولين ونورسيتين.
لقد أثبتت الدراسات فائدة هذه العشبة في علاج التبول الليلي الاإرادي خاصة عند الأطفال، وهذه الفاعلية هي من خلال الجهاز العصبي. كما تستخدم لعلاج بعض حالات الكآبة والقلق والكوابيس والأحلام المروعة عند الأطفال. كما يستخدم زيت العشبة لعلاج القرحة في المعدة حيث يستعمل بمعدل ملعقة صغيرة صباحاً على معدة خالية وأخرى عند المساء والاستمرار لمدة شهرين إلى ثلاثة أشهر.
و يستخدم بمعدل ملء ملعقة صغيرة من مجروش الأزهار ورؤوس الأغصان مع ملء كوب ماء مغلي ويترك لمدة 10دقائق ثم يصفى ويشرب بمعدل مرة في الصباح وأخرى في المساء. كما يوجد منه مستحضر مقنن يباع في محلات الأغذية التكميلية.
هناك وصفات خاصة عند بعض أطباء الأعشاب والطب التكميلي لعلاج أمراض القلب والشرايين ووصفات لعلاج التبول اللا إرادي وتم الشفاء منه في أقل من شهر.

التحذيرات :
- يوصي الدّكتور دونالدبراون من جامعة باستير الأشخاص ذو البشرة الفاتحة أن يتجنبوا التعرض لأشعة الشمس القوية و المصادر الأخرى للضوء فوق البنفسجيه عند أخذ نبتة الهيوفاريقون ( سانت جونز) بسبب بعض الحالات للحساسية الضوئية التي قد أبلِغت .
- أيضًا ينصح تجنب الأطعمة ألتي تحتوي على تيراماين, و تجنب المشروبات الكحولية, و علاجات الإنفلونزا أثناء أخذ عشبة سانت جونز .
- أيضًا عشبة سانت جونز لا يجب أن تُؤخذ أثناء أخذ أدوية مضادات للاكتئاب أو للأطفال أو النساء أثناء الحمل أو الرضاعة إلا باستشارة الطبيب.
- أما أكثر خبراء الاعشاب فانهم صرحوا أنه لا مخاطرات صحية أو آثار جانبيّة معروفةً لجرعات الهيوفارقون العلاجية المحدّدة .
في الختام:
هذه معلومات تثقيفية لكن ننصح بمراجعة الطبيب المختص أو خبير الأعشاب لمعرفة الجرعة حسب الحالة الصحية لمن أراد استخدام هذه الأعشاب.

 

[رافت ابراهيم]

 

عشبة سان جون او حشيشة القلب .. مفيدة لعلاج حالات الأكتئاب العام ، وتساعد علي النوم ، وتحد من الأضطرابات النفسية والعصبية

عشبة سان جون St. Johns Wort

الأسم العلمى : Hypericum perforatum
...
الأجزاء المستخدمة وأين تنمو؟
توجد عشبة القديس سان جون أو ما يعرف باللغة الفارسية - كل راعى - ومن أسمائها أيضا داذي رومي ، وخمر الشيطان ، والمنسيه وعصبة قلب ، وام الف ثقب ، وحشيشة القلب.
وهي موجودة في أوروبا ، وعلي الأخص مستوطنة فى أنجلترا، كما توجد فى الولايات المتحدة، وتتوفر بكثرة في كاليفورنيا الشمالية وجنوب ولاية أوريجون، وتوجد أيضا فى أنحاء عدة من العالم. وهى توجد على جوانب الطرقات، وعلى ضفاف الأنهار، وتجمع الأجزاء الهوائية للنبات أثناء موسم الازهار.

وقد وجدت أصناف مشابهة حول العالم. وكانت العشبة تستخدم فى عصور الظلام الأوروبية لما يشاع عنها بأنها تطرد الشياطين والأرواح الشريرة. وكانت ومازالت تستخدم فى علاج حالات الانفعالات والتوتر العصبى.

الاستخدام التقليدي أو التاريخي:
في العهد الإغريقي القديم تم استخدام العشبة لعلاج العديد من الآلام، مثل آلام النساء أو العصب الوركي، وعضات الزواحف السامة. وعشبة سان جون كانت ولاتزال معروفة أكثر في العلاج الموضعي للجروح والحروق. كما أنها علاج شعبي لآلام الكلى والرئة بالإضافة إلى الضعف والوهن العام للجسم.

المركبات الفعالة.
حشيشة سان جون ذات تكوين كيميائي متنوع ومعقد يحتوي على الهيبرسين hypericin والانثرونات الثنائية الأخرى dianthrones. والفلافونويدات، والزنثونات xanthones والهيبروفورين hyperforin.
وكان يعتقد سابقا بأن الفعالية المقاومة لحالات الإكتئاب المتميزة لعشبة سان جون ترجع إلى (الهيبرسين) الذى يعمل على كبح جماح أنزيم المونو أمين أوكسيدز monoamine oxidase المؤدى إلى حدوث حالات الإكتئاب النفسى. واعتبرت الأبحاث الحالية هذا الاعتقاد تحديا لها ، حيث ركزت الدراسات الحالية على مكونات أخرى مثل الهيبرفورين، الاكثانثون، والفلافونويدات. كما ان العشبة تحتوى أيضا على الزيوت الطيارة مثل carophyllene.

وتفترض الأبحاث الجديدة أن عشبه سان جون ربما تكون ذات فعالية مقاومة للاكتئاب، وذلك بمنع إعادة امتصاص الدوبامين dopamin. والنورإبينفرين norepinephrine. والسيروتونين serotonin. والتى تعتبر كلها من الناقلات للإشارات العصبية المختلفة فى المخ. ويعمل مركب (الهيبرفورين) على الحد من إعادة امتصاص تلك الناقلات العصبية، وهذا مما يجعل عشبه سان جون قادرة على العمل كمقاوم للوهن والضعف المصاحب للكآبة.

تستخدم عشبه جون فيما يتصل بالأحوال التالية.
• الوهن، وحالات الضعف العام للجسم.
• الإضطرابات النفسية والعاطفية.
• القلق النفسى.
• الاضطرابات ثنائية القطب المسببة لحالات الإكتئاب النفسى.
• التهابات الأذن المتكررة.
• الزكام، والبرد العام.
• الجروح، والتهابات الجلد.
• التهاب غشاء القولون المخاطي التقرحي.
• البهاق (بياض الجلد).
• حث التئام الجروح بسرعة.

ما هو المقدار الذي يتم عادة تناوله ؟
الكمية القياسية الموصى بها للوهن المتوسط إلى الخفيف هي 300 مليجرام من مستخلص عشبة سان جون ثلاثة مرات في اليوم. والجرعات الأعلى من العشبة فى حاجة إلى اشراف طبى مباشر لها مثلما يحدث فى حالات الوهن والضعف الحاد. ويمكن ملاحظة النتائج في خلال أسبوعين، وأن مدة الاستخدام يجب أن تناقش مع أخصائي الرعاية الصحية. وعلى الرغم من أن البحث قد استخدم فقط المستخلصات القياسية، فإن البحث الألماني قد اقترح 2- 4 جرام من كل أجزاء العشبة.

هل هناك أي آثار جانبية أو تفاعلات؟
إن عشبة سان جون يمكن من الناحية النظرية أن تجعل الجلد أكثر حساسية لضوء الشمس، ولكن يعد ذلك نادرا عندما تستخدم عند المستويات الموصى بها. ومع ذلك، فإن الأشخاص ذوي الجلد الحساس يمكن أن يكونوا أكثر عرضة للطفح الجلدي أو الحروق بعد التعرض لأشعة الشمس. وبينما يفترض أن تكون عشبة سان جون آمنة أثناء الحمل أو فترات الرضاعة، إلا أن دراسات السلامة مازالت تحتاج إلى المزيد من البحث فى ذلك.

التفاعلات الدوائية الضارة المحتملة.
إن تقارير الحالة الطبية الحالية والدراسات الدوائية تفترض أن مستخلصات عشبة سان جون ربما تخفض مستويات بعض الأدوية وقدرتها العلاجية. ومن ضمن هذه الأدوية التى تحتوي على السيكلوسبورين cyclosporine. والديجوكسين digoxin والأندينافر indinavir – وهو علاج للحد من نشر العدوى بفيروس الإيدز- . وموانع الحمل oral contraceptives والثيوفيلين theophylline . ومقاومات الإكتئاب الثلاثية tricyclic antidepressants مثل الأميتريبتايلين ومضادات أو مقاومات التخثر مثل الورفارين warfarin. والأبحاث العلمية فى هذا الصدد تفيد بأن ذلك يرجع لتفاعل عشبة سان جون مع الإنزيمات الموجودة فى الكبد (إنزيمات الستيوكروم cytochrome enzymes P450). وتحول دون التحول الطبيعي للأدوية، وهذا يعد من قبيل الإفتراضات العلمية. وهناك دراسات دوائية أخرى لم تتوصل إلى أي تأثيرات لعشبة سان جون على تلك الإنزيمات.

كما بين بحث دوائي من أوروبا أن عشبة سان جون ربما تخفض مستوى البلازما للسيكلوسبورين (دواء يمنع الجسم من رفض الأعضاء بعد زراعتها). وقد حدث فى حالات بعض المرضى الذين تم لهم - زراعة للقلب - وقد تناولوا السيكلوسبورين، وظهرت بعد ذلك علامات حادة لرفض الزراعة بعد تناول مستخلص عشبة سان جون مع السيكلوسبورين. وهناك تقرير آخر ذكر نتائج مشابهة في ثلاثة مرضى تناولوا السيكلوسبورين وعشبة سان جون معا.

وحتى نعرف المزيد فإن الأشخاص الذين يتناولون السيكلوسبورين يجب أن يتفادوا استخدام عشبة سان جون فى نفس الوقت. كما افترضت دراسة دوائية واحدة أن عشبة سان جون ربما تخفض مستويات الدم للديجوكسين عند مرضى القلب الذين يتناولون هذا العقار. وفي هذه الدراسة تناول متطوعون أصحاء الديجوكسين لمدة 5 أيام وبعد ذلك تمت إضافة 900 مليجرام يوميا من عشبة سان جون.

وإن كان قد تم التوصل إلى مستوى الدم العادي للديجوكسين بعد 5 أيام من تناول الدواء، لكن هذا المستوى قد انخفض بصورة كبيرة عندما تمت إضافة عشبة سان جون للنظام العلاجى. وحتى نعرف معلومات أكثر عن ذلك، فإن الأفراد الذين يتناولون الديجوكسين يجب أن يتفادوا تناول عشبة سان جون كمكمل علاجى.

والإندينافير عبارة عن مثبط لأنزيم البروتياز protease. والذى يستخدم لعلاج الأشخاص الذين يعانون من مرض الإيدز(HIV). فقد أوضحت الدراسة الدوائية عندما تناول بعض المتطوعين الأصحاء دواء الاندينافير لمدة يومين، وفي اليوم الثالث أضاف المتطوعون 900 مليجرام من مستخلص عشبة سان جون في اليوم إلى هذا النظام العلاجى، وفي نهاية الدراسة وجد أن عشبة سان جون قد أدت إلى انخفاض كبير في مستويات المصل للإندينافير. وهذه الدراسة تفترض أنه حتى يعرف المزيد عن ذلك، فإن الأشخاص الذين يتناولون الإندينافير أو أي أدوية أخرى مقاومة للفيروسات مثل مرض الإيدز HIV يجب أن يتفادوا تناول عشبة سان جون فى نفس الوقت.

وهناك ثمان حالات قد تمت الإفادة عنها لدى وكالة المنتجات الطبية السويدية، والتى أوضحت أن عشبة سان جون ربما تتفاعل مع مانعات الحمل التى يتم تناولها بالفم، وتحدث نزيف أو طمث داخلي، أو تغير في إحداثيات نزيف الدورة الشهرية. كما أن أحد الأبحاث التى أجريت فى هذا الشأن، افترضت أن عشبة سان جون ربما تخفض مستويات المصل للاستراديول ( الهرمونات الأنثوية). ويجب أن نلاحظ أن هناك 3 فقط من بين 8 نساء سويديات قد رجعن إلى دورة الطمث العادية بعد توقف تناول عشبة سان جون. أما النساء اللائى يتناولن مانعات الحمل الفمية بغرض تنظيم النسل، فإنه يجب عليهن أن يستشيروا طبيبهم قبل تناول عشبة سان جون.

ودراسة حالة واحدة لسيدة تبلغ من العمر 42 سنة مصابة بالربو أفادت بأن تناول 300 مليجرام في اليوم من مستخلص سان جون قد أدى إلى انخفاض في مستويات البلازما للثيوفيلين، وبعد انقطاع عن تناول عشبة سان جون، فإن مستويات بلازما المريضة للثيوفيلين قد عادت إلى مستوى علاجي مقبول مرة أخرى. وحتى يتم معرفة المزيد فإن الأشخاص الذين يتناولون الثيوفيلين يجب أن يتفادوا تناول عشبة سان جون.

وقد افترض البحث الابتدائي أن عشبة سان جون ربما تخفض مستويات الدم للاميتريبتيلين (من أدوية مضادات الإكتئاب الثلاثية). وكذلك تمت التوصية بأن الأشخاص الذين يتناولون العلاج الخاص بالإكتئاب ، يجب أن يمتنعوا عن تناول عشبة سان جون فى نفس الوقت، لذات السبب.

وفي دراسة دوائية أخرى، تم إعطاء متطوعين 900 مليجرام في اليوم من مستخلص عشبة سان جون لمدة 11 يوم، ثم جرعة منفردة لدواء مقاوم للتخثر مشابه في فعاليته للوارفارين يعرف بالفنبروكومون (Phenprocoumon). ولوحظ أن هناك انخفاض كبير في كمية الدواء التي تم قياسها في البلازما. وهناك سبعة دراسات لوكالة المنتجات الطبية السويدية توصلت إلى انخفاض في فعالية الوارفارين المقاوم للتخثر عندما يتم تناول عشبة سان جون في نفس الوقت. وحتى يتم التعرف على المزيد من المعلومات فى هذا الصدد، فإن الأفراد الذين يتناولون الوارفارين يجب عليهم أن يستشيروا الطبيب المباشر للعلاج قبل أن يتناولوا عشبة سان جون.

كما أن هناك دليل أساسي يفترض أنه ربما تكون هناك مخاطرة لتفاعل عشبة سان جون مع الأدوية المانعة لاعادة امتصاص السيروتونين (SSRI) مثل الفلوكسيتينfluoxetine أو البروزاك Prozac مع حدوث آثار جانبية مثل الأضطراب العقلي، والتهيجات، والتعرق، وارتعاش العضلات، وتعرف جميعها بأعراض السيروتونين. وإن أي شخص يتناول SSRI يجب أن يستشير الطبيب قبل أن يتناول عشبة سان جون.

وفى دراسة حديثة تمت فى النمسا، وجد أن حوالى 67% من المرضى الذين يعانون من الحالات المتوسطة من مراحل الإكتئاب النفسى قد تحسنوا بشكل كبير بعد تناولهم لعشبة سان جون. ويعزى الفضل فى ذلك على الأرجح لوجد الهيبرسين ضمن مكونات الزيت الأحمر المستخرج من عشبة سان جون، والهيبرسين يعتبر مضاد قوى للفيروسات مما يشجع استخدامه فى علاج مرضى نقص المناعة أو الإيدز، وكذلك مرضى الالتهاب الكبدى الوبائى (HIV). وحتى لعلاج الطفح الجلدى الناجم على الإصابة بالعدوى لفيروس الجديرى الكاذب، والقوباء المنطقية.

وزيت العشبة يستعمل أيضا كمطهر، ولعلاج الجروح والحروق، كما أنه يزيل آلام العضلات، والشد العصبى، وأوجاع الظهر، وعرق النسا، وتصلب المفاصل الروماتزمى. وربما يستخدم الزيت داخليا لعلاج بعض حالات التهابات المعدة أو قرحة الأثنى عشر.

وتناول عشبة سان جون مفيدة أيضا فى علاج حالات الإكتئاب النفسى المصاحب لسن انقطاع الطمث، أو سن اليأس. وتعتبر عشبة سان جون أيضا مفيدة ومقوية لكل من الكبد والحوصلة المرارية

 

[رافت ابراهيم]

 

بيرفوراتوم L (نبتة سانت جون) يزيد بشكل تفضيلي مستويات الدوبامين خارج الخلية في القشرة الأمامية الجبهية الفئران
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...p.0705822/full



آثار مستخلصات المائية الكحولية من بيرفوراتوم L على السيروتونين خارج الخلية (5-HT)، النورادرينالين (NA) والدوبامين (DA) المستويات والأيض الحمضية (حمض 3،4-dihydroxyphenylacetic (DOPAC)، وحمض هوموفانيليك (HVA) وindoleacetic 5-هيدروكسي-3 حمض (5 HIAA)) تم فحصها من قبل في الجسم الحي microdialysis في قشرة الفص الجبهي من الفئران مستيقظا. وهكذا، فإن جرعة واحدة (60 ملغ كغ-1 الملكية الفكرية أو 300 ملغ كغ-1 ص) من H. perforatum زادت تركيزات DA 165 و 140٪ من قيم السيطرة على التوالي، وزيادة النشاط الحركي في الفئران nonhabituated. تم تخفيض DOPAC وHVA المستويات بصورة ملحوظة. تم رفع تركيزات 5 HT باعتدال فقط، بينما لم تتأثر مستويات NA من قبل أي علاج. كشف تحليل الأنسجة كلها التي عشبة زاد، في حين أن أوكسيديز (MAO) A / B المانع فينيلزين انخفض DA ودوران 5-HT. وتشير البيانات الحالية إلى أن آلية عمل مستخلص عشبة في الجسم الحي هو أكثر تعقيدا من تثبيط امتصاص مثبطات أو التمثيل الغذائي لوحظ في المختبر. استنتاج تعزيز تفضيلية انتقال DA في اتفاق مع الدراسات الإنسانية قياس الاستجابات الهرمونية العصبية DA بوساطة.

 

[رافت ابراهيم]

 

شبة القديس جون (حشيشة القلب) Hypericum perforatum ينتمي إلى الفصيلة العرنية Hypericaceae الجزء المستخدم

أوراق، أغصان، براعم غير متفتحة، أزهار.
المكونات الكيميائية

• أنتراكينونات:

1-الهيبريسين.
2-البسودوهيبريسين الكاذب.
3-الايزوهيبريسين المماثل.
4-انثرون الايمودين.

• مشتقات الفلوروغلوسينول.
• الفلافونوئيدات.
• زيت طيار.
• مكونات أخرى (تانينات، كارتينوئيدات، فيتامين C، أحماض أمينية، أحماض نباتية).

الفعالية الفارماكولوجية

• مضاد للاكتئاب لوجود الانتراكينونات عديدة الحلقات التي تخفض السيروتونين في الجسم

 

[رافت ابراهيم]

 

بيرفوراتوم L. (نبتة سانت جون) وتنتج صيدليا الأيض هامة مع الممكن المضادة للاكتئاب، مضادة للسرطان والمضادة للفيروسات / الفطرية / الأنشطة الميكروبية (لاستعراض رؤية بارنز وآخرون، 2001). وعلاوة على ذلك، وقوع مستويات الصيغة الصبغية متغيرة، apospory اختيارية وpseudogamy في H. perforatum L. وقد جذبت انتباه الباحثين تكاثر لاتعرسي (Matzk وآخرون، 2001، 2003). الأنواع البرية هي في الغالب رباعي الصيغة الصبغية (2 ن = 32)، على الرغم من أن كلا مضاعفا (2 ن = 16) وسداسي الصيغة الصبغية معروفة (2 ن = 48) أشكال أيضا (Matzk وآخرون، 2001.؛ روبسون، 2002؛. Barcaccia وآخرون، 2006). ويعتقد أن التباين في مستوى الصيغة الصبغية لتعكس الجهاز التناسلي الحيوية. Haploidization وpolyploidization هي النتائج المترتبة على التوالد العذري من الخلايا البيض والإخصاب لخلايا البويضة aposporous غير مخفضة، على التوالي (Barcaccia وآخرون، 2007). والنتيجة هي أن الأنواع لديه واسطة تنوعا من التكاثر، بدءا من الجنسية تماما لapomictic تلزم تقريبا. جنبا إلى جنب مع حجم الجينوم الصغير نسبيا وزمن الجيل القصير، جعلت هذه الميزة H. perforatum نموذجا رائدا لأبحاث تكاثر لاتعرسي (Matzk وآخرون، 2001.؛. Barcaccia وآخرون، 2007). هنا، نحن تقرير رسم الخرائط، واستنساخ ما لا يقل عن جزء من الجين المسؤول عن apospory في H. perforatum. ونقترح أن apospory في H. وعلى الأرجح تسيطر perforatum بعوامل المهيمنة الواردة ضمن تسلسل المستنسخة. ويمثل هذا التقدم الخطوة الأولى الضرورية لعزل H ypericum AP OS P أو Y موضع (سعيد)، التي ينبغي أن توفر نظرة كبيرة في السيطرة الجزيئية لوضع aposporous الإنجاب

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...0.04188.x/full

 

[رافت ابراهيم]

 

عشبة القديس يوحنا St. John's wort:
وتعرف باسم الهيوفارقون، وكذلك باسم حشيشة القلب. وتعرف علمياً باسم Hypericum perforatam. الجزء المستخدم من النبات الأطراف المزهرة. يستخدم على نطاق واسع كمضاد للاكتئاب والتشنج وينبه تدفق الصفراء ومفرج للآلام ومضاد للفيروسات ومنقي طبيعي للدم ومقاوم جيد لفيروسات الإيدز وفيروس إبشتاين بار Epstein-Barr.

 

[رافت ابراهيم]

 

http://www.nature.com/articles/srep0...P-631-20141223

خصائص Protonophore من hyperforin ضرورية لنشاطها الدوائي

• توماس S. بيع
• ، ثابت بلقاسمي
• ، فيت Flockerzi
• وأندرياس بيك

• تقارير علمية 4، رقم المادة: 7500 (2014)
• دوى: 10.1038 / srep07500
• تحميل الاقتباس
• • آلية العمل |
  • الفيزياء الحيوية الجزيئية |
  • علم الصيدلة

تم الاستلام: 17 سبتمبر 2014 قبلت: 27 نوفمبر 2014 نشرت على الانترنت: 16 ديسمبر 2014

ملخص

Hyperforin هو العنصر النشط دواء من النباتات الطبية بيرفوراتوم (نبتة سانت جون)، على النحو الموصى به لعلاج مجموعة من الامراض بما في ذلك الكآبة المعتدلة. ويعزى جزء من عملها لتفعيل قناة TRPC6. وجدنا أن hyperforin يدفع-TRPC6 مستقلة H + التيارات في كلوة-293 الخلايا، الخلايا الدبقية الصغيرة القشرية، الخلايا أليفة الكروم وطبقات ثنائية الدهون. يدل على هذا الأخير أن hyperforin نفسها بمثابة protonophore. النشاط protonophore من hyperforin يسبب تحمض عصاري خلوي، الذي يعتمد بشدة على إمكانية عقد، والذي يغذي غشاء البلازما الصوديوم بروتون المبادلات. بالتالي زيادة تركيز الصوديوم داخل الخلايا الحرة وامتصاص الناقل العصبي من قبل نا + من cotransport والكبت. بالإضافة إلى ذلك، hyperforin يستنزف ويقلل التحميل من الحويصلات الكبيرة الأساسية كثيفة في الخلايا أليفة الكروم، الأمر الذي يتطلب التدرج درجة الحموضة من أجل مراكمة أحاديات الأمين. وباختصار يتم تحديد الإجراءات الدوائية من "بروزاك العشبية" hyperforin أساسا عن طريق خصائص protonophore لها هو موضح هنا.

المقدمة

وقد استخدم perforatum عشبة (نبتة سانت جون) لعدة قرون في العلاج بالاعشاب من الالتهابات البكتيرية والفيروسية وأمراض الجهاز التنفسي، وجروح الجلد، قرحات الهضمية، والتهاب الاكتئاب الخفيف 1. Hyperforin، معزولة عن أجزاء ازدهارها، هو العنصر الطبيعي الأكثر دراسة هذا النبات، وقد تم الإبلاغ عن للحث على موت الخلايا المبرمج في الخلايا السرطانية 2، وتمنع نمو الخلايا السرطانية 3، غزو السرطان والانبثاث 4، وكذلك الأوعية الدموية 5. وبالإضافة إلى ذلك، يتم استخدام hyperforin باسم "بروزاك العشبية" لعلاج الكآبة المعتدلة 6، ويكشف المضادات الحيوية 7 والمضادة للملاريا 8 النشاط، ويدفع الأيض المخدرات كبدي من خلال تفعيل نظام السيتوكروم P450 عن طريق قابلية عالية ملزما للsteroid- وأجنبي بيولوجيا الاستشعار pregnan النووي X مستقبلات (PXR) 9، مما يجعل منه مرشحا حاسما في التفاعل المخدرات.
ليست مفهومة حتى الآن آليات الإجراءات hyperforin، ولكن يمكن أن تشمل تثبيط 5-أكسيجيناز شحمية 10، قابلية عالية ملزما للبريغنان X مستقبلات 9، وإطلاق سراح من الكالسيوم 2+ و / أو الزنك 2+ من مخازن داخل الخلايا 11، 12، ويؤثر من قبل المشبكي والحويصلي امتصاص وتخزين وإطلاق الناقلات العصبية مثل السيروتونين، الدوبامين، بافراز، أستيل كولين، GABA والغلوتامات 13، 14، 15، 16، 17، 18. غوبي وآخرون 14 المقترحة جود انخفاض في قيمة تخزين مونوامين بسبب تثبيط مثل ريزيربين للنقل مونوامين الحويصلي (VMAT). ولكن، يستهدف في حين ريزيربين أكثر قدرة VMATs في الأسرة SLC18 الجين 19 لالسيروتونين، ادرينالين، بافراز والدوبامين، hyperforin بالإضافة إلى ذلك يؤثر أستيل 18، الركيزة للنقل أستيل الحويصلي (VAChT، SLC18 أيضا عائلة الجينات)، وGABA والغلوتامات 15، 16 ، ركائز للالمثبطة النقل حويصلي الأحماض الأمينية (VIAATs، SLC32 الأسرة الجينات) 20 ونقل الغلوتامات الحويصلي (VGluTs، SLC17 الأسرة الجينات) 21. تخزين الناقلات العصبية يعتمد بشكل كبير على التدرج الكهربائية والبروتون حويصلي، التي تنتجها H + إطعام الفئران، وذلك باستخدام الطاقة لضخ H + باستمرار إلى الحويصلات المشبكية. ويمكن بعد ذلك الناقلات العصبية تكون مركزة ضد التدرج في تبادل اثنين من البروتونات ترك الحويصلة 19. وقد تبين أن تحمض الحويصلات المشبكية المعزولة التي رصدتها مضان أكريدين البرتقال تبريد ألغيت في وجود hyperforin 16، 22، واقترح أن تبديد للH + التدرج من النشاط مثل protonophore يلغي قوة دافعة للناقل عصبي امتصاص إلى الحويصلات 16، 22.
ليس فقط حويصلي، ولكن أيضا البلازما النقل غشاء من الناقلات العصبية ويبدو أن تتأثر hyperforin. وفي هذا الصدد، اقترح hyperforin لزيادة تركيز الصوديوم داخل الخلايا، وتقليل وقت لاحق التدرج الصوديوم اللازمة لالعصبي (إعادة) المتحصلات من الفضاء خارج الخلية من قبل الناقل العصبي قبل المشبكي الناقلون 23، 24. في وقت لاحق تبين أن hyperforin ينشط قنوات الموجبة غير انتقائية في الصفائح الدموية البشرية وورم القواتم الفئران (PC12) خلايا 25، وفي عام 2007 hyperforin تم تقديمه على أنه منشط محدد لغير انتقائية TRPC6 قناة الموجبة (مستقبلات عابرة المحتملين الكنسي 6) 26. وأعرب عن TRPC6 في الصفائح الدموية البشرية 27 والخلايا PC12 26، 28، والتي يسببها hyperforin نا + تدفق، قد يكون راجعا إلى تفعيل TRPC6. ومع ذلك، يتم وصف الآثار الأخرى للhyperforin التي قد تشارك أيضا في أعمالها الدوائية. على سبيل المثال، hyperforin خفف مختلف المواصلة الأيونية voltage- وبوابات يجند في الخلايا العصبية الحصين معزولة أو الخلايا العصبية العصبية للدماغ 29، 30، 31، 32، فإنه يغير سيولة الأغشية 33 وينهار غشاء الميتوكوندريا الرائدة محتمل لإطلاق سراح الزنك 2 + والكالسيوم 2+ في العصارة الخلوية 12.
في هذه الدراسة استخدمنا التصوير الفلورسنت لرصد درجة الحموضة داخل الخلايا، والتغيرات الصوديوم عصاري خلوي وإطلاق الناقلات العصبية، وخلية كاملة التصحيح تقنية المشبك لتحديد وتوصيف تصرف الناجم عن hyperforin في أربعة أنظمة مستقلة، في كلوة-293 الخلايا، والابتدائي الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا أليفة الكروم الماوس، والأغشية الدهنية طبقة ثنائية. وتشير البيانات المتوفرة لدينا أن hyperforin نفسها بمثابة protonophore ويتوسط لتصرف بروتون كبير بذلك. لا يتطلب هذا تصرف وجود البروتينات مثل قناة TRPC6 واتجاهه يعتمد على القوى الموجودة القيادة مثل غشاء المحتملة ودرجة الحموضة التدرج. وتمشيا مع هذه النتائج، وإلغاء تراكم الناقلات العصبية في الخلايا أليفة الكروم الماوس الرئيسي في وجود hyperforin.

النتائج

OAG التي يسببها TRPC6 مقابل التيارات التي يسببها hyperforin

مادة ال diacylglycerol (DAG)، التي تم إنشاؤها بواسطة G ف / 11 -coupled مسارات الإشارات، أو مباشرة تطبيق النظير DAG، ومن المعروف أن تحفز TRPC3، TRPC6، TRPC7 والفأر TRPC2 قنوات مستقلة من تفعيل مديرية الشؤون الجغرافية بوساطة من بروتين كيناز C (PKC) . باستخدام خلية كاملة تقنية المشبك التصحيح قمنا بقياس تطور الداخل والخارج التيارات، المستخرجة من سلالم الجهد في -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، بناء على طلب خارجي من 100 ميكرومتر 1-oleoyl-2-أسيتيل-SN-الجلسرين ( OAG)، تناظرية داغ، في كلوة-293 الخلايا معربا عن ستابلي TRPC6 كدنا] (خلايا كلوة-TRPC6؛ الشكل 1A، أثر أسود). 100 ميكرومتر حمض الفلوفيناميك (FFA)، أظهرت أيضا لتنشيط TRPC6، كشفت نفس التيار كما OAG في الخلايا كلوة-TRPC6 (الشكل 1A، أثر الأزرق). 1B الشكل يدل على المقابلة العلاقات الجهد الحالي (إيفس) كشف نموذجية مزدوجة -rectifying التيارات TRPC6. تطبيق خارجي من 1 و 3 و 10 ميكرومتر hyperforin الجرعة بشكل تابع تنشيط تيار مختلفة في الخلايا كلوة-TRPC6 (الشكل 1C). مركز الحبس الاحتياطي المقابلة (الشكل 1D لم) لا يمثل الشكل النموذجي للتيار بوساطة TRPC6 (انظر الشكل 1B). عند تطبيق hyperforin على خلايا غير transfected كلوة-293، وليس التعبير عن TRPC6 (كلوة، الشكل 1E)، أو على الماوس الأساسي الخلايا الدبقية القشرية (الشكل 1G) وجدنا نفس التيار بنفس الرابع (الشكل 1F، ح. ) كما رأينا في الخلايا كلوة-TRPC6. وهكذا، لم يكن بوساطة التيار الناجم عن hyperforin عبر TRPC6. ظهر نفس التيار باستخدام hyperforin كما زودت dicyclohexylammonium (DCHA) الملح (سيغما؛ الشكل 1A-F)، أو حمض الحرة كما هو الحال في الميثانول (سيغما أو كايمان المواد الكيميائية؛ الشكل 1G، ح).
الشكل 1: OAG التي يسببها TRPC6 مقابل التيارات التي يسببها hyperforin.

الداخل والخارج التيارات في -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، من HEK-293 الخلايا، معربا عن ثابت TRPC6 كدنا] (HEK-TRPC6، أ، ج)، غير transfected-كلوة (HEK) خلايا (ه) والماوس الأساسي دبيقي القشرية الخلايا (ز). كما يتضح من الحانات 100 ميكرومتر OAG أو 100 ميكرومتر حمض الفلوفيناميك (FFA؛ أ)، 1، 3 أو 10 ميكرومتر hyperforin كما زودت dicyclohexylammonium (DCHA) الملح (ج، ه)، و 10 ميكرومتر hyperforin تزويد الحمض الحر كما في الميثانول ( طبقت ز)؛ MtOH. تم تطبيع التيارات لحجم الخلية وتم طرح التيارات الأساسية قبل تطبيق المجمع. يتم عرض المقابلة العلاقات الجهد الحالي (إيفس) في (ب، د، و) و (ح). تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليه من التجارب (الخلايا).

الصورة بالحجم الكامل

التيارات التي يسببها Hyperforin في الخلايا الدبقية

يعتمد التيار الناجم عن hyperforin على جرعة من hyperforin، كما هو مبين في خلايا فأر دبيقي (الشكل 2A، ب)، مع تركيزات نصف القصوى (EC 50) 9.3 و 8.7 ميكرومتر hyperforin لنحو الداخل (الشكل 2D) و التيار الخارج (الشكل 2E)، على التوالي. في موازاة ذلك ارتفعت السعة الخلوية مع تركيزات أعلى hyperforin طالما كان hyperforin الحالي، وانخفضت بعد ذلك مرة أخرى (الشكل 2C). لم الحالية والسعة لا تصل إلى الهضبة خلال تطبيق hyperforin، ولكن معدل الزيادة تباطأ. على ما يبدو، ومن المقرر إلى إدماج hyperforin محبة للدهون في طبقة ثنائية المادة الدهنية في غشاء البلازما التغييرات السعة. الخلايا الدبقية المعزولة من الفئران TRPC3 / TRPC6 التي تعاني من نقص كشفت نفس الحالي (بوساطة hyperforin الشكل 2F) بنفس الرابع (الشكل 2G) كخلايا دبقية صغيرة معزولة من النوع البري الفئران، وليس خلايا تطوير تيار معين على OAG تطبيق (الشكل 2H، ط). RT-PCR 50 فرز الخلايا الدبقية من النوع البري الفئران لم يكشف عن أي نسخة لTRPC6 (الشكل 2J)، التدقيق أن التيار، والتي تظهر في كل خلايا اختبار حتى الآن الناجم عن hyperforin، لا تعتمد على وجود TRPC6 .
الشكل 2: الحث Hyperforin الجرعة بشكل تابع التيارات في الخلايا الدبقية.

الداخل والخارج التيارات في -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، من الخلايا الدبقية الأولية معزولة من النوع البري (أ، ح، ك) وTRPC3 /-TRPC6 ناقص الفئران (و، ح). وكانت التيارات طبيعية لحجم الخلية، وإلا في (ح)، تم طرح التيارات الأساسية قبل تطبيق المجمع. كما يتضح من الحانات تركيزات مختلفة من hyperforin (أ، و)، و 100 OAG ميكرومتر أو حل حمام، طبقت (لا OAG ح). (ب، ز) و (ط) عرض الحبس المقابلة. (ج) التغيرات الجرعة التي تعتمد على السعة طبيعية من الخلايا في (أ). نوبات السيني من التيارات القصوى التي يسببها hyperforin في الفقرة (أ) تكشف عن وجود تركيز نصف القصوى (EC 50) 9.3 و 8.7 ميكرومتر لنحو الداخل (د) والتيارات الخارج (ه)، على التوالي. الخلايا الدبقية معزولة عن C3 / C6-ناقص (كو، و، ز) والبرية من نوع الفئران (أ، ب) تكشف عن التيارات التي يسببها hyperforin مماثلة، ولا وضعت التيار محددة بناء على طلب OAG (ح، ط). (ي) RT-PCR لTRPC6 (197 بي بي) والنصوص HPRT (160 بي بي) من 50 FACS فرز الخلايا الدبقية. الحمض النووي الريبي مجموع من الدماغ بمثابة السيطرة. (ك) التيارات Hyperforin التي يسببها في وجود (أسود) وغياب الكاتيونات خارج الخلية أحادي التكافؤ، وحلت محلها NMDG + (الأزرق)، الكلور -، وحل محله اسبارتاتي (الحمراء)، والكالسيوم والمغنيسيوم 2+ 2+ (0Ca0Mg؛ لا البديل؛ الأخضر). (ل) مراكز التحقيق المقابلة تطبيع إلى السعة الحالية عند 100 فولت. تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليه من التجارب (الخلايا).

الصورة بالحجم الكامل

لاختبار الأيونات هي المسؤولة عن التيار الناجم عن hyperforin، ونحن تعديل تكوين أيون من الحل الخارجي. ولكن، لا تبديل الخارجي نا + وK + (حل محله الموجبة غير قابلة للاختراق NMDG +)، أو إزالة الكاتيونات ثنائي التكافؤ (0Ca0Mg الاسمية)، ولا استبدال الكلور - (حل محله أنيون اسبارتاتي غير قابلة للاختراق) تغيرت بشكل ملحوظ تطوير التيار الناجم عن hyperforin في الخلايا الدبقية (الشكل 2K). مركز الحبس الاحتياطي تطبيع التيارات بوساطة hyperforin في حضور وغياب الصوديوم، الكالسيوم 2+ / المغنيسيوم 2+ و الكلور - كل تكشف عمليا على شكل وانعكاس نفس الإمكانيات، مشيرا إلى أن التيار لا يحركه التي يسببها hyperforin التكافؤ وثنائي التكافؤ الكاتيونات نموذجية، ولا الأنيونات نموذجي (الشكل. 2L).

Hyperforin يتوسط تصرف بروتون

غيرنا بجوار الرقم الهيدروجيني للمحلول الخارجي، حيث أن ما تبقى من أيونات ربما نفاذية الوحيدة البروتونات. تطبيق hyperforin في درجة الحموضة الخارجية أكثر حمضية أو أكثر الأساسية من 7.2 (داخل الخلايا دائما درجة الحموضة 7.2) أسفرت إما الطريقة انخفاضا كبيرا من السعة الحالية (الشكل 3A). إمكانات انعكاس تم الحصول عليها من مراكز التحقيق (الشكل 3B) تحول كبير نحو القيم أكثر إيجابية وأكثر سلبية على تحمض خارج الخلية وقلونة، على التوالي (الشكل 3C). منذ وضع الحالي الناجم عن hyperforin في الظروف الخارجية الحمضية أو الأساسية انخفاضا كبيرا، ونحن تنشيط التيار في درجة الحموضة الخارجية 7.2 وغيرت الرقم الهيدروجيني بعد التيار قد وضعت بالفعل (الشكل 3D). تغيير لدرجة الحموضة 8.9 أدى إلى انخفاض فوري من السعة الحالية نحو القيم مماثلة كما رأينا لتطوير التيار الناجم عن hyperforin في درجة الحموضة 8.9. في المقابل، بعد زيادة أولية للتيار الداخل، والتحول إلى الرقم الهيدروجيني 5.4 تؤد إلا إلى انخفاض صغير من السعة الحالية. لكن، وكما رأينا بالفعل في أرقام 3B و ج، إمكانات عكس التيارات التي يسببها hyperforin تحول نحو القيم أكثر إيجابية على تحمض الخارجي والقيم أكثر سلبية على قلونة الخارجية (الشكل 3E، و).
الرقم 3: Hyperforin يدفع تيار تعتمد على بروتون في الخلايا الدبقية.

الداخل والخارج التيارات في -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، من الخلايا الدبقية الماوس الأساسي (أ، د، ح، ي). كما يدل على ذلك الحانات وطبق إما 10 ميكرومتر hyperforin في درجة الحموضة خارجية مختلفة (PHX؛ أ) أو تم تغيير الرقم الهيدروجيني الخارجية في غياب (ح) أو خلال 10 ميكرومتر hyperforin (د) أو 10 ميكرومتر CCCP (ي) التطبيق. تم تطبيع التيارات لحجم الخلية وتم طرح التيارات الأساسية قبل تطبيق المجمع. يتم عرض الحبس المقابلة في (ب، ه، ط) و (ك). (ج، و) و (ل) إظهار التغيير من إمكانات انعكاس خلال التجارب في (أ، د) و (ي) على التوالي. لاحظ أن إمكانات عكس hyperforin- وCCCP الناجم عن التيارات تتغير مع درجة الحموضة خارجية مختلفة (انظر ج، و ول)، وأن مراكز التحقيق ودرجة الحموضة 5.4 التغييرات التي تعتمد على إمكانية انعكاس متشابهة لhyperforin- وCCCP التيارات يسببها (انظر الإلكترونية وك فضلا و ولتر، على التوالي). في (ز) عن التي تم الحصول عليها تجريبيا قيم إمكانات عكس التيارات التي يسببها hyperforin (يخرف السوداء) يتم رسم مقابل الرقم الهيدروجيني الخارجية (داخل الخلايا درجة الحموضة 7.2). الخط الأحمر المنقط في (ز) يصور H + عكس إمكانات تحسب عن طريق المعادلة نرنست لبروتون الحالي في درجة الحموضة داخل الخلايا 7.2 درجة الحموضة والخارجية كما هو مبين (انظر الإجراءات التجريبية). تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليه من التجارب (الخلايا).

الصورة بالحجم الكامل

الرقم الجيل الثالث 3G يظهر المؤامرة جميع الامكانيات انعكاس قياسها في اعتماد الرقم الهيدروجيني الخارجية (النقط السوداء، ودرجة الحموضة داخل الخلايا 7،2). الخط الأحمر المنقط يصور H + عكس النظرية إمكانات، وتحسب على أساس معادلة نرنست تحت داخل الإقليم معين ودرجة الحموضة خارج الخلية، أي تركيزات البروتون. إمكانات عكس الكشف تجريبيا وتحسب متشابهة، والفرق طفيف هو على الارجح بسبب تدفق بروتون كبيرا، وهو ما قد يغير H + تركيز على مقربة من الغشاء، وبالتالي إمكانية عكس المتوقع. تغيير درجة الحموضة الخارجية 5،4-8،9 دون تطبيق hyperforin لم استحضار التيارات مماثلة في الخلايا الدبقية (الشكل 3H.؛ انظر الشكل 3I. لمراكز التحقيق). وباختصار، فإن النتائج تشير حتى الآن إلى أن hyperforin يتوسط لتصرف بروتون في كلوة وكذلك الخلايا الدبقية.
الكربونيل السيانيد م-chlorophenylhydrazone (CCCP)، وهو protonophore تستخدم أساسا في الميتوكوندريا الامم المتحدة ومقرنة، التيارات تنشيط الخلايا الدبقية في (الشكل 3J. مع IV مشابه) (الشكل 3K.، أثر أسود)، ولكن سعة أصغر بكثير من hyperforin. على تحمض الخارجي لدرجة الحموضة 5.4 في CCCP بوساطة الداخل الحالي زيادة (الشكل 3J، ك.)، واحتمال انعكاس تغير بنفس الطريقة تماما كما هو الحال في hyperforin نحو القيم أكثر إيجابية، كما هو متوقع من توزيع بروتون (الشكل 3L. وانظر أثر الأحمر في الشكل 3F للمقارنة). التتبع الحمراء في الشكل 3K يظهر IV الأولي للتيار مباشرة بعد التحول إلى الرقم الهيدروجيني 5.4 بوساطة hyperforin. تتبع البرتقالي يصور الرابع في السعة الحالية القصوى في درجة الحموضة 5.4، حيث على الأرجح بمبلغ إضافي أساسا التيار الخارج، والذي لم مزيد من التحري.
على افتراض أن hyperforin يتوسط تصرف بروتون ومن المتوقع أن يصبح أكثر حمضية بناء على طلب hyperforin، لأن تقدم إمكانات غشاء السلبية قوة دافعة للبروتونات في الخلية العصارة الخلوية من خلايا سليمة. لإثبات ذلك، فإننا تحميل خلايا كلوة سليمة مع تراعي درجة الحموضة صبغة الفلورسنت BCECF-AM، تطبيق تركيزات مختلفة من hyperforin، وقياس نسبة مضان F 490 / F 450 كمؤشر للتغيرات درجة الحموضة داخل الخلايا. مع زيادة تركيزات hyperforin نسبة مضان BCECF انخفضت الجرعة بشكل تابع (الشكل 4A). كشفت نسبة BCECF المتهدمة ثابت (انظر أيضا الشكل 4C). ولذلك، فإننا احتساب التغيرات التي يسببها hyperforin النسبية نسبة BCECF فيما يتعلق بتطبيق السيطرة على 1٪ DMSO، الذي لم يغير كثيرا من الإشارات. تناسب السيني من التغيرات النسبية نسبة BCECF في تركيزات مختلفة hyperforin الخارجية، المستخرجة في 200 ق في الشكل 4A، كشف عن وجود EC 50 من 8.5 ميكرومتر hyperforin (الشكل 4B)، وهو تقريبا نفس لالناجم عن hyperforin- التيارات في الخلايا الدبقية (انظر الشكل 2D، ه). للتحقق من صحة القياسات ودرجة الحموضة، NH 4 الكلورين (20 ملم) وطبقت خارج الخلية. NH 3 يدخل الخلايا ويربط H + رفع درجة الحموضة داخل الخلايا (قلونة) مما أدى إلى زيادة نسبة BCECF (الشكل 4C)، التدقيق أن نقصان، كما رأينا لhyperforin، يمثل تحمض داخل الخلايا. غشاء المحتملة السلبية صغيرة نسبيا من الخلايا كلوة (-50 بالسيارات 34) تمثل قوة دافعة محدودة للالبروتونات داخل الخلية. لذا، أجرينا BCECF تجارب التصوير مضان في تركيبة مع خلية كاملة تقنية المشبك التصحيح، للسيطرة على إمكانات غشاء الخلايا كلوة، وبالتالي القوة الدافعة لH + داخل وخارج الخلية. وأضاف BCECF (حمض الحرة) في حل ماصة التصحيح. بعد أن وصلت نسبة مستقرة مضان (الشكل 4F)، وغشاء المحتملة (عقد المحتملة، V ح) وفرضت على قيم مختلفة (الشكل 4D). الأرقام 4E، و، ز، ح تمثل السعة تطبيع، تغييرات درجة الحموضة داخل الخلايا (BCECF F 490 / F 450)، الداخل والخارج التيارات في -80 بالسيارات و+80 بالسيارات، على التوالي، واحتمال انعكاس قبل وأثناء تطبيق 10 ميكرومتر hyperforin. فقط في وجود hyperforin (المشار إليها مربع)، عندما يظهر بروتون التيار المفترض (الشكل 4G)، وعقد إمكانات -80 بالسيارات و+80 بالسيارات التوسط بين الخلايا تحمض وقلونة (الشكل 4D، و) على التوالي، كما هو متوقع من القوة الدافعة للالبروتونات داخل الخلية في -80 بالسيارات وخارج الخلية في +80 بالسيارات. كما نتيجة انعكاس التحولات المحتملة للقيم أكثر إيجابية وفقا لحسابات المعادلة نرنست لانخفاض الخلايا (قلونة)، والقيم أكثر سلبية كما يحسب لزيادة الخلايا (التحميض) من تركيز بروتون (الشكل 4H). أرقام 4I وي المعرض مركز الحبس الاحتياطي المستخرج في النقاط الزمنية المشار إليها (النصال في الشكل 4G)، وبالتالي إمكانات انعكاس قبل (الشكل 4I) وخلال (الشكل 4J) 10 ميكرومتر تطبيق hyperforin، على التوالي، في إمكانية عقد -80، 0 و+80 بالسيارات.
الرقم 4: Hyperforin يؤدي الى تغييرات في درجة الحموضة داخل الخلايا في الخلايا كلوة.

(أ، ج) التغيرات النسبية نسبة مضان (F 490 / F 450) حساسة للدرجة الحموضة صبغ BCECF-AM في الخلايا كلوة. كما يتضح من الحانات تركيزات مختلفة من hyperforin أو 1٪ DMSO (أ)، أو 20 ملي NH 4 الكلورين (ج) طبقت. الخارجية NH 4 الكلورين يدفع قلونة داخل الخلايا، وبالتالي زيادة من 490 F / F 450 (ج). تناسب السيني من الانخفاض النسبي في نسبة BCECF بتركيزات hyperforin مختلفة، وتحسب في 200 ق فيما يتعلق بتطبيق سيطرة DMSO، تكشف عن وجود تركيز نصف القصوى (EC 50) من 8.5 ميكرومتر (ب). السعة تطبيع (ه)، والتغيرات ودرجة الحموضة داخل الخلايا (F 490 / F 450؛ و)، الداخل والخارج التيارات في -80 بالسيارات و+80 بالسيارات، على التوالي، تطبيع حجم الخلية (ز)، وإمكانية انعكاس (ح) قبل وخلال 10 ميكرومتر hyperforin، وتقاس في الخلايا كلوة مع الحامض الحر للBCECF في ماصة التصحيح. (د) يصور التغييرات في عقد المحتملة (V ح)، وتوفير القوة الدافعة للالتيارات. مراكز التحقيق، المستخرج في النقاط الزمنية المشار إليها (انظر النصال في ز) قبل وخلال 10 ميكرومتر hyperforin، يتم عرضها في (ط) و (ي) على التوالي. تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليه من التجارب (الخلايا).

الصورة بالحجم الكامل

Hyperforin بمثابة protonophore

جميع المشبك التصحيح خلية كاملة والتجارب التصوير الحموضة حتى الآن تشير بوضوح إلى أن hyperforin يتوسط لتصرف بروتون في الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا كلوة. لإثبات ما إذا كانت هذه تصرف المقرر أن قنوات بروتون في الأغشية الخلوية من هذه الخلايا، تفعيلها من خلال hyperforin، أو إذا hyperforin نفسه يكشف عن النشاط protonophore، أجرينا تجارب التصحيح المشبك على طبقات ثنائية الدهون 35، تخلو من أي البروتينات القناة الايونية. وقد انخفض غيض من ماصة التصحيح في فيلم الدهون على رأس من الحل الحمام، وبعد إنشاء طبقة ثنائية الدهون مغلقة بإحكام ركضنا نفس البروتوكول الجهد بالنسبة للخلية كاملة التجارب المشبك التصحيح، وتطبيق 10 ميكرومتر hyperforin، 100 ميكرومتر CCCP أو 1٪ DMSO إلى طبقة ثنائية المادة الدهنية في غيض من ماصة التصحيح (الشكل 5A). A gigaohm المقاومة وصغيرة الأساسي الحالي (IV انظر الشكل 5B) النقاب عن تشكيل الناجح لدهن طبقة ثنائية ضيقة. بناء على طلب من 10 ميكرومتر hyperforin ظهر تيار كبير، والتي تبين أن hyperforin نفسها قادرة على التوسط لتصرف أيون. كان الرابع من التيار بوساطة hyperforin مماثلة كما في الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا كلوة (الشكل 5C). التحول صغير من احتمال انعكاس نحو القيم أكثر سلبية (تتبع الأسود الشكل 5C) على الأرجح تنتج عن تراكم البروتونات، وبالتالي انخفاض الرقم الهيدروجيني، في حجم صغير جدا داخل غيض من ماصة التصحيح، مدفوعا السلبية المحتملة داخل ماصة في بداية الطريق المنحدر. هذا هو الوضع مماثل لتحمض الخلايا في تجارب خلية كاملة خلال تطبيق hyperforin، مدفوعا المحتمل عقد السلبية، وهو ما يفضي إلى التحول من إمكانية عكس التيار بوساطة hyperforin نحو القيم أكثر سلبية (انظر الشكل 4H ، ي).أدى CCCP protonophore (100 ميكرومتر) في تيار أصغر بكثير من hyperforin، ولم 1٪ DMSO لا تغيير في التيار الأساسي على الإطلاق (الشكل 5A، ج). باختصار، hyperforin نفسه يكشف عن النشاط protonophore قوي في طبقات ثنائية الدهون مستقلة عن أي بروتين القناة.
الرقم 5: Hyperforin يدفع التيارات في طبقات ثنائية الدهون.

(أ) إلى الداخل والخارج في التيارات -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، من طبقات ثنائية الدهون مشددة على طرف ماصة التصحيح. كما يتضح من الحانات إما 10 ميكرومتر hyperforin، و 100 ميكرومتر CCCP أو 1٪ DMSO تم تطبيقها. (ب) يصور العلاقة بين الجهد الحالي (IV) للتيار الأساسي تقاس من الدهون طبقة ثنائية ضيقة. في (ج) مراكز التحقيق المقابلة من التجارب في (أ) يتم عرضها بعد الطرح للتيار الأساسي (انظر ب). لاحظ أن 10 ميكرومتر hyperforin يسببها تصرف كبير في طبقة ثنائية المادة الدهنية. وCCCP protonophore (100 ميكرومتر) غلة لم لDMSO كبير ولكن أصغر بكثير من الحالية، و 1٪ لا يؤدي إلى أي تيار على الإطلاق (الأزرق IV أثر على رأس محور س في ج). تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليه من التجارب طبقة ثنائية الدهون.

الصورة بالحجم الكامل

Hyperforin يدفع التيارات بروتون ويستنزف ويقلل التحميل من الحويصلات التي تحتوي على مثبطات الخلايا أليفة الكروم في

لتقييم عمل hyperforin على تخزين العصبي والافراج نحن على استعداد الخلايا الأولية الماوس أليفة الكروم، والتي يتم تخزينها الكاتيكولامينات في الحويصلات الأساسية كثيفة كبيرة (LDCVs) حيازة الناقل حويصلي مونوامين 1 (VMAT1) 19. وهي خلايا الغدد الصم العصبية منفعل، لديهم نفس الخلايا قمة العصبية السلائف باسم الخلايا العصبية متعاطفة تالية للعقد، والجوانب المختلفة العصبي التمثيل الغذائي وتخزين والإفراج تم دراستها على نطاق واسع مع هذه الخلايا.
كما هو متوقع، وتطبيق 10 ميكرومتر hyperforin يسببها نفس خلية كاملة الحالي مع نفس IV في الخلايا أليفة الكروم (الشكل 6A، ب) كما رأينا في الخلايا كلوة، والخلايا الدبقية وطبقات ثنائية الدهون. لتصور الآثار المترتبة على تخزين مونوامين الحويصلي والإفراج عنهم، نحن المحتضنة الخلايا أليفة الكروم من النوع البري والفئران TRPC6 ناقصة مع الفلورسنت "كاذبة" ناقل عصبي FFN511 36. مثل الأمينات الأحادية الذاتية، ويتم FFN511 من نقل مونوامين غشاء البلازما (MAT) في العصارة الخلوية ويتراكم في نمط ثابت مع LDCVs (الشكل 6C). كما هو مبين في 6D الرقم، ه، و، ز انخفض الخلوية التي تعتمد على FFN511 مضان تدريجيا في ظل ظروف التحكم (0.1٪ DMSO) مما يدل على المعدل الأساسي من FFN511 destaining، التي كانت تشبه في الخلايا من النوع البري والفئران TRPC6 ناقصة، والتي تعتمد على ما يبدو على تبييض ضوء تنشيط وإطلاق عفوية من FFN511. ومع ذلك، بناء على طلب من hyperforin 10 ميكرومتر أو الاستقطاب غشاء (70 ملي بوكل) وdestaining من مضان FFN511 التي تعتمد على وتسارع بشكل ملحوظ. وتم الحصول على نتائج مماثلة في وجود CCCP protonophore (10 ميكرومتر؛ انظر الشكل 6E). Hyperforin التي يسببها destaining، أي الإفراج عن FFN511، كان مماثل في خلايا معزولة من النوع البري أو الفئران TRPC6 ناقصة (الشكل 6D، ه، و). الزيادة الأولية في مضان تعتمد على FFN511 خلال hyperforin وتطبيق CCCP قد يكون راجعا إلى تأثير dequenching بعد الحد من تراكم هائل من FFN511 في الحويصلات مثبطات أو بسبب التغييرات الحموضة بوساطة hyperforin. ومع ذلك، وأخيرا hyperforin أدى إلى انخفاض في مضان تعتمد على FFN511. كما تحكم استخدمنا خلايا كلوة، والتي لا تحتوي على النقل لالناقلات العصبية، وبالتالي لا تتراكم FFN511 (الشكل 6H).
الشكل 6: Hyperforin يدفع التيارات غشاء ويستنزف ويقلل التحميل من الحويصلات التي تحتوي على مثبطات الخلايا أليفة الكروم في.

(أ) إلى الداخل والخارج في التيارات -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، من الخلايا أليفة الكروم الماوس الأساسي. يشير شريط تطبيق 10 ميكرومتر hyperforin. وتم تطبيع التيارات لحجم الخلية وتم طرح التيارات الأساسية قبل التطبيق. (ب) يبين IV المقابلة. (ج) صورة متحد البؤر مضان FFN511 التي تعتمد في زنزانة أليفة الكروم. (د، ه) التغيرات النسبية في مضان تعتمد على FFN511 (F400، تطبيع إلى القيمة في بداية التطبيق) في الخلايا أليفة الكروم من النوع البري (د) والفئران TRPC6 ناقصة (ه). في الوقت المشار إليه (السهم) 0.1٪ DMSO و 10 ميكرومتر hyperforin أو طبقت 70 ملي بوكل في (د)، و 0.1٪ DMSO و 10 ميكرومتر hyperforin أو 10 ميكرومتر CCCP في (ه). (و) يصور التحليل الإحصائي للمضان المتبقية (F400 في d و e) في 1400 ق. العلامات النجمية (* P <0.05 **؛ P <0.01) دلالة على الفرق كبير لرقابة المطابقة في 0.1٪ DMSO. (ز) الصور التمثيلية للمضان FFN511 التي تعتمد في بداية 1450 والصورة بعد تطبيق 0.1٪ DMSO (مجموعة العلوي) أو hyperforin 10 ميكرومتر (أقل مجموعة) في الخلايا أليفة الكروم. وتظهر اللوحة اليمنى ونقل صورة من الخلايا أليفة الكروم منها. خلايا كلوة لا تكشف عن وجود مضان كبير بعد FFN511 التحميل (ح). (ط) مضان FFN511 التي تعتمد على (F400) في الخلايا أليفة الكروم بعد 15 دقيقة FFN511 حضانة في غياب (0.1٪ السيطرة DMSO تطبيع إلى 100٪) وجود 10 ميكرومتر hyperforin. تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليه من التجارب (الخلايا) في (أ) و (ب)، وعدد مبين (ن) من التجارب بما في ذلك الخلايا العاشر (ن / خ) في (د، ه، و) و (أنا).

الصورة بالحجم الكامل

بالإضافة إلى تسارع FFN511 destaining، تم تخفيض تحميل FFN511 إلى الحويصلات مثبطات الخلايا أليفة الكروم بشكل كبير في وجود 10 ميكرومتر hyperforin (الشكل 6I). يتم ترتيب الخلوية (متشابك) مثبطات امتصاص غشاء البلازما symporter مونوامين الصوديوم؛ (MAT الشكل 7C (1).، مدفوعا نا) + التدرج وإمكانية غشاء السلبية (E M). التيار لا تعتمد على الصوديوم خارج الخلية التي يسببها hyperforin (انظر الشكل 2K، ل)، ومع ذلك، تجارب التصوير على الخلايا كلوة، محملة نا + -sensitive صبغة الفلورسنت SBFI، كشفت عن وجود زيادة كبيرة في نسبة SBFI، أي زيادة في الصوديوم داخل الخلايا، بناء على طلب hyperforin (الشكل 7A). باستخدام NMDG + بدلا من نا + في حل خارجي ثبت أن الزيادة في نسبة SBFI لم يكن بسبب hyperforin بوساطة الآثار التي تعتمد على درجة الحموضة في SBFI. ومع ذلك، فإن الانخفاض الناجم عن hyperforin نسبة BCECF مضان (انظر الشكل 4A)، أي تحمض داخل الخلايا، وتسارع في الخلايا كلوة في غياب خارج الخلية نا + (الشكل 7B.)، مما يشير إلى آلية الحموضة التنظيم تعتمد على الصوديوم عن طريق على سبيل المثال غشاء البلازما الصوديوم بروتون مبادل (NHE)، الذي ينقل البروتونات خارج الخلية، والصرف، نا أيونات طول التدرج تركزها في الخلية. العمل protonophore من hyperforin يتحرك H + في الخلية (المشبك) (الشكل 7C (3)) والخروج من الحويصلات (الشكل 7C (4)) نظرا لE سلبي M وحويصلي H + التدرج، على التوالي، مما أدى إلى تحمض داخل الخلايا. وهكذا، جنبا إلى جنب مع تحمض داخل الخلايا، hyperforin يؤدي إلى زيادة في الخلايا نا + تركيز، وربما يرجع ذلك إلى تحفيز NHE (الشكل 7C (5))، وبالتالي يقلل من قوة دافعة لتعتمد على MAT الخلوي مثبطات امتصاص (الشكل 7C (1)). يتم ترتيب الحويصلي امتصاص مثبطات قبل حويصلي مثبطات البروتون antiporter (VMAT؛ الشكل 7C (2))، مدفوعا H ضخم + التدرج وإمكانية غشاء حويصلي، سواء التي وضعتها مضخة البروتون الحويصلية (H + إطعام الفئران). تبديد التي يسببها hyperforin من حويصلي H + التدرج (انظر أعلاه) أطلال القوة الدافعة لتعتمد على VMAT حويصلي مثبطات امتصاص.
الرقم 7: نموذج العمل hyperforin على امتصاص مثبطات.

(أ، ب) التغيرات النسبية نسبة SBFI مضان (F 340 / F 380)، وهو ما يمثل الخلايا نا + تغييرات (أ)، ونسبة BCECF مضان (F 490 / F 450)، وهو ما يمثل تغيرات درجة الحموضة داخل الخلايا (ب)، في الخلايا كلوة خلال تطبيق (انظر السهم) من 30 ميكرومتر (أ) و 10 ميكرومتر (ب) hyperforin في حضور وغياب نا + (حل محله NMDG +). في الفقرة (أ) DMSO 0.3٪ تم تطبيقه على السيطرة. في (ب) يتم عرض تجارب السيطرة دون تطبيق hyperforin بألوان باهتة. تمثل البيانات سائل ± SEM من العدد المشار إليها (ن) من التجارب بما في ذلك الخلايا العاشر (ن / خ). الخلوي (متشابك) امتصاص أحاديات الأمين (MA: (ج) ​​آلية امتصاص مثبطات (الجانب الأيسر من طراز) + يتم ترتيب) من خلال غشاء البلازما symporter مونوامين الصوديوم (MAT؛ (1)). غشاء السلبية المحتملة والمنخفضة داخل الخلايا نا + تركيز توفير القوة الدافعة للخلوي نا + وMA + امتصاص. يتم ترتيب الحويصلي امتصاص مثبطات قبل حويصلي مثبطات البروتون antiporter (VMAT؛ (2))، والانتقال MA + في الحويصلة في مقابل اثنين من البروتونات. وH ضخم + التدرج وإمكانية غشاء حويصلي، سواء التي وضعتها مضخة البروتون الحويصلية (H + إطعام الفئران) يدفع H + من الحويصلة وبالتالي يعزز حويصلي MA + امتصاص. آثار hyperforin على امتصاص مثبطات (الجانب الأيمن من نموذج): العمل protonophore من hyperforin يتحرك H + في الخلية (المشبك) نظرا لإمكانات غشاء السلبية (3). بالإضافة إلى ذلك، hyperforin يتحرك H + من الحويصلات، مدفوعا H ضخم + التدرج والغشاء الحويصلي إيجابي محتمل (4). تبديد للحويصلي H + التدرج أطلال القوة الدافعة لحويصلي تعتمد على VMAT MA + امتصاص (2). وتحمض عصاري خلوي، بوساطة H تعتمد على hyperforin + تدفق وH + بيان من الحويصلات، ويزيد من نشاط المبادلات غشاء البلازما الصوديوم والبروتون (NHE؛ (5))، التي يقودها نا + التدرج والسلبية غشاء المحتملة، ويتحرك احد H + الخروج من الخلية في تبادل واحد نا + في الخلية. وهذا يؤدي إلى زيادة في عصاري خلوي نا + تركيز، والحد من القوة الدافعة للMA الخلوية التي تعتمد على MAT + امتصاص (1).

الصورة بالحجم الكامل

تؤخذ معا هذه البيانات تظهر تعززت أن الإفراج عن FFN511 وتم تخفيض تراكم FFN511 في وجود hyperforin، والتي، بسبب النشاط protonophore لها وانهيارات درجة الحموضة حويصلي ويزيد من بين الخلايا نا + معزز تفعيل المبادلات الصوديوم والبروتون.

نقاش

وتظهر هذه الدراسة أن hyperforin، فإن العنصر النشط كبير من نبتة سانت جون استخراج، يؤدي الى تصرف أيون بارزا في الماوس الأساسي الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا أليفة الكروم القشرية، HEK-293 الخلايا وطبقات ثنائية الدهون. هذا تصرف أيون مستقل عن وجود قنوات TRPC6، بوساطة لا من نا +، K +، كا 2+، والمغنيسيوم 2+ ولا من الكلورين -، ولكن يعتمد إلى حد كبير على درجة الحموضة خارج الخلية والخلايا. أداء كامل الخلية المشبك التصحيح وتجارب التصوير الحموضة نحن يمكن أن تظهر أن التيار الناجم عن hyperforin يتم عن طريق البروتونات. وجود نفس بوساطة hyperforin تصرف في طبقات ثنائية الدهون كما هو الحال في أنواع الخلايا الثلاثة يشير إلى أن hyperforin لا يحتاج الى بروتين قناة لبروتون النشاط إجراء، ولكن بدلا نفسها بمثابة protonophore. غير تشبع-الزيادة الحالية والسعة (انظر الشكل 2C) إلى تراكم hyperforin محبة للدهون في الغشاء البلازمي، والتي قد تفسر آثار الجرعات المنخفضة حتى من hyperforin خلال نبتة سانت جون استخراج العلاج 37.
وعلى سبيل المثال مركبات مع النشاط protonophore في الميتوكوندريا الامم المتحدة صلات-الكربونيل السيانيد ف trifluoromethoxyphenylhydrazone (FCCP)، الكربونيل السيانيد م-chlorophenylhydrazone (CCCP) أو 2،4-داي نيتروفينول (إدارة التخطيط الوطني). انهم جميعا يشتركون في هيكل العطرية مع مجموعة حمض غير إجتماعي ضعف شخصية الحمضية (الباكاف الحمضية: FCCP 6.2، 5.59 CCCP، DNP 4.1)، قوية الإلكترون سحب شاردة والمجموعات الكارهة للماء ضخمة 38. وعلى النقيض من protonophores العام للbiycyclic polyprenylated acylphloroglucinol hyperforin، ليست نموذجية العطرية، ولكن مركب مثل الفينول 8. وتشترك في نفس مسعور وضعف الطابع الحمضية (الباكاف الحمضية 4.8 7) كما protonophores معروفة، وphloroglucinols البعض مثل moronone (مكرر geranylacylphloroglucinol) 39، 2،4-diacetylphloroglucinol (DAPG) 40، ومضادة للسرطان وكيل nemorosone 41، وقد ثبت أن تكشف protonophore والنشاط فك ربط الميتوكوندريا.
العديد من النماذج تصف H + النبات عن طريق protonophores عبر طبقات ثنائية الدهون. إن أبسط قواعد نموذج على ضعف جزيء الحمضية، الذي يتم امتصاصه في شكله انيوني في واجهة الحل / غشاء على الجانب الإيجابي من الغشاء وهناك بربط H +. يرجع ذلك إلى التفاعل مع H + جزيء يصبح محايدا وينتشر نحو الجانب السلبي للغشاء. هنا H + يترك حمض ضعيف مرة أخرى، والتي بعد ذلك، في شكله انيوني، يتحرك جيئة electrophoretically إلى الجانب الايجابي من الغشاء ودورة إعادة تشغيل 38. يتم توفير القوة الدافعة اللازمة من قبل غشاء المحتملة وتركيز البروتونات على جانبي الغشاء. منذ hyperforin يكشف عن ضعف شخصية الحمضية 7 ويبدو أن تتراكم في الغشاء الخلوي (انظر الشكل 2C)، قد ينطبق هذا النموذج أيضا لوضع protonophore عمل hyperforin.
يتم تنشيط فك ربط بروتين 1 (UCP1) الذي ينقل البروتونات عبر الغشاء الداخلي للميتوكوندريا الدهون البنية التي كتبها الأحماض الدهنية طويلة السلسلة (كفاس) 42. انها تتوسط أيضا تيارات بروتون بعد إعادة في طبقات ثنائية الدهون مستو على التنشيط كفاس 43. في الآونة الأخيرة، Fedorenko وآخرون 44 اقترح آلية حيث ربط كفاس إلى UCP1، البروتونات الصيد على جانب واحد من الغشاء وإرشادهم الحوض الصغير UCP1 إلى الجانب الآخر من الغشاء. ثم يتم الإفراج عن البروتونات وكفاس البقاء ملزمة في UCP1. آلية بوساطة hyperforin بروتون تصرف قد يكون أكثر ارتباطا لآلية النقل من الأحماض الضعيفة الأخرى (انظر أعلاه) بدلا من UCP1. ومع ذلك، فإن العلاقة بين الجهد الحالي للLCFA تنشيط بوساطة UCP1 بروتون الحالي في mitoplasts، معزولة عن الماوس الدهنية البني الأنسجة 44، ويبدو بالضبط نفس الرابع من التيارات التي يسببها hyperforin في هذه الدراسة. وبالإضافة إلى ذلك، فإن إمكانات عكس التيارات تحول بطريقة مشابهة جدا على التغييرات الرقم الهيدروجيني.
شاترجي وآخرون 29 تردد عن تعتمد على الجرعة الداخل الحالي في عزلة الخلايا العصبية قرن آمون الفئران تنشيط hyperforin. تناسب السيني كشف عن وجود EC 50 من 9.1 ميكرومتر، قريبة جدا من EC 50 لتيارات الداخل الناجم عن hyperforin والخارج (9.3 ميكرومتر و 8.7 ميكرومتر، على التوالي)، وتحمض داخل الخلايا (8.5 ميكرومتر) تقاس في هذه الدراسة. ومع ذلك، زعموا أن بعض البيانات الأولية على الجهد والاعتماد الأيونية من الداخل التيار تنشيط hyperforin، الذي لا يظهر في ورقتهم، اقترح دورا بارزا من الأنيونات.
تظهر البيانات المتوفرة لدينا بشكل واضح أن hyperforin نفسها بمثابة protonophore قوية التوسط التيارات بروتون كبيرة. يمكن أن تحدث هذه التيارات في غشاء البلازما، مما أدى إلى H + تدفق نظرا لإمكانات غشاء السلبية، وعلى عضيات داخل الخلايا. معظم العضيات الحفاظ على بيئة intraorganellar الحمضية وprotonophore النشاط يؤدي إلى هروب رأس المال من البروتونات في العصارة الخلوية. وهكذا، وفي كلتا الحالتين، يصبح الرقم الهيدروجيني عصاري خلوي أكثر حمضية. هذا تحمض داخل الخلايا و / أو تبديد للبروتون التدرج الميتوكوندريا مع احق الكالسيوم 2+ والزنك 2+ إطلاق سراح 12 قد تساهم بشكل مباشر في مختلف الآثار من hyperforin، بما في ذلك مضادة للالتهاب، proapoptotic، أنتيبروليفرتيف وعمل المضادات الحيوية 1.
وقد تبين أن نبتة سانت جون للتخفيف من أعراض الكآبة المعتدلة 6، 45، ومؤخرا التحليل التلوي يظهر أن مستخلصات نبتة سانت جون هي أيضا مضادات الاكتئاب فعالة لعلاج الاكتئاب الرئيسي 46. العنصر النشط معظم كبار ربما من نبتة سانت جون، hyperforin هو المانع من امكانات 5-HT، الدوبامين، بافراز، أستيل كولين، GABA والغلوتامات امتصاص في الأعمال التحضيرية synaptosomal 13، 14، 15، 17، 18، وجزء من اكتئاب لها وقد عزا الإجراءات للتغيرات في الخلايا H + والصوديوم + تركيزات والتخزين الناقلات العصبيه في الحويصلات المشبكية 17، 22، 23، 24، 25، 26. امتصاص الناقل العصبي الخليوي عن النقل قبل المشبكي يعتمد على نا + من cotransport 47، والظروف التي تقلل من نا + التدرج للغشاء الخلايا العصبية، إما عن طريق خفض أو رفع خارج الخلية داخل الخلايا نا +، الحد بشكل كبير من كفاءة هذه الناقلين. المغني وآخرون. 23 اقترح بالفعل أن hyperforin يمنع امتصاص السيروتونين التي كتبها الارتقاء داخل الخلايا نا + تركيز الصفائح الدموية في الإنسان، ولكن الآلية كيف hyperforin يزيد من عصاري خلوي نا + لم يكن معروفا في ذلك الوقت. في عام 2007، Leuner وآخرون. 26 اقترح hyperforin يتوسط نا + الزيادة، وبالتالي الآثار العصبي إعادة امتصاص، من خلال تفعيل وتحديدا قناة الموجبة غير انتقائية TRPC6. ومع ذلك، من خلال تحمض عصاري خلوي، كما هو مبين في الشكل 4، الوقود hyperforin مبادل غشاء البلازما الصوديوم والبروتون (NHE)، مما يزيد من داخل الخلايا الحرة نا + تركيز، كما هو مبين في 7A الرقم الذي يحول دون امتصاص الناقل العصبي، وهذا يتوقف على نا + من cotransport . في نفس الوقت hyperforin تبدد H + التدرج في الناقل العصبي الحويصلات 16، 22 حسب النشاط protonophore وبالتالي يضعف الحويصلي امتصاص وتخزين وإطلاق النواقل العصبية (انظر الشكل 6). وتشير البيانات نشاطنا protonophore أن hyperforin غير الكامنة وراء العمليتين (انظر الشكل 7C) وشرح لماذا hyperforin على النقيض من ريزيربين أو مثبطات المضادة للاكتئاب مثبطات إعادة امتصاص الكلاسيكية هي فريدة من نوعها من حيث أنها تمارس تأثيرها ليس فقط على الأمينات الأحادية ولكن أيضا على الآخر الناقلات العصبية بما في ذلك أستيل كولين، GABA والغلوتامات.

طرق

إعداد الخلايا الدبقية الصغيرة والثقافة

تم الحصول على خلايا دبقية صغيرة من قشرة الدماغ لدى الفئران حديثي الولادة (ثلاثة أيام بعد الولادة 0-3) كما هو موضح سابقا 48. باختصار، تم قطع رأس الجراء وأزيلت أدمغتهم وجمعت تحت ظروف معقمة في Dulbecco لتعديل النسر المتوسطة (DMEM، إينفيتروجن) تستكمل مع 1٪ البنسلين / الستربتومايسين (سيغما) و 1٪ L-ألانيل-L-الجلوتامين (GlutaMAX، إينفيتروجن ). تم تشريح القشور، السحايا إزالتها، وtriturated بعد الهضم الأنزيمي مع 0.25٪ التربسين / EGTA والغسيل في المتوسط. ثم أجبر جناسة من خلال 40 ميكرون تصفية ومطلي تعليق الناتج في 75 سم 2 قوارير الثقافة المغلفة بولي-L-ليسين التي تحتوي على المتوسطة مع 10٪ مصل بقري جنيني (FBS). بقيت الخلايا في حاضنة عند 37 درجة مئوية و 5٪ CO 2، وغيرت المتوسطة 3 أيام بعد إعداد ومرة واحدة في الأسبوع بعد ذلك. بعد حوالي 2-3 أسابيع في الثقافة وأظهرت قوارير طبقة متموجة من الخلايا النجمية مع الخلايا الدبقية تنمو على القمة. تم حصاد الخلايا الدبقية ومعزولة عن طريق هز قوارير للافراج عن الخلايا الدبقية الصغيرة فضفاضة يعلق في طاف. تم غسلها الخلايا الدبقية الصغيرة من طاف، مطلي على coverslips الزجاج المطلي بولي-L-ليسين (1 سم في القطر) ويوضع في المتوسط ​​مع 10٪ FBS. للسماح للخلايا على التكيف مع الظروف ثقافة فرعية استخدمت خلايا مطلي لتجارب المشبك التصحيح بعد 3-7 أيام الحصاد.

FACS وRT-PCR الخلايا الدبقية

وكان حصاد الخلايا الدبقية من الثقافات المختلطة (انظر أعلاه)، ملطخة بشكل انتقائي من قبل وحيدة النسيلة الماوس المضادة CD11b الضد مترافق FITC (ميلتيني بيوتيك شركة، صحراء، CA، الولايات المتحدة الأمريكية) وفرزها الى 50 خلايا في أنبوب من قبل الخلية مضان تنشيط الفرز ( FACS؛ MoFlo تدفق عداد الكريات، Cytomation، بوردو، CO، الولايات المتحدة الأمريكية). لكل RT-PCR استخدمت عددا من الخلايا الدبقية 50 فرزها. تم إجراء RT-PCR باستخدام مرتفع ™ خطوة واحدة RT-PCR مع Platinum® طق (Stratagene، لا جولا، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). واستخدمت أزواج التمهيدي التالية: 5'-TCC AGG AAA TTG AGG ATG ATG CG-3 "و5'-TTG غا دول مجلس التعاون الخليجي TTG CTT TTG ACC C-3" لTrpc6، و5'-GTC AAC GGG GGA CAT AAA AGT TAT TGG-3 "و5'-GCT TGC AAC AAC CAT CTT TTT GGG-3" لHPRT (hypoxanthin-guanin-فسفوريبوزيل). مجموع RNA من مخ الفأر خدم السيطرة الإيجابية.

إعداد خلية أليف للكروم والثقافة

تم الحصول على الخلايا أليفة الكروم من الغدد الكظرية من الفئران حديثي الولادة (ثلاثة أيام بعد الولادة 0-1). كانت مقطوعة الرأس الجراء وتم تشريح الغدد الكظرية التي تم جمعها في لوك متوسط ​​(في ملي: 154 كلوريد الصوديوم، 5.6 بوكل، 3.6 NaHCO 3، 5.6 الجلوكوز، 5 HEPES، ودرجة الحموضة 7.3)، وتمت إزالة النسيج الضام. بعد 45 دقيقة من عملية الهضم الأنزيمي مع 10 وحدة / مل غراء في DMEM تحتوي على 0.02٪ L-السيستين، 1 ملم CaCl 2 و 0.5 ملي EDTA أوقف رد فعل الأنزيمي DMEM تستكمل مع 10٪ FBS، 0.25٪ الزلال و 0.25٪ trypsin- المانع (نوع II-O، بيض الدجاج). ثم كانت تغسل الغدد في "المخصب" DMEM (4.5 غرام / لتر الجلوكوز، 0.1٪ من ركلة جزاء / بكتيريا، 1٪ الانسولين ترانسفيرين السيلينيوم-X) وtriturated بلطف مع ماصة 200 ميكرولتر حتى الحصول على تعليق خلية. الخلايا ثم تم مطلي على زلات غطاء زجاجي (1 سم في القطر) ويتم الحفاظ عليها "المخصب" DMEM في الحاضنة في 10٪ CO 2 و 37 درجة مئوية. وقد أجريت تجارب في غضون 1-5 أيام بعد الإعداد.

الفئران

TRPC6 - / - وTRPC6 - / - / TRPC3 - / - وقد وصفت الفئران في أماكن أخرى 49، 50. تم إنشاء TRPC6- واحدة والفئران TRPC3 نقص وقدم تفضلت مختبر لوتز Birnbaumer (علوم الصحة البيئية / NIHR والبحوث المثلث بارك، NC 27709، الولايات المتحدة الأمريكية). نفذت كل رعاية الحيوان والإجراءات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية المعتمدة. وتمت الموافقة على المبادئ التوجيهية وجميع البروتوكولات التجريبية من قبل لجنة رعاية الحيوان من جامعة سارلاند مدرسة الطب.

زراعة الخلايا كلوة

HEK-293 خلايا (آي تي سي سي، CRL 1573) تم الحصول عليها من نوع الثقافة مجموعة أمريكا (آي تي سي سي، ماناساس، VA، الولايات المتحدة الأمريكية) والخلايا كلوة معربا عن ستابلي TRPC6 كدنا] (تفضلت التي تقدمها الدكتور MX تشو، جامعة تكساس مركز العلوم الصحية، وكانت هيوستن) مثقف في MEM وDMEM، على التوالي، مع 10٪ FBS. بقيت الخلايا في حاضنة عند 37 درجة مئوية و 5٪ CO 2، وغيرت المتوسط ​​كل يوم الثالث على التوالي. كانت مطلية الخلايا على coverslips الزجاج من 1 سم وقطرها المغلفة مع بولي-L-يسين.

التسجيلات الكهربية

وسجلت التيارات بكي في ختم ضيق التصحيح خلية كاملة التكوين المشبك باستخدام EPC-9 مكبر للصوت (HEKA الالكترونيات، LAMBRECHT، ألمانيا). تم سحب ماصات التصحيح من الزجاج الشعيرات الدموية GB150T-8P (المنتجات العلوم، هوفهايم، ألمانيا) في بولير العمودي (PC-10، Narishige، طوكيو، اليابان)، وكان المقاومات بين 2 و 4 MΩ عندما تمتلئ حل داخلي القياسي (في ملي : 120 CS-الصوديوم، كلوريد الصوديوم 8، 1 MgCl 2، 10 HEPES، 10 CS-BAPTA، 3.1 CaCl 2 (100 نانومتر مجانا كا 2+، وتحسب مع WebMaxC (http://www.stanford.edu/~cpatton/webmaxcS . HTM))، ودرجة الحموضة تعديلها إلى 7.2 مع CsOH). الحل الخارجي القياسية يرد (مم): 140 كلوريد الصوديوم، و 2.8 بوكل، 2 MgCl 2، 1 CaCl 2، 10 HEPES، 10 الجلوكوز، ودرجة الحموضة تعديلها إلى 7.2 مع هيدروكسيد الصوديوم. بالنسبة لبعض التجارب تم تعديل الرقم الهيدروجيني إلى 5.4 أو 6.5 و 7.9 أو 8.9 بإضافة حمض الهيدروكلوريك وهيدروكسيد الصوديوم، على التوالي. في الأحادي التكافؤ حل خالية من الأيونات الموجبة نا + وK + حلت محلها NMDG + (N-ميثيل-د-glucamine)، وثنائي التكافؤ اسميا حل خالية من الأيونات الموجبة CaCl 2 و MgCl 2 حذفت. خالية من كلوريد حل خارجي يتكون من (مم): 140 نا اسبارتاتي، 1 كا-غلوكونات، 2 MgSO 4، 10 HEPES و 10 الجلوكوز، ودرجة الحموضة تعديلها إلى 7.2 مع هيدروكسيد الصوديوم. أضيفت Hyperforin، الكربونيل السيانيد م-chlorophenylhydrazone (CCCP)، 1-oleoyl-2-أسيتيل-SN-الجلسرين (OAG) أو حامض الفلوفيناميك (FFA) إلى حل خارجي معيار من 100 ملم أو 50 ملم حل الأسهم في DMSO ل تصل تركيزات النهائي كما هو مبين. أجريت OAG وFFA التجارب على الخلايا كلوة، معربا عن TRPC6 في 200 ميكرومتر الخارجي CaCl 2. طبقت جميع الحلول المعدلة مباشرة على خلية التصحيح فرضت عبر تطبيق ماصة ضغط يحركها. في بعض التجارب تم استخدام ماصة تطبيق الثانية. الأسمولية من جميع الحلول تراوحت بين 290 و 310 الميلي أسمول. طبقت سلالم الجهد من 50 مللي مدة تمتد على مدى الجهد من -100 إلى 100 ​​فولت عند 0.5 هرتز من عقد المحتملة (V ح) من 0 بالسيارات على مدى فترة تصل إلى 500 الصورة باستخدام برنامج PatchMaster (HEKA). وقد تم تصحيح جميع الفولتية ل10 بالسيارات إمكانية تقاطع السائلة. تم تصفية التيارات 2.9 كيلو هرتز ورقمنة على 100 ​​ميكرو ثانية فترات. تم تحديد التيارات بالسعة والمقاومة سلسلة وتصحيح قبل كل منحدر الجهد باستخدام التعويض السعة التلقائي للEPC-9. تم طرح التيارات الأساسية قبل تطبيق للحصول على صافي الحالية النامية. تم استخراج الداخل والخارج التيارات من كل منحدر التسجيل الحالي الفردية عن طريق قياس سعة الحالية في -80 و+80 بالسيارات، على التوالي، ورسم مقابل الوقت. تم استخراج الجهد الحالي (IV) العلاقات في نقطة زمنية المشار إليها. تم تطبيع التيارات إلى الحجم الأولي للخلية للحصول على الكثافة الحالية (PA / الجبهة الوطنية). لبعض التغييرات التجارب من حجم الخلية (تطبيع السعة التي تقاس والمستخرجة من التعويض السعة التلقائي للEPC9) وتم التخطيط لإمكانية عكس التيارات مقابل الوقت.

التصوير الحموضة

أجريت داخل الخلايا الحية تجارب التصوير الحموضة خلية باستخدام فازة الثاني ومضخم (MEA1530SF-V2DN، SMT، سيفيلد، ألمانيا) نظام التصوير المستندة من TILL الضوئيات (Martinsried، ألمانيا) في زايس Axiovert 135 M المجهر مضان مجهزة زايس 40 × / 0.65 الهدف Achroplan. وقد أنجز السيطرة على اكتساب الملون II والبيانات عبر البرنامج EPC-9 وPatchMaster. قبل الخلايا التجارب وحضنت في وسائل الإعلام تستكمل مع 2 ميكرومتر حساسة للدرجة الحموضة صبغة الفلورسنت BCECF-AM لمدة 30 دقيقة في الظلام في 37 ° C، وغسلها بمحلول الخارجي القياسية لإزالة الزائدة BCECF-AM. الخلايا محملة BCECF، وتزايد في 1 سم coverslips الزجاج، تم نقلهم إلى غرفة الحمام التي تحتوي على الحل الخارجي القياسية، وتمت مراقبة BCECF مضان من خلية واحدة مع مضخم في> 510 نانومتر بعد الإثارة في 490 و 450 نانومتر لمدة 15 مللي ثانية كل بمعدل 0.5 هرتز لمدة تصل إلى 600 ق. وأضاف Hyperforin إلى حل خارجي معيار من 100 ملم الأوراق المالية (DMSO) للوصول إلى تركيزات النهائي كما هو مبين وتطبيقها مباشرة على الخلايا وحيدة عن طريق ماصة تطبيق ضغط يحركها (انظر الشكل 4A-ج). بالنسبة لبعض التجارب 20 ملي NH 4 تم إضافة الكلور إلى حل خارجي القياسية والضغوط التي مورست على خلية محسوبة. نسبة لتصحيح الخلفية BCECF مضان في 490 و 450 نانومتر (F 490 / F 450 وتآمر) مقابل الوقت. بالنسبة لبعض التجارب تم الكشف عن مضان BCECF التي تعتمد من قبل الكاميرا (SensiCam) نظام التصوير المستندة (Polychrom V، TILL الضوئيات) في زايس Axiovert 100 M المجهر مضان عبر هدف زايس Fluar 20 × / 0.75، وأضيف hyperforin في حمام كما هو مبين (انظر الشكل 7B). أجريت الحصول على البيانات وتحليلها من قبل TILLvisION البرمجيات (TILL الضوئيات).

التسجيلات الكهربية مجتمعة والتصوير الرقم الهيدروجيني

من أجل تحديد التغييرات التي يسببها hyperforin من درجة الحموضة داخل الخلايا تحت إمكانات غشاء محددة، تم استخدام هذه التقنية الضوئية (انظر التصوير الحموضة) في تركيبة مع خلية كاملة التصحيح تقنية المشبك (انظر التسجيلات الكهربية). ماصة التصحيح الواردة حل داخلي قياسي تستكمل مع 100 ميكرومتر من BCECF (حمض الحرة). كان متحمس BCECF في 490 و 450 نانومتر لمدة 25 مللي ثانية لكل بمعدل 0.5 هرتز لمدة تصل إلى 800 ق. تم تطبيق Hyperforin إلى الخلية عن طريق الضغط مدفوعة تطبيق ماصة كما هو موضح في التصوير ودرجة الحموضة والتجارب المشبك التصحيح. تم تغيير إمكانية عقد بين سلالم الجهد من 0 إلى -80 بالسيارات أو +80 بالسيارات كما هو مبين (انظر الشكل 4D-ح). وقد تم تحليل التيارات الخلوية والتغيرات مضان كما هو موضح أعلاه.

التصوير الصوديوم

الخلايا الخلية الحية نا + أجريت تجارب التصوير باستخدام نفس القائمة على نظام كاميرا التصوير (Polychrom V، TILL الضوئيات) كما لتصوير الرقم الهيدروجيني (انظر أعلاه). قبل الخلايا التجارب وحضنت في وسائل الإعلام تستكمل مع 2 ميكرومتر من نا + -sensitive صبغة الفلورسنت SBFI-AM عن 30-45 دقيقة في الظلام في 37 ° C، وغسلها بمحلول الخارجي القياسية لإزالة الزائدة SBFI-AM. الخلايا محملة SBFI، وتزايد في 1 سم coverslips الزجاج، تم نقلهم إلى غرفة الحمام التي تحتوي على الحل الخارجي، وتمت مراقبة SBFI مضان من الخلايا وحيدة في> 510 نانومتر بعد الإثارة في 340 و 380 نانومتر لمدة 100 مللي كل بمعدل 0.5 هرتز لمدة تصل إلى 800 ق. أضيفت Hyperforin وDMSO في الحمام كما هو مبين. نسبة لتصحيح الخلفية SBFI مضان في 340 و 380 نانومتر (F 340 / F 380 وتآمر) مقابل الوقت (انظر الشكل 7A). أجريت الحصول على البيانات وتحليلها من قبل TILLvisION البرمجيات (TILL الضوئيات).

تجارب التصوير FFN511

الماوس أليف الكروم وHEK-293 الخلايا، مطلي على coverslips الزجاج، وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في وسائل الإعلام الثقافة التي تحتوي على 10 ميكرومتر من الناقلات العصبية كاذبة الفلورسنت FFN511 (trifluoroacetate هيدرات الملح). بالنسبة لبعض التجارب و10 ميكرومتر hyperforin أو 0.1٪ DMSO (كما المراقبة) بالفعل حاضرا أثناء الحضانة مع FFN511. تم غسلها الخلايا مع معيار حل المسابقة خارجي (انظر التسجيلات الكهربية) وأبقى في الظلام لمدة 15 دقيقة أخرى. خلال التجربة كان كل 5 ثوان FFN511 متحمس في 400 نانومتر لمدة 10 مللي ومضان تعتمد على FFN511 (> 510 نانومتر) من الخلايا واحدة تم الكشف باستخدام نفس القائمة على نظام كاميرا التصوير (Polychrom V، TILL الضوئيات) كما لدرجة الحموضة والصوديوم + التصوير (انظر أعلاه). طبقت Hyperforin، CCCP، بوكل عالية أو DMSO في الحمام كما هو مبين. أجريت الحصول على البيانات وتحليلها من قبل TILLvisION البرمجيات (TILL الضوئيات).

المجهر متحد البؤر

تم تحميل الماوس الخلايا أليفة الكروم بنفس الطريقة لFFN511 تجارب التصوير (انظر أعلاه). بالإضافة إلى ذروة الإثارة لها في حوالي 400 نانومتر FFN511 يظهر أيضا إثارة كبيرة في 488 نانومتر. وهكذا، تم استخدام خط 488 نانومتر ليزر الأرجون لتصور مضان تعتمد على FFN511 (إعدادات التصفية GFP) مع المجهر متحد البؤر زايس LSM780 التي تسيطر عليها برنامج النظام ZEN 2012 (كلا من كارل زايس، Oberkochen، ألمانيا).

تجارب الدهون طبقة ثنائية

وقدمت طبقات ثنائية الدهون على طرف ماصات التصحيح من الطبقات الوحيدة فوسفورية على السطح من الحل حمام (انظر المرجع 35). وباختصار، حلت 10 ملغ الدهون (Ionovation، أوسنابروك، ألمانيا) في 100 ميكرولتر ن ديكان، وأضيف 1 ميكرولتر بلطف على سطح 1 مل من محلول حمام في الذي غمر ماصة التصحيح بالفعل. حمام وماصة حل تتكون من 150 ملي بوكل و 10 ملي HEPES، وضبط درجة الحموضة إلى 7.0 مع KOH. في غضون نحو 10 دقيقة تم تشكيل أحادي الطبقة الدهنية على رأس من الحل الحمام. تم نقل ماصة التصحيح بلطف من الحمام مع أحادي الطبقة الدهنية تشكيل في طرفها. بواسطة immerging ماصة التصحيح مرة أخرى في المغطاة أحادي الطبقة الدهون حمام حل طبقة ثنائية المادة الدهنية الضيقة (في بعض الأحيان) أشكال في غيض من ماصة التصحيح، وأشار مقاومة gigaohm. طبقت سلالم الجهد وتم قياس التيارات وتحليلها كما هو موضح في خلية كاملة التجارب المشبك التصحيح أعلاه. 10 ميكرومتر hyperforin، و 100 ميكرومتر CCCP أو 1٪ DMSO طبقت على طبقة ثنائية المادة الدهنية في غيض من ماصة التصحيح.

تحليل البيانات

تم إجراء تحليل أولي للتجارب التصوير الحموضة الكهربية والقائم على مضخم مع FitMaster (HEKA)، وFFN511 القائم على الكاميرا، SBFI وتم تحليل تجارب التصوير الرقم الهيدروجيني باستخدام TILLvisION (TILL الضوئيات). ايغور برو (الموجة المقاييس، بحيرة أوسويجو، OR، الولايات المتحدة الأمريكية)، يماغيج (NIH، الولايات المتحدة الأمريكية) وأدوبي المصور استخدمت لمزيد من التحليل وإعداد الأرقام. عند الاقتضاء وبلغ متوسط ​​البيانات وإعطاء كما يعني ± SEM لعدد المحدد من الخلايا. استخدمت اثنين من الذيل عينة اثنين تي الاختبارات على قدم المساواة الطلاب التباين في (مايكروسوفت إكسل) لاختبار اختلافات كبيرة. حسبت إمكانات عكس النظرية لتيارات بروتون عبر المعادلة نرنست مع R = 8.314 J / (مول * K)، T = 297 K، F = 96485 C / مول، ض = 1، و[H +] تحويلة و[H +] كثافة العمليات تمثل تركيزات البروتون الخارجية والداخلية، على التوالي.

مواد كيميائية

Hyperforin-dicyclohexylammonium تم الحصول على (-DCHA) الملح من سيغما، وhyperforin حل الحمض الحر كما هو الحال في الميثانول من سيجما وBiomol (كايمان الكيميائية). تم الحصول على BCECF-AM وحامض خالية من BCECF من المسابر الجزيئية (يوجين، OR، الولايات المتحدة الأمريكية)، وSBFI-AM من TEFLabs (أوستن، TX، الولايات المتحدة الأمريكية). الدهون لطبقة ثنائية المادة الدهنية قدمت التفضل الدكتور مارتن يونغ، MEDIZINISCHE BIOCHEMIE اوند Molekularbiologie، هومبورغ. وقد تم الحصول على FFN511 وجميع المواد الكيميائية الأخرى من سيجما.

المراجع

• 1.
  ، MA المدينة المنورة، مارتينيز بوفيدا، B.،، MI أموريس-سانشيز وكيسادا، AR Hyperforin: أكثر من مجمع النشطة بيولوجيا المضادة للاكتئاب. علوم الحياة 79، 105-111، 10.1016 / j.lfs.2005.12.027 (2006) .
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 2.
  Hostanska، K.، Reichling، J.، بومر، S.، ويبر، M. & سالار، R. Hyperforin المكونة من نبتة سانت جون (بيرفوراتوم L.) استخراج يستحث موت الخلايا المبرمج عن طريق إحداث تفعيل caspases ومع hypericin يمارس بالتآزر سمية الخلايا نحو خطوط الخلايا الخبيثة الإنسان. اليورو. J. فارم. بيوفارم. 56، 121-132 (2003).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 3.
  Schempp، CM آخرون تثبيط نمو الخلايا السرطانية عن طريق hyperforin، وهو دواء مضاد للسرطان جديدة من نبتة سانت جون الذي يعمل عن طريق استحثاث موت الخلايا المبرمج. الجين الورمي 21، 1242-1250، 10.1038 / sj.onc.1205190 (2002).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 4.
  دونا، M. وآخرون يمنع Hyperforin غزو السرطان وورم خبيث. السرطان الدقة. 64، 6225-6232، 10.1158 / 0008-5472.CAN-04-0280 (2004).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 5.
  مارتينيز بوفيدا، B.، كيسادا، AR والمدينة المنورة، MA Hyperforin، وهو مركب الحيوية النشطة من نبتة سانت جون، هو المانع جديدة من الأوعية الدموية التي تستهدف العديد من الخطوات الأساسية لعملية. كثافة العمليات. J. السرطان 117، 775-780، 10.1002 / ijc.21246 (2005).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 6.
  دي كارلو، G.، بوريللي، F.، ارنست، E. & عزو، AA سانت جون ورت: بروزاك من المملكة النباتية. اتجاهات Pharmacol. الخيال العلمي. 22، 292-297 (2001).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 7.
  جورفيتش، AI، دوبرنين، VN، كوسولوف، MN، Popravko، SA & Riabova، ID [hyperforin المضادات الحيوية من بيرفوراتوم L]. Antibiotiki 16، 510-513 (1971).
  • • CAS
    • مجلات
• 8.
  Verotta، L.، Appendino، G.، Bombardelli، E. & برون، R. في النشاط المضادة للملاريا المختبر من hyperforin، وهو acylphloroglucinol prenylated. دراسة هيكل النشاط. Bioorg. ميد. علم. بادئة رسالة. 17، 1544-1548، 10.1016 / j.bmcl.2006.12.100 (2007).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 9.
  مور، LB آخرون سانت نبتة جون يحرض استقلاب الدواء كبدي من خلال تفعيل بريغنان X المستقبلة. بروك. NATL. أكاد. الخيال العلمي. الولايات المتحدة الأمريكية 97، 7500-7502، 10.1073 / pnas.130155097 (2000).
  • • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 10.
  ألبرت، D. آخرون. Hyperforin هو المانع المزدوج للانزيمات الأكسدة الحلقية-1 و 5 أكسيجيناز شحمية. الكيميائية الحيوية. Pharmacol. 64، 1767-1775 (2002).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 11.
  كوخ، E. & تشاترجي، SS Hyperforin يحفز تعبئة الكالسيوم داخل الخلايا ويعزز تحمض خارج الخلية في DDT1-MF2 خلايا العضلات الملساء. Pharmacopsychiatry 34 ملحق 1S70-73 (2001).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 12.
  تو، P.، Gibon، J. & Bouron، A. وTRPC6 قناة المنشط hyperforin الحث على الافراج عن الزنك والكالسيوم من الميتوكوندريا. J. نوروتشيم. 112، 204-213، 10.1111 / j.1471-4159.2009.06446.x (2010).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 13.
  تشاترجي، SS، بهاتاشاريا، SK، Wonnemann، M.، المغني، A. ومولر، WE Hyperforin ممكن مكون مضاد للاكتئاب من مستخلصات عشبة. علوم الحياة. 63، 499-510 (1998).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 14.
  غوبي، M. وآخرون. بيرفوراتوم L. مستخلص لا تمنع نقل 5-HT في قشرة دماغ الفئران. Naunyn Schmiedebergs القوس. Pharmacol. 360، 262-269 (1999).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 15.
  Wonnemann، M.، المغني، A. ومولر، WE تثبيط امتصاص synaptosomal من 3H-L-الغلوتامات و3H-GABA التي كتبها hyperforin، أحد المكونات الرئيسية للنبتة سانت جون: دور الأميلوريد الصوديوم حساسية الممرات الموصلة. Neuropsychopharmacology 23 ، 188-197، 10.1016 / S0893-133X (00) 00102-0 (2000).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 16.
  تشاترجي، SS، بايبر، A. & Weibezahn، C. تحفيز الغلوتامات، اسبارتاتي وإطلاق حمض غاما الغاما من synaptosomes التي كتبها hyperforin. Pharmacopsychiatry 34 ملحق 1S11-19 (2001).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 17.
  روز، N.، مازور، Y.، Hirshfeld، A. & Rehavi، M. تثبيط امتصاص حويصلي من الأمينات الأحادية التي كتبها hyperforin. علوم الحياة. 71، 2227-2237 (2002).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 18.
  Buchholzer، ML، دفوراك، C.، تشاترجي، SS & كلاين، J. تعديل المزدوج الإفراج أستيل الجسم المخطط من قبل hyperforin، المكونة من نبتة سانت جون. J. Pharmacol. إكسب. ذر. 301، 714-719 (2002).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 19.
  Eiden، LE، شافر، MK، ويهي، E. & شدس، B. عائلة نقل أمين الحويصلي (SLC18): antiporters أمين / بروتون اللازمة لتراكم الحويصلي وإفراز exocytotic المنظم من الأمينات الأحادية وأستيل.. Pflugers القوس 447، 636- 640، 10.1007 / s00424-003-1100-5 (2004).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 20.
  Gasnier، B. نقل وSLC32، وهو بروتين أساسي للإفراج متشابك من الأحماض الأمينية المثبطة. Pflugers القوس 447، 756-759، 10.1007 / s00424-003-1091-2 (2004).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 21.
  رايمر، RJ & إدواردز، RH النقل أنيون العضوية هي الوظيفة الأساسية للSLC17 / نوع I نقل الفوسفات الأسرة. Pflugers القوس. 447، 629-635، 10.1007 / s00424-003-1087-Y (2004).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 22.
  روز، N. & Rehavi، M. Hyperforin يمنع امتصاص حويصلي من الأمينات الأحادية التي كتبها تشتيت درجة الحموضة التدرج عبر غشاء الحويصلة متشابك. علوم الحياة. 73، 461-470 (2003).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 23.
  المغني، A.، Wonnemann، M. & مولر، WE Hyperforin، المكونة المضادة للاكتئاب كبير من نبتة سانت جون، يمنع امتصاص السيروتونين برفع داخل الخلايا الحرة نا + 1. J. Pharmacol. إكسب. ذر. 290، 1363-1368 (1999).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
• 24.
  مولر، WE، المغني، A. & Wonnemann، M. النشاط Hyperforin-المضادة للاكتئاب من خلال آلية مبتكرة من العمل. Pharmacopsychiatry 34 ملحق 1S98-102 (2001).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 25.
  تريبر، K.، المغني، A.، هينكه، B. ومولر، WE Hyperforin ينشط قنوات الموجبة غير الانتقائية (NSCCs). برازيلي. J. Pharmacol. 145، 75-83، 10.1038 / sj.bjp.0706155 (2005).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 26.
  Leuner، K. وآخرون ينشط Hyperforin-المكونة رئيسيا من نبتة سانت جون على وجه التحديد قنوات TRPC6. FASEB J. 21، 4101-4111، 10.1096 / fj.07-8110com (2007).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 27.
  حزمة عشب، SR، تشو، MX، تروست، C.، Flockerzi، V. & Authi، KS التعبير ودور البروتينات TRPC في الصفائح الدموية البشرية: دليل على أن TRPC6 يشكل قناة دخول الكالسيوم مستقلة متجر. الدم 100، 2801-2811، 10.1182 / الدم 2002-03-0723 (2002).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 28.
  كومار، S. وآخرون آليات السيطرة على ثمرة neurite في خط خلية ورم القواتم: دور القنوات TRPC. J. زنزانة. الفيزيولوجيا. 227، 1408-1419، 10.1002 / jcp.22855 (2012).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 29.
  تشاترجي، S. وآخرون. Hyperforin خفف مختلف آليات تصرف الأيونية في الخلايا العصبية الحصين المعزولة من الفئران. علوم الحياة. 65، 2395-2405 (1999).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 30.
  Fisunov، A. وآخرون ينظم Hyperforin النابضة من P-نوع CA2 + التيار في الخلايا العصبية للدماغ العصبية. Pflugers القوس. 440، 427-434 (2000).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 31.
  Krishtal، O. آخرون التحوير من القنوات الأيونية في الخلايا العصبية الفئران من مكونات بيرفوراتوم. Pharmacopsychiatry 34 ملحق 1S74-82 (2001).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 32.
  كومار، V. آخرون. NMDA مستقبلات عدائية خصائص hyperforin، المكونة من نبتة سانت جون. J. Pharmacol. الخيال العلمي. 102، 47-54 (2006).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 33.
  إيكرت، GP & مولر، WE آثار hyperforin على سيولة أغشية الدماغ. Pharmacopsychiatry 34 ملحق 1S22-25 (2001).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 34.
  باباي، N. وآخرون المناطق الحساسة للأنيون من نوع L-قنوات الكالسيوم CaV1.2 أعرب في الخلايا HEK293. بلوس احد 5، e8602، 10.1371 / journal.pone.0008602 (2010).
  • • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 35.
  كورونادو، R. & اتوري، R. طبقات ثنائية الفوسفوليبيدية مصنوعة من الطبقات الوحيدة على ماصات التصحيح، المشبك. BIOPHYS. J. 43، 231-236، 10.1016 / S0006-3495 (83) 84343-4 (1983).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 36.
  Gubernator، NG وآخرون. الناقلات العصبية كاذبة الفلورسنت تصور إطلاق الدوبامين من محطات قبل المشبكي فردية. العلوم 324، 1441-1444، 10.1126 / science.1172278 (2009).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 37.
  سيرفو، L. آخرون دور hyperforin في النشاط المضادة للاكتئاب مثل من عشبة مقتطفات perforatum. علم الادوية النفسية (بيرل) 164، 423-428، 10.1007 / s00213-002-1229-5 (2002).
  • • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 38.
  تيرادا، H. تفاعل uncouplers نشطة للغاية مع الميتوكوندريا. Biochim. BIOPHYS. اكتا. 639، 225-242 (1981).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 39.
  داتا، S. وآخرون فحص تحلل السكر المانع يحدد مكرر geranylacylphloroglucinol protonophore moronone من Moronobea coccinea. J. نات. همز. 75، 2216-2222، 10.1021 / np300711e (2012).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 40.
  Troppens، DM، ديميترييف، RI، Papkovsky، DB، أوجارا، F. & موريسي، JP التحقيق الجينوم على نطاق أهداف الخلوية وطريقة عمل مضاد للبكتيريا المستقلب 2،4-diacetylphloroglucinol في خميرة الخباز. الخميرة FEMS الدقة . 13، 322-334، 10.1111 / 1567 حتي 1٬364،12037 (2013).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 41.
  باردو-أندرو، GL وآخرون. ومضاد للسرطان وكيل nemorosone غير وقوية uncoupler الميتوكوندريا بروتونات جديدة. الخيطية Mitochondrion 11، 255-263، 10.1016 / j.mito.2010.10.008 (2011).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 42.
  نيكولز، DG والتنظيم الفسيولوجي للبروتينات فك ربط. Biochim. BIOPHYS. اكتا 1757، 459-466، 10.1016 / j.bbabio.2006.02.005 (2006).
  • • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 43.
  Urbankova، E.، Voltchenko، A.، بول، P.، جيزيك، P. & بول، EE حركية النقل من البروتينات فك ربط. تحليل UCP1 تشكيلها في طبقات ثنائية الدهون مستو. J. بيول. علم. 278، 32497-32500، 10.1074 / jbc.M303721200 (2003).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 44.
  Fedorenko، A.، Lishko، PV وKirichok، Y. آلية تعتمد على الدهنية حمض UCP1 فك ربط في الميتوكوندريا الدهون البنية. CELL 151، 400-413، 10.1016 / j.cell.2012.09.010 (2012).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 45.
  ويسكي، E.، Werneke، U. & تايلور، D. مراجعة منهجية وتحليل تلوي لبيرفوراتوم في الاكتئاب: مراجعة السريري الشامل. كثافة العمليات. كلين. Psychopharmacol 16، 239-252 (2001).
  • • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 46.
  لينده، K.، بيرنر، MM & Kriston، L. نبتة سانت جون لرئيسي الاكتئاب. قاعدة بيانات كوكرين SYST. القس CD000448، 10.1002 / 14651858.CD000448.pub3 (2008).
• 47.
  توريس، GE، Gainetdinov، RR وكارون، MG البلازما الناقلين مونوامين غشاء: الهيكل والتنظيم وظيفة. نات. القس Neurosci. 4، 13-25، 10.1038 / nrn1008 (2003).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 48.
  Giulian، D. & بيكر، TJ الببتيدات الصادرة عن الخلايا الدبقية الصغيرة أميبانية تنظيم انتشار astroglial. J. خلية بيول. 101، 2411-2415 (1985).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 49.
  ديتريش، A.. وآخرون يزاد انقباض الأوعية الدموية على نحو سلس العضلات في TRPC6 - / - الفئران. مول. زنزانة. بيول. 25، 6980-6989، 10.1128 / MCB.25.16.6980-6989.2005 (2005).
  • • ISI
    • CAS
    • مجلات
    • مقالة
• 50.
  هاربر، MT آخرون مستقبلات عابر قنوات المحتملة وظيفة للكشف عن إشارة صدفة التوسط التعرض فسفاتيديل. الخيال العلمي. إشارة 6، ra50، 10.1126 / scisignal.2003701 (2013).
  • • CAS
    • مجلات
    • مقالة

تحميل مراجع

شكر وتقدير

نشكر الدكتور بترا Weissgerber وأعضاء منشأة هومبورغ SPF-الحيوانية لتوفير الحيوانات، هايدي LÖHR، يوت SOLTEK، ومصنع ساندرا لتقديم المساعدة التقنية للخبراء، والدكتور ستيفان فيليب لفرز الخلايا، مارتن سيمون توماس للفحص المجهري متحد البؤر، الدكتور ديتر برونز والدكتور رالف Mohrmann للحصول على الدعم في مجال الخلايا أليفة الكروم، أرمين ويبر وأندرياس هلفر لقياس الطيف الكتلي، والدكتور JW Deitmer الدكتور هولغر بيكر والدكتور بيتر Wollenberg للمناقشة مفيدة. بدعم من جمعية الألمانية للبحوث (SFB894 - AB، VF؛ GK1326 - AB، السل، TSS، VF)، وهومبورغ Forschungsförderungsprogramm HOMFOR (AB)، ودير Forschungskommission UNIVERSITAT قصر Saarlandes (AB، VF).

معلومات الكاتب

الانتماءات

• Experimentelle اوند Klinische Pharmakologie اوند Toxikologie، UNIVERSITAT قصر Saarlandes، 66421 هومبورغ، ألمانيا
  
  
  • توماس S. بيع
  • ، ثابت بلقاسمي
  • ، فيت Flockerzi
  • وأندرياس بيك

مساهمات

TSS المنجز وتحليل التجارب المشبك التصحيح. AB تصميم التجارب، قام وتحليلها مزيد من المشبك التصحيح وجميع تجارب التصوير، وكتب مخطوطة جنبا إلى جنب مع فعل VFTB الفرز وPCR من الخلايا الدبقية الماوس وساهم في تجارب التصوير الحموضة.

المؤلف المقابلة

مراسلات لاندرياس بيك.

تعليقات

عن طريق تقديم التعليق فإنك توافق على الالتزام من قبل لدينا شروط وتعليمات مجتمع. إذا كنت تجد شيئا المسيئة أو التي لا يتوافق مع شروطنا أو المبادئ التوجيهية إرضاء العلم أنها صورة غير ملائمة.

هذا العمل مرخص تحت رخصة المشاع الإبداعي الدولي غير التجارية NoDerivs 4.0. يتم تضمين الصور أو غيرها من المواد طرف ثالث في هذه المقالة في رخصة المقال الإبداعي، ما لم ينص على خلاف ذلك في خط الائتمان. إذا لم يتم تضمين المواد تحت رخصة المشاع الإبداعي، سوف يحتاج المستخدمون إلى الحصول على إذن من صاحب الترخيص من أجل إنتاج المواد. لعرض نسخة من هذا الترخيص، زيارة http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

 

[رافت ابراهيم]

 

http://synapse.koreamed.org/DOIx.php....2011.15.6.333

أسود الجينسنغ (BG) وقد استخدم على نطاق واسع العلاج بالاعشاب لتحسين وظيفة فسيولوجية. من أجل التحقيق في عمل الأعصاب من هذه الأدوية العشبية، درسنا تأثير BG على التعلم والذاكرة في الفئران باستخدام متاهة موريس المائية، ودرسنا آثار BG على النظام الكوليني المركزي والعصبي تركيب أكسيد النيتريك في الحصين من الفئران يعانون من ضعف الخلايا العصبية والمعرفية. بعد تطبيق المتوسطة انسداد الشريان الدماغي ل2H، كانت تدار الفئران BG (100 أو 400 mgkg -1، ص) يوميا لمدة 2 أسابيع، يليها التدريب وأداء اختبار متاهة موريس المائية. وأظهرت الفئران مع الشتائم الدماغية التعلم وضعف الذاكرة وعلى المهام. العلاج مع BG أنتجت تحسن في زمن الهروب للعثور على المنصة. وعلاوة على ذلك، أظهرت مجموعة BG لتقليل الخسائر مناعية الكوليني ونيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد الفوسفات ديافوراز (NADPH-د) الخلايا العصبية في الحصين -positive مقارنة بما كان عليه من مجموعة ISC. وأظهرت هذه النتائج أن BG له تأثير وقائي ضد الخلايا العصبية التي يسببها نقص التروية وضعف الادراك. نتائجنا تشير الى ان BG قد يكون من المفيد لعلاج الخرف الوعائي.

كلمات: أسود الجينسنغ (BG)، الكولين أسيتيل (الدردشة)، نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد الفوسفات ديافوراز (NADPH-د)، موريس متاهة مائية.

توجه إلى:
مقدمة
السكتة الدماغية الحادة هي واحدة من الأسباب الرئيسية للإعاقة الكبار والموت في العالم، وأنه يؤثر على ما يصل إلى 0.2٪ من السكان سنويا [1]. إصابة الخلية العصبية، بما في ذلك موت الخلايا المبرمج، هو الحدث الرئيسي في المراحل الحادة وشبه الحادة من نقص التروية الدماغية [2، 3]. على الرغم من أن الآلية الدقيقة لتدمير الجهاز العصبي في الدماغ الناجم عن نقص التروية الدماغية لم يتحدد بعد، وأشارت العديد من الدراسات أن الإجهاد التأكسدي، السيتوكينات الالتهابية والتحفيز الزائدة قد تلعب دورا في المسببات لهذا المرض [4، 5].
الجينسنغ (باناكس الجينسنغ CA ماير، Araliaceae) هو عشب الطبية التقليدية، ويعتبر أن تكون ادابتوغن أن يحسن وظيفة فسيولوجية [6، 7]. في آسيا هناك مجموعة متنوعة من منتجات نبات الجنسنغ التجارية، بما في ذلك الأبيض والأحمر والأسود الجينسنغ. ويتم إنتاج نبات الجنسنغ الأبيض نتيجة الجفاف من الشمس، في حين يتم إنتاج نبات الجنسنغ الحمراء بالبخار في 95 ~ 100 ℃ لمدة 2 ~ 3 ساعات. ويتم إنتاج الأسود الجينسنغ من الجنسنغ الحمراء بنسبة 9 دورات من العلاج البخار، وعند هذه النقطة يصبح أسود اللون [8، 9]. أنشطة الدوائية والبيولوجية للنبات الجنسنغ المصنعة البخار هي أكبر من ذلك من الجينسنغ غير البخار. أثناء عملية تبخير، فإن نسبة من المكونات الرئيسية، بما في ذلك ginsenosides، سابونين، الفينول والبروتينات، ويتم تبديل كمكونات نشطة المنتجة حديثا [10، 11]. وقد اقترح أن الجينسنغ على البخار لديه الطيف أكبر من التأثيرات الدوائية من أن الجنسنغ الأبيض [12 - 14]، بما في ذلك المضادة للالتهابات، ومكافحة السرطان، ومكافحة الإجهاد والآثار المضادة للأكسدة في البشر والحيوانات [8، 14 - 16]. أغنية وآخرون. والشمس وآخرون، ذكرت أن بيانات التحليل HPLC من BG [9، 17]. ومع ذلك، فقد تم نشر بعض الصحف على BG منتجات فعالية.
وقد أجريت هذه الدراسة لتقييم تأثير اعصاب من BG على التعلم والذاكرة العجز الناجم عن نقص التروية في الفئران وتوضيح الكوليني والعصبية آلية تخليق أكسيد النتريك الكامنة وراء هذه التأثيرات الواقية في الفئران.

توجه إلى:
طرق

الحيوانات
تم شراؤها ذكور فئران سبراج داولي الترجيح 250 ~ 280 غرام من كل من Samtaco كورب الحيوان (Kyungki القيام، كوريا). سمح الحيوانات للتأقلم نفسها لمدة 7 أيام على الأقل قبل التجريب. وتم إيواء الحيوانات في أقفاص فردية تحت ظروف ضوئية (12/12-ساعة ضوء / دورة الظلام) وعند درجة حرارة الغرفة 23 ℃. كان الطعام والماء بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية المتاحة. وتمت الموافقة على جميع التجارب من قبل لجنة رعاية الحيوان واستخدام جامعة كيونغ هي المؤسسي. سمح الفئران على الأقل 1week على التكيف مع بيئتهم قبل التجارب.

إعداد الجينسنغ الأسود (BG)
تم شراء كل 6 سنوات الكورية البيضاء والحمراء جذور الجنسنغ (P. الجينسنغ CA ماير) من أكبر سوق الجينسنغ الكورية من جيومسان الدولة (مقاطعة تشونغ تشيونغ، كوريا الجنوبية). تم تصنيعها BG بالبخار مرارا WG في 98 ℃ لمدة 3 ساعات في جهاز الفخار والتجفيف في 60 ℃ لمدة 15 ساعة. كانت مغمورة العينات BG المجففة (40 غ) في 200 مل من درهم 2 O، وأضاف 2 L من 80٪ من الإيثانول ثم مختلطة 500 مل من درهم 2 O. لاستخراج، تم استخدام إثيل الأثير ثلاث مرات.

الشريان الدماغي الأوسط انسداد نموذج
وكان المستحث نقص التروية الدماغية البؤري باستخدام تقنية خيوط داخل اللمعة. كانت تدار التخدير مع 3٪ الأيزوفلورين في 30٪ O 2/70٪ N 2 O، وحافظت عليه طوال العملية مع 0.5 ~ 0.6٪ الأيزوفلورين تسليمها عن طريق قناع الأنف. تعرضت الحق في الشريان السباتي المشترك من خلال شق عنق الرحم خط الوسط. وقد تم إدخال خيوط داخل اللمعة heparinized (φ0.28 ملم، رأس مستدير) عن طريق الشريان السباتي الخارجي. تم رصد درجة حرارة الجسم والحفاظ عليها في 37 ℃ باستخدام وسادة التدفئة (وحدة تحكم بطانية هارفارد Homeothermic، 50-7061). بعد 120 دقيقة من انسداد، تم سحب خيوط بلطف وتم إغلاق الشريان السباتي الخارجي بشكل دائم عن طريق الكي. في الفئران الشام التي تديرها، تعرضت الحق في الشريان السباتي المشترك وفتح الشريان السباتي الخارجي دون إدخال خيوط في الشريان السباتي الداخلي. بعد العملية، تم السماح للحيوانات لتستيقظ في الحاضنة (30 ℃) وكانوا ثم انتقل إلى أقفاص وطنهم. تم تقسيم الفئران إلى أربع مجموعات. واعتبرت المجموعة التجريبية مع BG100 [100 mgkg -1، ص، مجموعة BG100 + ISCH (ن = 6)] وBG400 [400 mgkg -1، ص، مجموعة BG400 + ISCH (ن = 6)] لمدة 2 أسابيع بعد تحريض نقص التروية. واعتبرت المجموعة الضابطة بمحلول ملحي [0.1 ملغ كغم -1، ص، مجموعة SAL + ISCH (ن = 6)] لمدة 2 أسابيع بعد تحريض نقص التروية. كانت تدار الجينسنغ الأسود والمالحة شفويا كل يوم في الصباح. الفئة العادية ساذجة (عادي، ن = 6) كما لم تتعامل مع أي دواء والتشغيل. وأجريت الاختبارات متاهة مائية في الماضي (الثاني) الاسبوع.

موريس اختبار متاهة مائية
وكانت السباحة من متاهة موريس المائية خزان مياه دائري 200 سم وقطرها 35 سم عميقة. وقد شغل ذلك إلى عمق 21 سم مع الماء في 23 ± 2 ℃. وضعت منصة 15 سم وقطرها 20 سم في الطول داخل الخزان مع سطحه العلوي يجري 1.5 سم تحت سطح الماء. كان محاطا بركة من قبل العديد من الاشارات التي كانت خارجة عن متاهة [18]. وقد تم تجهيز كاميرا CCD مع جهاز كمبيوتر شخصي لتحليل السلوك. وكان في استقبال كل فأر أربع محاكمات اليومية. لمدة 6 أيام متتالية، تم اختبار الفئران مع ثلاثة اختبارات الاستحواذ. لاختبار الاستحواذ، وسمح الفئران للبحث عن منصة خفية ل180 ق والكمون للهروب على تم تسجيلها المنصة. تم تدريب الحيوانات للعثور على المنصة التي كان في موقف ثابت خلال 6 أيام لاختبار الاستحواذ. كان الوقت الفاصل بين المحاكمة 1 دقيقة. تم تقييم أداء حيوانات التجارب في كل محاكمة متاهة المياه من خلال جهاز كمبيوتر شخصي لتحليل السلوكي (برنامج S-مارت، إسبانيا).

الكريزيل البنفسجي تلطيخ
لفترة وجيزة، تم تخدير الفئران (بنتوباربيتال الصوديوم، و 100 ملغ / كغ، والملكية الفكرية)، وكانوا perfused transcardially مع heparinized المالحة الفوسفات مخزنة (PBS، ودرجة الحموضة 7.4) لمدة 30 ثانية وأعقب ذلك بنسبة 4٪ لامتصاص العرق في 0.1 M العازلة الفوسفات (الرقم الهيدروجيني 7.4) لمدة 10 ~ 15 دقيقة. تم postfixed العقول في نفس تثبيتي بين عشية وضحاها، cryoprotected في 30٪ محلول السكروز في برنامج تلفزيوني، جزءا لا يتجزأ من ومقطوع متسلسل على ناظم البرد (لايكا، ألمانيا) في سمك 30μm في الطائرة الاكليلية وبعد ذلك جمعت في برنامج تلفزيوني. والمجففة مجموعة واحدة من المقاطع التي تمثل مناطق مختلفة من القشرة، ممهى وملطخة الكريزيل البنفسجي (ICN Biomedicals، أورورا، الولايات المتحدة الأمريكية) لتقييم فقدان الخلية ومورفولوجية منطقة قرن آمون.

NADPH-د تلطيخ
كانت ملطخة أقسام النشاط NADPH-د كما هو موضح سابقا [19، 20]. وباختصار، حضنت المقاطع التعويم الحر في 37 ℃ لمدة 30 دقيقة في 0.05 M PBS تحتوي على 0.3٪ تريتون X-100، 0.1 ملغ / مل تترازوليوم نتروبلو (سيغما، MO، الولايات المتحدة الأمريكية) و 0.1 ملغ / مل β-NADPH (سيغما ). تم غسلها الأقسام ثلاث مرات مع 0.05 M PBS وبعد ذلك تم شنت على الشرائح المغلفة الجيلاتين. وكانت الشرائح بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة المجفف في الهواء، تشطف مرتين بالماء المقطر وتجفف مرة أخرى. وقد شنت Coverslips باستخدام محلول permount. حللت أقسام الدماغ باستخدام أطلس التي كتبها Paxinos واتسون. تم تقييم شدة تلطيخ الأقسام التي تلطخ وجه التحديد لNADPH-د كميا وفقا لطريقة microdensitometrical على أساس الكثافة البصرية وباستخدام تحليل صورة (Multiscan، فولرتون، CA، الولايات المتحدة الأمريكية) [21].

المناعية الدردشة
تم استخدام الأجسام المضادة الأولية ضد مستضد معين التالية: ترانسفيراز cholineacetyl (الأغنام بولكلونل دردشة، تركيز 1: 2000، كامبردج الكيميائية الحيوية البحوث، ويلمنجتون، DE). تم إعداد الأجسام المضادة الأولية في التخفيف من 0.3٪ PBST، 2٪ حجب المصل و 0.001٪ limpit kehole هيموسيانين (سيغما، الولايات المتحدة الأمريكية). حضنت المقاطع في مصل الأساسي لمدة 72 ساعة عند 4 ℃. بعد ثلاثة يشطف أكثر في PBST، وضعت المقاطع في Vectastain النخبة ABC كاشف (مختبرات المتجهات، بورلنجام، كاليفورنيا) لمدة 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة. بعد الشطف المزيد في برنامج تلفزيوني، وقد وضعت الأنسجة باستخدام diaminobenzadine (سيغما، الولايات المتحدة الأمريكية) باعتبارها مولد اللون. تم القبض على الصور باستخدام نظام التصوير DP2-BSW (أوليمبوس، CA، الولايات المتحدة الأمريكية) والتي تم معالجتها إحصائيا باستخدام أدوبي فوتوشوب. لقياس الخلايا التي كانت مناعيا للدردشة، وضعت شبكة على المناطق CA1 CA3 وللقرن آمون وفقا لطريقة Paxinos وآخرون. [21]. وقد أحصى عدد الخلايا في 100 × التكبير باستخدام شبكة المجهر مستطيل قياس 200 × 200 مم 2. احصي الخلايا في ثلاثة أقسام لكل فأر داخل المناطق CA1 CA3 وقرن آمون.

التحليل الاحصائي
وقد أجريت المقارنات الإحصائية للدراسات سلوكية والنسيجية باستخدام باتجاه واحد ANOVA وتكرار تدابير ANOVA، على التوالي، وجرى توكي اللاحق. يتم عرض جميع نتائج كوسيلة ± SEM، وكنا SPSS 15.0 ويندوز لتحليل الإحصاءات. تم تعيين مستوى أهمية في ص <0.05.

توجه إلى:
النتائج
تأثير BG على الأداء في متاهة مائية اختبار تأثير BG (100 أو 400 ملغ / كلغ) على التعلم المكاني وتقييمها في اختبار متاهة موريس المائية. كما هو مبين في الشكل. 1، وكان وقتا أطول بسبب ضعف الذاكرة من أن المجموعة العادية خلال جميع جلسات المحاكمة [ص <0.05] الكمون هروب مجموعة SAL + ISCH. وتشير البيانات إلى أن متوسط ​​الإختفاء مجموعة للوصول إلى منصة مخبأة في MWM لجميع الفئات لمدة 4 أيام. اختلف الكمون الهروب بين المجموعات عندما بلغ متوسط ​​النتائج على جميع الدورات. أظهرت مجموعة SAL + ISCH أداء أسوأ مما فعل المجموعة العادية (في اليوم الثاني 2 (p = 0.004)، 3 اليوم الثالث (ع = 0.022) وال 4 يوم (ع = 0.05)). ومع ذلك، كان العلاج BG أي تأثير التفاعل كبير على المسافة المقطوعة للوصول إلى منصة من يوم 6 تشرين.

تين. 1
الكمون للهروب على منصة المخفية خلال متاهة موريس المائية. تم تنفيذ المهمة مع 3 محاكمات يوميا خلال 6 أيام لاختبار الاستحواذ. وتعرض القيم كما يعني ± SEM * P <0.05 مقابل مجموعة و# ف عادي <0.05، ## ص <0.01 مقابل مجموعة SAL + ISCH.
انقر لتكبير الصورة

الكريزيل البنفسجي الخلايا العصبية الإيجابية للالحصين
نتائج التقييم من الخلايا العصبية الإيجابية الكريزيل البنفسجي في القسم، من تشكيلات مختلفة الحصين، وتظهر في الشكل. 2. وتوضح المقارنة ما بعد خاصة أن النشاط البنفسجي الكريزيل في حصين مجموعة SAL + ISCH كان أقل بكثير من الفئة العادية (P <0.05). على وجه الخصوص، كانت هناك اختلافات كبيرة في كل من CA1 (F = 3،37 17،2، ص = 0.001) وCA3 (F = 3،37 10،6، ص = 0.001) المناطق. ومع ذلك، كان عدد الخلايا العصبية الإيجابية الكريزيل البنفسجي في المجموعة BG100 + ISCH أعلى من المجموعة SAL + ISCH، وخاصة في CA1 (ع = 0.001) وCA3 (ع = 0.001) المناطق. ومع ذلك، كان عدد الخلايا العصبية الإيجابية الكريزيل البنفسجي في حصين مجموعة BG100 + ISCH لا تختلف كثيرا مقارنة بما كان عليه من مجموعة SAL + ISCH، ولكن كان هناك اتجاه طفيف للحصول على تأثير التفاعل كبير على التعبير عن البنفسجي الكريزيل الخلايا العصبية الإيجابية في قرن آمون. وجدنا أيضا أن تلف الأنسجة من القشرة وانخفضت بشكل ملحوظ في مجموعة BG تعامل مقارنة بما كان عليه من مجموعة SAL + ISCH.

تين. 2
(A) عدد الكريزيل البنفسجي الخلايا العصبية الملون في مختلف الحصين CA1، CA3 والمناطق DG المجموعات التجريبية. تمثل كل قيمة المتوسط ​​± SEM *** P <0.001 مقابل مجموعة طبيعية و## ص <0.01 مقابل مجموعة SAL + ISCH. (B) صور تبين توزيع الكريزيل البنفسجي الخلايا العصبية الملون في حصين عادي (A)، SAL + ISCH (B)، BG100 + ISCH (C) وBG400 + ISCH (D). قطعت أقسام coronally في 30μm ويمثل الشريط على نطاق و200μm.
انقر لتكبير الصورة

الخلايا العصبية الإيجابية NADPH د من الحصين
نتائج التقييم من NADPH-د إيجابية الخلايا العصبية في القسم، من تشكيلات مختلفة الحصين، وتظهر في الشكل. 3. وتوضح المقارنة ما بعد خاصة أن عدد NADPH-د إيجابية الخلايا العصبية في الحصين من مجموعة SAL + ISCH كانت أقل بشكل ملحوظ من أن المجموعة الطبيعية (P <0.001). على وجه الخصوص، كانت هناك اختلافات كبيرة في كل من منطقة CA3 (F = 3،19 13،6، ص = 0.001) والتلفيف المسنن (F = 3،19 7،1، ص = 0.003). ومع ذلك، كان عدد من NADPH-د إيجابية الخلايا العصبية في مجموعة BG100 + ISCH أعلى من المجموعة SAL + ISCH، سواء في مجال CA3 (ع = 0.001) وDG (ع = 0.001).

تين. 3
(A) عدد أسيتيل كولين (الدردشة) نوى immunostained في المناطق CA1 CA3 وقرن آمون مختلفة من المجموعات التجريبية. تمثل كل قيمة المتوسط ​​± SEM * P <0.05 مقابل مجموعة طبيعية و# ف <0.05 مقابل مجموعة SAL + ISCH. (B) صور تبين توزيع الخلايا دردشة مناعيا في حصين عادي (A)، SAL + ISCH (B) وBG100 + ISCH (C). قطعت أقسام coronally في 30μm ويمثل الشريط على نطاق و200μm.
انقر لتكبير الصورة

دردشة الخلايا العصبية مناعيا من الحصين
نتائج تقييم دردشة خلايا مناعيا في القسم، من تشكيلات مختلفة الحصين، وتظهر في الشكل. 4. وتوضح المقارنة ما بعد خاصة أن النشاط دردشة في حصين مجموعة SAL + ISCH كان أقل بكثير من الفئة العادية (P <0.05). على وجه الخصوص، كانت هناك اختلافات كبيرة في كل من CA1 (F = 3،16 4،9، ص = 0.02) وCA3 (F = 3،16 9،3، ص = 0.001) المناطق. ومع ذلك، تعامل التفاعل دردشة في BG كانت جماعات أعلى من المجموعة SAL + ISCH، وخاصة في منطقة CA3 (BG 100، ص = 0.05؛ BG 400، ص = 0.014). ومع ذلك، أظهر التفاعل دردشة في المنطقة CA1 الحصين عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات.

تين. 4
(A) عدد الخلايا العصبية الإيجابية NADPH التطوير في المناطق CA1 CA3 وقرن آمون مختلفة من المجموعات التجريبية. تمثل كل قيمة المتوسط ​​± SEM * P <0.05 *** P <0.001 مقابل مجموعة طبيعية و# ف <0.05، ## ص <0.01 مقابل مجموعة SAL + ISCH. (B) صور تبين توزيع الخلايا العصبية الإيجابية NADPH د في قرن آمون من SHAM (A)، SAL + ISCH (B)، BG100 + ISCH (C). قطعت أقسام coronally في 30μm ويمثل الشريط على نطاق و200μm.
انقر لتكبير الصورة

توجه إلى:
نقاش
في هذه الدراسة، ونحن التحقيق ما إذا كان العلاج مع BG يمكن تحسين ضعف الذاكرة ويؤثر على خلايا كوليني في الحصين من الفئران عجز الذاكرة الناجم عن نقص التروية. وأظهرت النتائج أن BG تحسينها التدابير العجز الناجم عن الإجهاد من الذاكرة على MWM، والتعامل مع BG الفئران عرض عدد أكبر من الخلايا العصبية الإيجابية كوليني في CA1 الحصين والمناطق CA3 من الفئران.
ومن المعروف مدى تلف في الدماغ التي تنتجها MCAO أن تعتمد على درجة الإهانة الدماغية ومدته. واحدة من أهم العوامل الحاسمة هي الفترة من الانسداد. واقتصرت الأضرار الناتجة عن إصابة خفيفة (30 دقيقة من MCAO) إلى المخطط أو قشرة، في حين أن أكثر من 2 ساعة التعرض للMCAO أدى إلى أضرار في المخطط، القشرة والمناطق النائية، بما في ذلك الحصين [22]. في هذه الدراسة، وراسخة في متاهة موريس المائية نموذج لتقييم العجز في الذاكرة التي تعتمد على الحصين، واستخدمت مهمة التعلم المكاني MWM للتحقق من صحة نماذج القوارض لاضطرابات عصبي وتقييم العلاجات العصبي الممكنة [18 ، +23 - 27]. في هذه الدراسة، تميل الذاكرة المكانية إلى تحسين في مجموعة BG400 خلال اليوم التدريبي (يوم 6)، ولكن ليس في المجموعة BG100. أظهرت بيانات من اختبار الذاكرة التي BG يحمي الحيوانات من الانخفاض الناجم عن نقص التروية من التعلم المكاني والذاكرة.
تم فحص آثار اعصاب من هذه الأدوية الطبيعية على النظام أستيل المركزي أيضا الكيمياء النسيجية من الخلايا العصبية قرن آمون. ويعتقد أن انحطاط تعصيب الكوليني من الدماغ الأمامي القاعدية إلى تشكيل الحصين في الفص الصدغي ليكون واحدا من العوامل المحددة لتطور تسوس الذاكرة، سواء أثناء الشيخوخة الطبيعية وAD [28]. أفضل علامة المتاحة للخلايا العصبية كوليني في الدماغ الأمامي القاعدية هي النشاط دردشة. دردشة يجمع أستيل العصبي في الدماغ الأمامي القاعدية والقشرة، الحصين واللوزة. تم الإبلاغ عن انخفاض كبير في النشاط دردشة في أدمغة بعد الوفاة من المرضى الجنونية. بالإضافة إلى ذلك، كان هناك انخفاض 20 ~ 50٪ في النشاط دردشة في قرن آمون من الفئران عجز الذاكرة. ومع ذلك، فقد بينت النتائج الحالية التي BG تمارس تأثيرات مفيدة على النقل العصبي الكوليني في الدماغ عن طريق زيادة الأنشطة CA3 دردشة الحصين. ومع ذلك، أظهرت نتائجنا أن مستويات وجع في قرن آمون كانت لا تختلف كثيرا بين جميع الفئات.
قد يرجع آليات بوساطة NO-دورا في نضح القشرية [29]، والتعلم والذاكرة [30]، وكذلك في اللدونة العصبية [31، 32]. كما تم المرتبطة خلل في نقل الكوليني القشرة المخية الحديثة وقرن آمون مع انخفاض القشرية تدفق الدم في الدماغ والتعلم والذاكرة وضعف [33 - +35]، مما يشير إلى اقتران النظام الدماغ الأمامي الكوليني القاعدية. وقد تميزت NADPH-ديافوراز (NADPH-د) كيميائيا وimmunochemically كما أكسيد النيتريك سينسيز [36 - 38]. فابر Zuschratter وآخرون. [39] يتضح من الدراسات التركيبية أن النشاط النسيجية-NADPH د يقع في كل من الأغشية قبل وبعد المشبكي بعد التقوية على المدى الطويل (LTP). هذه الآليات ويبدو أن تعتمد على أكسيد النيتريك (NO) في المخطط، المخيخ والحصين [+40 - +45]. أيضا، شين وآخرون. [46] ذكرت ان NO المانع التوليف يسببها ضعف التعلم والذاكرة. أيضا، هناك انخفاض معين من NOS التي تحتوي على الخلايا العصبية في CA1 الفرعية الحصين وCA3 ن شكل الدماغ مرض الزهايمر المرضى [47]. بالاتفاق مع الدراسة السابقة، وجدنا أعداد متزايدة كبيرة من الخلايا العصبية الإيجابية NADPH د في المناطق CA1 CA3 والحصين والتلفيف المسنن من BG تعامل المجموعات.
وباختصار، والمعاملة مع BG قلصت كان التعلم والذاكرة العجز الناجم عن نقص التروية في متاهة موريس المائية والعلاج مع BG تأثير وقائي ضد عدد الناجم عن نقص التروية انخفضت من الخلايا العصبية كوليني. أيضا، والمعاملة مع BG زادت NO التوليف في قرن آمون. BG هو مرشح جيد لمزيد من التحقيقات التي قد تؤدي في نهاية المطاف في الاستخدام السريري لها. وإجراء مزيد من البحوث التي من شأنها أن فحص آثار تفعيل BG على المهام السلوكية إضافية تساعد في توضيح ما إذا كانت زيادة عدد الخلايا العصبية كوليني والتوليف أكسيد النيتريك يمكن أيضا تسهيل أنواع أخرى من الذاكرة.

 

[رافت ابراهيم]

 

المقالة الأصلية

Neuropsychopharmacology (2006) 31، 1714-1721. دوى: 10.1038 / sj.npp.1300945. نشرت على الانترنت 26 أكتوبر 2005

البحوث قبل السريرية

تأثير الجينسنغ الصابونين بشأن تعزيز الدوبامين ناقل الحركة والنشاط الزائد الحركي المستحثة بواسطة النيكوتين

http://www.nature.com/npp/journal/v3.../1300945a.html


ملخص

وقد أظهرت العديد من الدراسات أن فرط النشاط السلوكي الناجم عن المنشطات الحركية ومنعها عن طريق السابونين الجينسنغ. في محاولة لتحقيق ما إذا كان تأثير السابونين الجينسنغ هو من خلال العمل المثبطة على المعززة نقل الدوبامين التي المنشطات الحركية، درسنا آثار الجينسنغ مجموع سابونين (GTS) presynaptically على يسببها النيكوتين الدوبامين (DA) الافراج في المخطط من الانتقال بحرية الفئران باستخدام تقنية microdialysis في الجسم الحي وpostsynaptically على في المختبر والمجراة ملزمة لل[3 H] raclopride إلى DA D 2 مستقبلات. أيضا، درسنا آثار GTS على يسببها النيكوتين الحركي وفرط النشاط وعلى يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في النواة المتكئة والمخطط. أدت المعالجة الشاملة مع GTS (100 و 400 ملغم / كغم، البريتونى (الملكية الفكرية)) في تثبيط التي تعتمد على جرعة من فرط النشاط الحركي الناجم عن النيكوتين. انخفضت GTS التي يسببها النيكوتين الإفراج DA في المخطط بطريقة تعتمد على الجرعة. ومع ذلك، كان GTS أي آثار على يستريح مستويات النشاط الحركي وDA خارج الخلية في الجسم المخطط. مستعمل GTS في المختبر ملزمة من [3 H] raclopride على الفئران أغشية الجسم المخطط مع IC 50 5.14 1.09 جرعات M. العليا GTS (400 و 800 ملغ / كغ، والملكية الفكرية) أدى إلى انخفاض في المجراة ملزمة لل[3 H] raclopride في المخطط. انخفضت GTS التي يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في النواة المتكئة والمخطط، الأمر الذي يعكس عن طريق تثبيط GTS من تعزيز يسببها النيكوتين انتقال الدوبامين. نتائج هذه الدراسة تشير إلى أن GTS يعمل ليس فقط على الخلايا العصبية الدوبامين مباشرة أو غير مباشرة لمنع يسببها النيكوتين الإفراج DA لكن أيضا postsynaptically ملزمة لDA D 2 مستقبلات. ولعل هذا يفسر تأثير حجب GTS على تفعيل السلوكية الناجمة عن النيكوتين وتصور من قبل psychostimulants أخرى. البيانات المتوفرة لدينا تثير احتمال أن GTS، في تهدئة تعزيز يسببها النيكوتين انتقال الدوبامين، قد يثبت أنه عامل علاجي مفيد لإدمان النيكوتين وتستدعي مزيدا من التحقيق في تأثيرها على الممتلكات مجزية للنيكوتين.
الكلمات الدالة:

مجموع سابونين الجينسنغ، النيكوتين، وإطلاق سراح الدوبامين، الدوبامين D 2 مستقبلات البروتين فوس، النشاط الحركي

أعلى الصفحة مقدمة

تشير الدلائل إلى أن النيكوتين، المركب neuroactive التبغ، له الكيميائية العصبية شيوعا وكذلك الخصائص السلوكية مع عقاقير أخرى تسبب الادمان مثل الكوكايين والأمفيتامين (هينينغفيلد وHeishman، 1995؛ Pontieri وآخرون، 1996). تم توثيقه جيدا أن النيكوتين يحفز الدوبامين (DA) الافراج في النواة المتكئة والمخطط (Imperato وآخرون، 1986؛ Damsma وآخرون، 1989؛ توث وآخرون، 1992؛ Benwell وبلفور، 1994؛ Nisell وآخرون، 1994a؛ Pontieri وآخرون، 1996؛ ميرزا ​​وآخرون، 1996؛ مارشال وآخرون، 1997). وقد ترتبط هذه الخاصية خصائص الادمان والسلوكية من النيكوتين (Benwell وبلفور، 1992؛ Corrigall وآخرون، 1992؛ دي كيارا وImperato، 1988).
الجينسنغ، جذر الجينسنغ باناكس CA ماير، وقد استخدم على نطاق واسع الأدوية العشبية في جميع أنحاء العالم. وذكرت العديد من المحققين الخصائص الدوائية وسابونين الكيميائية ويبدو أن المسؤولين عن معظم التأثيرات الدوائية من الجينسنغ. وقد اقترحت الدراسات السلوكية التي السابونين الجينسنغ أو ginsenosides قد تعمل على نظام الدوبامين المركزي. وكانت المعالجة مع السابونين الجينسنغ أو استخراج الجينسنغ قادرة على منع تطوير التوعية السلوكية الناجمة عن الكوكايين (كيم وآخرون، 1995a)، الميثامفيتامين (توكوياما وآخرون، 1992)، والمورفين (كيم وآخرون، 1995b). وقد أغضب تفضيل مكان مشروطة الناجمة عن هذه الأدوية أيضا السابونين الجينسنغ (كيم وآخرون، 1996a، 1996b). أيضا، فقد تبين أن السابونين الجينسنغ تمنع التي يسببها النيكوتين hyperlocomotion والتوعية السلوكية، وتفضيل مكان مشروطة (كيم وكيم، 1999). ومع ذلك، ليست مفهومة جيدا الآليات العصبية الكيميائية الكامنة وراء الآثار السلوكية للالسابونين الجينسنغ.
وتشير الأدلة المتقاربة أن تعاطي المخدرات تمارس محفزة الحركي وآثارها مجزية من خلال زيادة نقل الدوبامين. ولذلك، يبدو من الممكن أن الآثار السلوكية للالسابونين الجينسنغ تعكس حصارهم لتعزيز نقل الدوبامين من قبل تلك العقاقير. في محاولة لفحص هذه الفرضية، ونحن التحقيق ما يلي: (1) تأثير نبات الجنسنغ مجموع سابونين (GTS) على يسببها النيكوتين الحركي وفرط النشاط. (2) تأثير GTS presynaptically على يسببها النيكوتين الإفراج DA في المخطط الانتقال الفئران باستخدام تقنية microdialysis في الجسم الحي بحرية. (3) تأثير GTS postsynaptically على في المختبر والمجراة ملزمة لل[3 H] raclopride إلى DA D 2 مستقبلات؛ و (4) تأثير على GTS التي يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في النواة المتكئة والمخطط.

أعلى الصفحة المواد والأساليب

الحيوانات

ذكور فئران سبراج داولي، ويزن 280-320 جرام، واستخدمت في الجسم الحي microdialysis، ملزمة السلوكي، في المختبر مستقبلات، ودراسات المناعى. واستخدمت الذكور ICR الفئران (25-30 جم) للدراسات ملزمة في الجسم الحي. كانت هذه الحيوانات في ضوئية، temperature-، والرطوبة التي تسيطر عليها أرباع الحيوانات بالمواد الغذائية والمياه المتاحة بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية يضم مجموعة. وكانت جميع الإجراءات التي تنطوي على استخدام الحيواني بما يتفق بدقة مع دليل المعاهد الوطنية للصحة للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية وتمت الموافقة من قبل لجنة مستشفى جامعة رعاية الحيوان واستخدام سيول الوطنية.

الأدوية والكيماويات

(-) - تم شراؤها النيكوتين طرطرات الهيدروجين من شركة سيغما الكيميائية (سانت لويس، MO). كان GTS هدية من معهد أبحاث التبغ (دايجون، كوريا) كوريا الجينسنغ و. GTS (خليط سابونين يتميز تحتوي على الكمية تسعة جليكوسيدات الرئيسية المعروفة باسم ginsenosides (الروبيديوم 1 20.14٪، الروبيديوم 2 10.19٪، والصليب الأحمر 11.34٪، طريق 4.63٪، إعادة 12.27٪، RF 3.01٪، Rg و1 16.44٪، Rg و2 2.01٪ ، والنمو الحقيقي 3 2.64٪) وginsenosides أخرى ثانوية ومكونات (17.33٪)، وفقا لطريقة HPLC من كو وآخرون (1992)، P. من الجينسنغ) تم استخراج وتنقية باستخدام أسلوب أندو وآخرون (1971) . تم شراؤها [3 H] raclopride (79.3 تسى / ملمول) من نيو انجلاند النووية (بوسطن، MA).

عملية جراحية وإجراءات Microdialysis

تم تخدير الفئران مع بنتوباربيتال الصوديوم (50 ملغ / كغ، البريتونى (الملكية الفكرية)). باستخدام تقنيات العقيم، قنية دليل (CMA / 12، CMA Microdialysis، سولنا، السويد) التي تهدف إلى إنهاء في المخطط الظهري (ا ف ب 1.0 L 3.2 من bregma؛ H 3.0 من الجافية) (Paxinos واتسون، 1986) تم زرعها stereotaxically وتعلق على الجمجمة باستخدام مسامير الجمجمة والاسمنت الأسنان. ثم تم إغلاق قنية مع ضيقة مصراع الفولاذ المقاوم للصدأ. تم إجراء microdialysis في تحريك الفئران بحرية. بعد الانتعاش لمدة 3 أيام، تم إدراج 4 مم microdialysis التحقيق (CMA / 12، CMA Microdialysis) متصلة عبر قطب السائل المزدوج إلى ضخ حقنة في قنية دليل ومع perfused في السائل النخاعي الاصطناعي (145 ملي كلوريد الصوديوم، و 2.7 ملي بوكل 1.2 ملي CaCl 2، 1.0 ملي MgCl 2، 2.0 ملي نا 2 هبو 4، ودرجة الحموضة 7.4) بمعدل ثابت 1.5 لتر / دقيقة. تم جمع عينات ديالة خلال 20 دقيقة فترات أخذ العينات عن طريق منفذ أنابيب متصلة جامع microfraction (CMA Microdialysis). تم التحقق من موقف تحقيقات عن طريق الفحص النسيجي في نهاية التجارب.

إجراءات تحليلية

حجم ديالة (حقن 30 وكان يعاير ل) لDA باستخدام HPLC بالإضافة إلى نظام الكشف الكهروكيميائية ESA Coulochem II 5200A مع إمكانية أكسدة +320 بالسيارات. وقد تم تجهيز كاشف مع عالية الأداء التحليلي الخلية (نموذج ESA 5014)، والتي يتم تفصيلها لاستخدامها في تطبيقات microdialysis. ويتكون الطور المتحرك من 75 ملي أحادي فوسفات الصوديوم، 0.1 ملي EDTA، 1.4 ملي حمض octanesulfonic و 10٪ الأسيتونتريل، وتعديلها لدرجة الحموضة 3.2 مع حامض الفوسفوريك الصف HPLC. تم إجراء فصل نواتج مونوامين على عمود مياه نوفا-باك C-18 (4 م، 150 3.9 ملم). وكان معدل تدفق النظام 1.0 مل / دقيقة. وأعرب عن DA في dialysates كنسبة مئوية من ثلاث عينات أساسية جمعها فورا قبل العلاج النيكوتين.

العلاجات المخدرات

تم حله النيكوتين في السائل النخاعي الاصطناعي لتركيز 10 ملم (التعبير عن قاعدة حرة) وغرست لمدة 60 دقيقة محليا في المخطط من خلال التحقيق غسيل الكلى. GTS (100 و 400 ملغ / كغ، الذائبة في المياه المالحة) تم حقن الملكية الفكرية 60 دقيقة قبل كانت تدار النيكوتين.

قياس النشاط الحركي

تم تقييم تأثير GTS على يسببها النيكوتين فرط النشاط السلوكي في الفئران عن طريق قياس النشاط الحركي باستخدام stabilimeter ربطه إلى نظام الكمبيوتر الشخصي. وstabilimeter، حيث يتم استخدام مكبر الصوت على حد سواء كما منصة ومحول، شيد على أساس تصميم وصفها بارينو وآخرون (1985). في الدراسات الأولية لدينا، وفرت هذه المعدات لاستنساخ جيدة وحساسية عالية لقياس النشاط الحركي من الحيوانات الصغيرة. وضعت كل حيوان على stabilimeter وبعد فترة التعود من 60 دقيقة تليها قياس النشاط الأساسي لمدة 60 دقيقة، وغرست النيكوتين (10 ملم) لمدة 60 دقيقة محليا في المخطط من خلال التحقيق غسيل الكلى. زرعت الحيوانات السيطرة مع لجنة التحقيق غسيل الكلى وغرست مع السائل النخاعي الاصطناعي. وقد تم قياس النشاط الحركي خلال 20 دقيقة فترات ليصبح المجموع 180 دقيقة بعد إدارة النيكوتين. GTS (100 و 400 ملغم / كغم) تم حقن الملكية الفكرية 60 دقيقة قبل النيكوتين.

في تجارب المختبر تثبيط

وكان التحقيق عن طريق تثبيط النظام العالمي للاتصالات في المختبر ملزمة من [3 H] raclopride إلى الجسم المخطط DA D 2 مستقبلات. وقد قتل الفئران عن طريق قطع الرأس السريع. ومخططية تم تشريح بسرعة، مجمدة على كتلة من الثلج الجاف، وتخزينها في -70 درجة مئوية لحين الحاجة إليها. وقد أجريت الربط من [3 H] raclopride على الفئران أغشية الجسم المخطط كما وصفها Lidow وآخرون (1989). باختصار، كانت المتجانس الأنسجة في المثلج 50 ملي تريس حمض الهيدروكلوريك العازلة (7.4 درجة الحموضة) وطرد في 45 ز 000 لمدة 10 دقيقة. وكان بيليه معلق الناتجة في 20 مجلدا من العازلة، recentrifuged، ومعلق على 10 ملغ من الوزن الرطب / مل من العازلة الحضانة (50 ملي تريس حمض الهيدروكلوريك العازلة (7.4 درجة الحموضة) التي تحتوي على 120 ملي كلوريد الصوديوم، 5 مم بوكل، 2 مم CaCl 2، و 1 ملي MgCl 2). وأجريت فحوصات تثبيط [3 H] raclopride باستخدام تركيز ثابت من [3 H] raclopride (4.3 نانومتر) وزيادة تركيزات GTS (10:00 إلى 10 ملم). أجريت حضانات في الحجم النهائي من 250 لتر لمدة 30 دقيقة في 20-22 درجة مئوية. تم إنهاء الحضانة عن طريق الترشيح السريع من خلال هتما GF مرشحات / B غارقة في السابق 0.05٪ polyethylenimine باستخدام متعددة براندل MP-48LT تصفية (غايثرسبيرغ، MD). وقد تم قياس النشاط الإشعاعي المحاصرين في المرشحات في التلألؤ مكافحة السائلة (ثلاثي كارب 2500 TR، باكارد شركة الصك، ميريديان، CT) بعد إضافة 5 مل Aquassure ماض (باكارد). غير محددة ملزمة ومحددة باستخدام 1 M (+) - بوتاكلامول.

في فيفو ملزم التجارب

وكان التحقيق في تأثير GTS على المجراة ملزمة لل[3 H] raclopride التي كتبها pretreating الفئران بجرعات مختلفة من GTS (50-800 ملغ / كغ، والملكية الفكرية) 60 دقيقة قبل الحقن من [3 H] raclopride. [3 H] raclopride (1 تم حقن تسى في 0.2 مل المالحة) عن طريق الوريد إلى الوريد الذيل، وبعد مرور 15 دقيقة، كانت الحيوانات قتلوا خلع عنق الرحم. تم تشريح مناطق الدماغ المختلفة على الفور على الجليد، وزنه ووضعها في قوارير زجاجية. بعد هضم الأنسجة مع Soluene-350 (باكارد)، تم إضافة 10 مل من صيغة 989 ماض (باكارد) والعينات تحسب في عداد التلألؤ السائل.

فوس المناعية

تم فحص تأثير على GTS التي يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في المناطق المستهدفة الدوبامين. تلقت الفئران تحت الجلد (SC) حقن النيكوتين (0.4 ملغ / كغ؛ وأعربت عن قاعدة حرة ع) 2 ساعة قبل التخدير (الكيتامين 80 ملغ / كغ، والملكية الفكرية بالإضافة إلى زيلازين 10 مغ / كغ، والملكية الفكرية). كانت تدار GTS (100 ملغ / كلغ) الملكية الفكرية 60 دقيقة قبل الحقن النيكوتين. تم perfused الفئران transcardially مع الجليد الباردة 0.1 M الفوسفات المالحة (PBS)، ودرجة الحموضة 7.4 مخزنة تليها 4٪ لامتصاص العرق في 0.1 M PBS. أزيلت العقول وظيفة ثابتة مع نفس تثبيتي لمدة 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة ومغمورة في محلول السكروز 20٪ بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية. تم قطع الأنسجة المجمدة إلى 30 م أبواب سميكة على ناظم البرد. تم تشطف أقسام الاكليلية في برنامج تلفزيوني (2 5 دقائق) ووضعها في 0.3٪ H 2 O 2 في الميثانول لمدة 15 دقيقة ثم يغسل في برنامج تلفزيوني (3 5 دقائق). تم preincubated المقاطع في مصل الماعز العادي 2٪ (DAKO، غلوستروب، الدنمارك) في برنامج تلفزيوني-T (0.1٪ تريتون X-100 في برنامج تلفزيوني) لمدة 40 دقيقة لمنع تلطيخ غير محددة ومن ثم حضنت مع الأجسام المضادة الأولية (أرنب بولكلونل فوس الأجسام المضادة والبحوث الجين الورمي، كامبردج، MA) المخفف في 1: 1000 لمدة 48 ساعة عند 4 درجات مئوية. تم غسلها المقاطع في برنامج تلفزيوني-T (3 5 دقائق) والمحتضنة لمدة 1 ساعة مع الماعز المعقدة البيروكسيديز المضادة للأرنب الضد الثانوية (مختبرات المتجهات، بورلنجام، CA). بعد غسل مع PBS (3 5 دقائق)، وحضنت المقاطع لمدة 1 ساعة مع تحتوي على أفيدين المعقدة البيروكسيديز الفجل البيروكسيديز المعقدة (1 PBS-T: 100، مختبرات المتجهات). تم غسلها المقاطع في برنامج تلفزيوني (3 5 دقائق) ثم تشطف لمدة 10 دقيقة في 0.175 M الصوديوم العازلة خلات (7.5 درجة الحموضة). تم الكشف عن مجمع مناعيا باستخدام diaminobenzidine (DAB) وكبريتات النيكل (NISO 4) (0.2 ملغ / مل DAB، 25 ملغ / مل NISO 4 و 0.83 لتر / مل 3٪ H 2 O 2 في 0.175 خلات الصوديوم M) لمدة 4 دقائق. تم غسلها مع أقسام PBS مرتين والتي شنت على الشرائح المغلفة سيلاني، المجفف في الهواء، المجففة من خلال ethanols متدرج في الزيلين، وcoverslipped مع Permount (فيشر العلمية، بيتسبرغ، PA). وقد لوحظ أي فوس مثل مناعية عندما تم حذف الأجسام المضادة الأولية. احصي عدد النوى فوس إيجابية باستخدام نظام تحليل الصور IBAS (زايس، ألمانيا) داخل منطقة حقل المربعة من 210 210 م للالنواة المتكئة و 420 420 م للالمخطط باستخدام 200 تكبير. تم احتساب القيمة المتوسطة لل05:57 مقاطع من كل المنطقة المحددة.

التحليل الاحصائي

ما لم ينص على خلاف ذلك، يتم التعبير عن القيم كما يعني SEM. وقد تم تحليل البيانات عن طريق ذات اتجاه واحد تحليل التباين (ANOVA) أو اتجاهين ANOVA (العلاج من تعاطي المخدرات الوقت) مع التدابير المتكررة على عامل الوقت. تم فحص أصل آثار كبيرة من جراء اللاحق مقارنات باستخدام تقنية Bonferroni.

أعلى الصفحة النتائج

تأثير GTS على المستحثة النيكوتين الحركي فرط النشاط

الشكل 1 يظهر تأثير GTS على يسببها النيكوتين hyperlocomotion. ضخ المحلي من النيكوتين (10 ملم) في المخطط عن طريق لجنة التحقيق غسيل الكلى زيادة النشاط الحركي (الاستجابة القصوى = 589٪ من الضوابط). والموهن هذا التأثير عن طريق المعالجة الشاملة مع GTS. يشار إلى ANOVA تأثير كبير من العلاجات الدوائية (F = 3،12 8.7، ع <0.005) كشفت مشاركة والمقارنات خاصة أن GTS الموهن hyperlocomotion التي يسببها النيكوتين بطريقة تعتمد على الجرعة. GTS (100 و 400 ملغ / كغ، والملكية الفكرية) انخفضت النشاط الحركي القصوى التي يسببها النيكوتين بنسبة 37٪ (P <0.01) و 58٪ (P <0.005) على التوالي. ومع ذلك، GTS (100 و / كغ، والملكية الفكرية 400 ملغ) لم يكن لها تأثير على يستريح مستويات النشاط الحركي حتى 180 دقيقة بعد الحقن (F 2،9 = 0،7، ص = NS) (الشكل 3).
الشكل 1.

تأثير GTS على يسببها النيكوتين hyperlocomotion. وقد غرست النيكوتين (10 ملم) intrastriatally (هو) لمدة 60 دقيقة بدأت في وقت 0. GTS (100 و 400 ملغ / كلغ) كانت تدار الملكية الفكرية 60 دقيقة قبل التسريب النيكوتين. النتائج الوسائل SEM من أربع تجارب مستقلة * P <0.05، ** p <0.005 ***، p <0.001 مقابل السيطرة على المجموعة؛ # ف <0.05، ## ص <0.01، ### p <0.005 مقابل المالحة بالإضافة إلى النيكوتين مجموعة.

الرقم الكامل وأسطورة (20K)

الرقم 3.

تأثير GTS على يستريح مستويات النشاط الحركي وDA خارج الخلية في الجسم المخطط. كانت تدار GTS (100 و 400 ملغ / كلغ) الملكية الفكرية في وقت 0. لا توجد فروق كبيرة في يستريح مستويات النشاط الحركي وخارج الخلية DA بين السيطرة والمعالجة GTS-الحيوانات. النتائج الوسائل SEM من 4-5 تجارب مستقلة.

الرقم الكامل وأسطورة (21K)

تأثير GTS على المستحثة النيكوتين DA الإصدار

الشكل 2 يوضح تأثير GTS على التغيرات التي يسببها النيكوتين في الخلية DA في المخطط. ضخ المحلي من النيكوتين (10 ملم) في المخطط تنتج زيادة في الخلية DA في المخطط (الاستجابة القصوى = 500 78٪ من المستويات القاعدية). والموهن هذا التأثير عن طريق GTS. يشار إلى ANOVA تأثير كبير من العلاجات الدوائية (F = 3،16 9.2، P <0.001) كشفت مشاركة والمقارنات خاصة أن GTS الموهن الإفراج DA-يسببها النيكوتين بطريقة تعتمد على الجرعة. GTS (100 و 400 ملغ / كغ، والملكية الفكرية) تحول دون استجابة DA القصوى التي يسببها النيكوتين بنسبة 58٪ (P <0.005) و 76٪ (P <0.001) على التوالي. ومع ذلك، GTS (100 و / كغ، والملكية الفكرية 400 ملغ) لم يكن لها تأثير على يستريح مستويات خارج الخلية DA في المخطط حتى 180 دقيقة بعد الحقن (F = 2،11 0،9، ص = NS) (الشكل 3).
الرقم 2.

تأثير GTS على التغيرات التي يسببها النيكوتين في الخلية DA في المخطط. وقد غرست النيكوتين (10 ملم) intrastriatally (هو) لمدة 60 دقيقة بدأت في وقت 0. GTS (100 و 400 ملغ / كلغ) كانت تدار الملكية الفكرية 60 دقيقة قبل التسريب النيكوتين. يتم التعبير عن النتائج كنسبة مئوية من ثلاث عينات أساسية وهما وسيلتان SEM من 4-6 تجارب مستقلة * P <0.05، ** p <0.005 ***، p <0.001 مقابل السيطرة على المجموعة؛ # ف <0.05، ## ص <0.005، ### p <0.001 مقابل المالحة بالإضافة إلى النيكوتين المجموعة.

الرقم الكامل وأسطورة (25K)

تأثير GTS على في المختبر تجليد [3 H] raclopride

منعت GTS الربط من [3 H] raclopride لأغشية الجسم المخطط مع IC 50 5.14 1.09 M (يعني SEM من خمس تجارب مستقلة) (الشكل 4).
الرقم 4.

تثبيط معين [3 H] raclopride ملزمة GTS في الأغشية العقدة المخططة الفئران. قدمت هي نتائج تجربة تمثيلية. النقاط هي وسيلة من قرارات ثلاث نسخ.

الرقم الكامل وأسطورة (11K)

تأثير GTS على فيفو ملزم من [3 H] raclopride

الشكل 5 يظهر تأثير GTS على المجراة ملزمة لل[3 H] raclopride في مناطق الدماغ المختلفة. جرعة من 50-200 ملغ / كغ أسفرت GTS في 11-15٪، ولكن ليس انخفاض كبير في المجراة ملزمة لل[3 H] raclopride في المخطط. زيادة جرعة GTS 400 و 800 ملغم / كغم أدى إلى انخفاض مفاجئ في الجسم المخطط [3 H] raclopride ملزمة بنسبة 55٪ (P <0.0001) و 53٪ (P <0.0001)، على التوالي. وأشار التحليل الإقليمي للبيانات ملزمة أن التأثير الأقصى للGTS على المجراة ملزمة للحدث [3 H] raclopride في المخطط، وهي منطقة غنية DA D 2 مستقبلات.
الرقم 5.

تأثير GTS على المجراة ملزمة لل[3 H] raclopride في مناطق الدماغ. كانت تدار GTS (50-800 ملغ / كلغ) الملكية الفكرية 90 دقيقة قبل الحقن في الوريد من [3 H] raclopride. المجراة [3 H] raclopride تم قياس 15 دقيقة بعد الحقن المشع ملزمة. النتائج ويتم التعبير نسب محددة لانوعي ملزمة (منطقة المخيخ إلى نسبة 1) وهما وسيلتان SD؛ ن = 4 لكل مجموعة * ع <0.0001.

الرقم الكامل وأسطورة (44K)

تأثير GTS على المستحثة النيكوتين فوس البروتين التعبير

الشكل 6 يظهر تأثير GTS على يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في المناطق المستهدفة الدوبامين. النيكوتين (0.4 ملغم / كغم، SC) ارتفع عدد النوى فوس إيجابية في النواة المتكئة والمخطط بنسبة 89٪ (P <0.05) و 73٪ (P <0.05) على التوالي. GTS (100 ملغ / كغ، والملكية الفكرية) انخفض فوس البروتين التعبير التي يسببها النيكوتين في النواة المتكئة والمخطط بنسبة 32٪ (P <0.05) و 36٪ (P <0.05) على التوالي. لم GTS لا تؤثر يستريح مستويات نوى فوس إيجابية في النواة المتكئة والمخطط (انظر الشكل 6).
الرقم 6.

تأثير GTS على يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في النواة المتكئة والمخطط، مع رسومات تخطيطية تشير إلى المجالات التي احصي نوى فوس إيجابية. كانت تدار GTS (100 ملغ / كلغ) الملكية الفكرية 60 دقيقة قبل الحقن النيكوتين (0.4 ملغم / كغم، SC). النتائج الوسائل SEM من أربع تجارب مستقلة. * P <0.05 مقابل مجموعة المالحة بالإضافة المالحة، # ف <0.05 مقابل مجموعة المالحة بالإضافة إلى النيكوتين.

الرقم الكامل وأسطورة (33K)

أعلى الصفحة نقاش

وأظهرت هذه الدراسة أن المعالجة الشاملة مع GTS يمنع التي يسببها النيكوتين hyperlocomotion وإطلاق DA الجسم المخطط بطريقة تعتمد على الجرعة. كما يرتبط فرط النشاط السلوكي التي تنتجها النيكوتين مع زيادة في الافراج DA في المخطط وكذلك في النواة المتكئة (شيم وآخرون، 2001)، والعمل المثبطة للGTS على يسببها النيكوتين الإفراج DA في المخطط يوضح، على الأقل في جزء، وتأثير حجب على تفعيل السلوكية التي تنتجها النيكوتين. كما وجدنا أن GTS الربط، مع تقارب متواضع، لDA D 2 مستقبلات سواء في التجارب المختبرية والحية. لأنه كان GTS أي تأثير على يستريح مستويات خارج الخلية DA، وتثبيط من قبل GTS من المجراة ملزمة لل[3 H] raclopride لا يعود إلى التغيرات في مستويات DA متشابك. نحن لا نعرف وظيفة GTS في DA D مواقع مستقبلات 2. في هذه الدراسة، كان تأثير تعتمد على الجرعة من GTS ضد التسريب intrastriatal النيكوتين أكبر للحد من النشاط الحركي (أكبر 57٪ تخفيض مع GTS 400 ملغ / كغ مقارنة مع GTS 100 ملغ / كلغ) من أجل الحد من العقدة المخططة الإفراج DA (أكبر 31٪ تخفيض مع GTS 400 ملغ / كغ مقارنة مع GTS 100 ملغ / كلغ). على الرغم من أنه ليس من المؤكد ما إذا كان حجم النشاط الحركي بشكل تناسبي إلى أن الإفراج DA، وتشير هذه النتيجة إلى أن آليات أخرى من DA الافراج تثبيط قد يكون متورطا في التأثير السلوكي للGTS الجرعة العالية. ويدعم هذه الفكرة استنتاج لدينا أن الجرعات العالية من GTS (400 و 800 ملغ / كلغ) تثبيط ملزمة في الجسم الحي من [3 H] raclopride إلى DA D 2 المستقبلات في المخطط. أيضا، تم الإبلاغ عن أن GTS أظهرت إجراء antidopaminergic في مواقع مستقبلات DA بعد المشبكي عن طريق تثبيط الناجم عن آبومورفين السلوك التسلق (كيم وآخرون، 1996a). بالإضافة إلى ذلك، تحول دون جرعة عالية من نبات الجنسنغ أدينيلات النشاط محلقة في أنسجة الدماغ الفئران (بيتكوف، 1978). معا، فمن المرجح أن GTS قد تعمل على DA D 2 مستقبلات باعتبارها خصم. نتائج هذه الدراسة تشير إلى أن GTS يعمل ليس فقط على الخلايا العصبية الدوبامين مباشرة أو غير مباشرة لمنع يسببها النيكوتين الإفراج DA لكن أيضا postsynaptically ملزمة لDA D 2 مستقبلات. ولعل هذا يفسر تأثير حجب GTS على تفعيل السلوكية الناجمة عن النيكوتين.
كما النيكوتين يزيد الإفراج DA من خلال تحفيز مستقبلات الأستيل كولين النيكوتينية (nAChRs) الواقعة في المناطق الطرفية وsomatodendritic من الخلايا العصبية الدوبامين (مارشال وآخرون، 1997؛ ميفسود وآخرون، 1989؛ Wonnacott وآخرون، 1990؛ Nisell وآخرون، 1994a، 1994b )، فمن الممكن أن GTS يمنع إطلاق DA من خلال العمل على nAChRs في الخلايا العصبية الدوبامين. دعم هذه الفكرة، فقد أفيد أن السابونين الجينسنغ خفضت-أثار أستيل نا + تدفق وإفراز الكاتيكولامينات في الخلايا أليفة الكروم الكظرية البقري، لكنها لم تؤثر على إفراز الكاتيكولامينات الناجم عن ارتفاع K + (وهو منشط حساسة الجهد الكالسيوم 2+ قنوات) أو veratridine (المنشط للقنوات نا + حساس الجهد) (تاتشيكاوا وآخرون، 1995). أيضا، فقد تبين أن GTS لم يكن لها تأثير على الإفراج DA الناجم عن ضخ intrastriatal من K عالية + الحل (شيم وآخرون، 2000). وتشير هذه البيانات إلى أن GTS كتل nAChRs أو القنوات نا + تعمل مستقبلات (ولكن ليس نا + والكالسيوم 2+ قنوات الجهد حساسة)، وتمنع نا + تدفق من خلال القنوات وبالتالي تقليل كل من الكالسيوم 2+ تدفق وإطلاق DA. في الدراسات الأولية لدينا، لم GTS لا يؤثر على ربط [3 H] النيكوتين على الفئران أغشية الجسم المخطط. هذا يشير إلى أن GTS قد تعمل على القنوات الأيونية تعمل مستقبلات بدلا من nAChRs أو على أنواع فرعية nAChR لا صفت من قبل [3 H] النيكوتين. ومع ذلك، هناك احتمال أن GTS الأفعال على GABAergic والخلايا العصبية glutamatergic، مستقبلات النواقل العصبية، أو nAChRs الموجود في هذه الخلايا العصبية، لأن هذه الخلايا العصبية تتفاعل مع الخلايا العصبية الدوبامين في mesoaccumbens وأنظمة السوداوي المخططي لتعديل الإفراج DA (Mansvelder وماكجيهي، 2002؛ يحترق وآخرون، 1995). في الواقع، قدمت العديد من الدراسات دليلا على أن ginsenosides قد تنظم GABA A مستقبلات. على سبيل المثال، ginsenosides ينظم بشكل مختلف [3 H] الفلونيترازيبام و[3 H] muscimol ملزمة لGABA A مستقبلات في الدماغ الفئران جزء الغشاء (كيمورا وآخرون، 1994). التسريب المطول مع جينسنوسيدي الصليب الأحمر ولكن ليس مع جينسنوسيدي النمو الحقيقي 1 في دماغ الفئران مرتفعة [3 H] muscimol ملزمة لGABA A مستقبلات بطريقة منطقة محددة (كيم وآخرون، 2001). بالإضافة إلى ذلك، تسانغ وآخرون (1985) ذكرت أن السابونين الجينسنغ تثبيط امتصاص GABA في synaptosomes دماغ الفئران. أيضا، فقد تبين أن ginsenosides تخفيف الضرر الناجم عن الغلوتامات من الخلايا العصبية وغير العصبية في الدماغ (ابي وآخرون، 1994؛ سيونغ وآخرون، 1995؛ كيم وآخرون، 2002).
كانت قادرة على تخفيف تفعيل السلوكي الناجم ليس فقط من النيكوتين ولكن أيضا من psychostimulants أخرى، مثل الكوكايين (السابونين الجينسنغ كيم وآخرون، 1995a)، الميثامفيتامين (توكوياما وآخرون، 1992)، والمورفين (كيم وآخرون، 1995b). ومن المثير للاهتمام، وجدنا أن GTS أيضا تحول دون زيادة ناتجة عن تعاطيه الكوكايين في الخلية DA دون أن يؤثر ذلك [3 H] WIN 35 428 ملزما للنقل DA في المخطط الفئران (لا تظهر البيانات). وبعبارة أخرى، الموهن GTS على DA السلوكي وخارج الخلية آثار psychostimulants التي تتصرف مع آليات مختلفة زيادة (أي يزيد من افراز DA (النيكوتين) مقابل عرقلة نقل DA (الكوكايين)). هذا يشير إلى أن GTS قد تعمل على الممرات المشتركة الأخيرة من رد الفعل السلبي لتنظيم الدوبامين.
العلاج بالعقاقير التي تؤثر على انتقال الدوبامين تعدل التعبير عن بروتين فوس المشفرة التي كتبها c-فو بروتو الجين الورمي في المخطط (Graybiel وآخرون، 1990؛ روبرتسون وآخرون، 1990؛ هيريرا وروبرتسون، 1996؛ Moratalla وآخرون، 1996). النيكوتين الحاد يرفع فوس التعبير في مناطق الدماغ المختلفة، بما في ذلك المناطق المستهدفة الدوبامين (رن وساجار، 1992؛ ماتا وآخرون، 1993؛ بانغ وآخرون، 1993؛ كيبا وJayaraman، 1994؛ Panagis وآخرون، 1996؛ Salminen وآخرون، 1996 ؛ الحب وآخرون، 1996). في هذه الدراسة، انخفض GTS التي يسببها النيكوتين فوس البروتين التعبير في النواة المتكئة والمخطط. وهذا يعكس تثبيط تعزيز يسببها النيكوتين انتقال الدوبامين التي GTS. من نتائجنا، قد يكون تأثير GTS يرجع إلى حد كبير إلى تأثير مثبط على الإفراج DA لأن DA D 1 مستقبل، ولكن ليس D 2 مستقبلات، يتوسط التي يسببها النيكوتين فوس التعبير في المخطط والنواة المتكئة (كيبا وJayaraman، 1994؛ Nisell وآخرون، 1997؛ Svenningsson ولو Moine، 2002). بالإضافة إلى ذلك، قد GTS ممارسة تأثير كابح بشكل خاص على DA D 1 المستقبلات، التي ينبغي التحقيق فيها من قبل إجراء المزيد من الدراسات. وجدنا أن GTS لم يؤثر يستريح مستويات فوس التعبير. وهذا يتماشى مع النتيجة التي مفادها أن GTS أي تأثير على يستريح مستويات DA خارج الخلية.
في هذه الدراسة، لmicrodialysis والنشاط الحركي التجارب، تم perfused النيكوتين عن طريق التحقيق microdialysis في تركيز 10 ملم بمعدل 1.5 لتر / دقيقة (أي، في جرعة من 15 نانومول / دقيقة). وقد أظهرت الدراسات السابقة أن microdialysis نضح المحلي من 1-10 ملم (1،5 حتي 40 نانومول / دقيقة) النيكوتين أثارت زيادة موثوقة ومتسقة في محتوى DA من العينات ديالة الجسم المخطط (مارشال وآخرون، 1997؛ ليكا وآخرون، 2000؛ شيم وآخرون، 2001). يكا وآخرون (2000) ذكرت أن نضح من 0.2 نانومول / دقيقة النيكوتين فشلت في زيادة المحتوى DA، في حين نضح من 2 أو 10 نانومول / دقيقة النيكوتين زيادة كبيرة محتوى DA في عينات ديالة الجسم المخطط. أيضا، في دراسات تجريبية لدينا، أنتجت 5 أو 10 ملي النيكوتين زيادة مستقرة وموثوق بها في كل DA الإفراج والحركي النشاط. وهكذا، كنا 10 ملم النيكوتين في تجاربنا.
وجود قيود الرئيسي لهذه الدراسة هو أن المزيد من الاجراءات المباشرة لتعزيز النيكوتين، مثل النيكوتين الإدارة الذاتية والتي يسببها النيكوتين تفضيل مكان مشروطة، لم تستخدم لتقييم آثار GTS. ينبغي دراسة آثار GTS على تلك التدابير من تعزيز النيكوتين قبل استخلاص استنتاجات نهائية بشأن الآثار المحتملة لGTS على كمية النيكوتين. على حد علمنا، ليس هناك أي دليل من تجارب اكلينيكية أو تقرير القولية على العلاقة بين استخدام نبات الجنسنغ، وانخفض استهلاك التبغ. من الواضح أنه ينبغي إجراء الدراسات السريرية لاستجلاء فعالية الجنسنغ في إقلاع عن التدخين في المستقبل.
وفي الختام، فإن نتائج هذه الدراسة تشير إلى أن GTS يعمل ليس فقط على الخلايا العصبية الدوبامين مباشرة أو غير مباشرة لمنع يسببها النيكوتين الإفراج DA، ولكن أيضا postsynaptically ملزمة لDA D 2 مستقبلات. ولعل هذا يفسر تأثير حجب GTS على تفعيل السلوكية الناجمة عن النيكوتين وتصور من قبل psychostimulants أخرى. البيانات المتوفرة لدينا تثير احتمال أن GTS، في تهدئة تعزيز يسببها النيكوتين انتقال الدوبامين، قد يثبت أنه عامل علاجي مفيد لإدمان النيكوتين وتستدعي مزيدا من التحقيق في تأثيرها على الممتلكات مجزية للنيكوتين.

أعلى الصفحة المراجع

• ابي K، تشو SI، كيتاجاوا I، نيشياما N، H سايتو (1994). الآثار التفاضلية للRB1 جينسنوسيدي وRB1 malonylginsenoside على التقوية على المدى الطويل في التلفيف المسنن من الفئران الدماغ الدقة 649: 7-11. | المادة | مجلات | ChemPort |
• أندو T، تاناكا O، S شيباتا (1971). دراسات كيميائية على الصابونين وsapogenins من الجينسنغ والعقاقير الخام ذات الصلة Syoyakugaku Zasshi 25: 28-32. | ChemPort |
• Benwell MEM، بلفور DJK (1992). آثار الحادة والمتكررة العلاج النيكوتين على النواة المتكئة الدوبامين والحركي النشاط برازيلي J Pharmacol 105: 849-856. | مجلات | ISI | ChemPort |
• Benwell MEM، بلفور DJK (1994). مقارنة بين آثار النيكوتين التسريب المستمر على النواة المتكئة وردود الدوبامين الجسم المخطط على النيكوتين الحاد. في: كلارك PBS، كويك M، Thurau K، Adlkofer F (محرران) تأثيرات النيكوتين على الأنظمة البيولوجية II. Birkhauser دار نشر: بازل. ص 66.
• Corrigall WA، فرانكلين KB، كوين KM، كلارك PB (1992).وتورط نظام الدوبامين mesolimbic في الاثار القوية للنيكوتين. علم الادوية النفسية 107: 285-289. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• Damsma G، يوم J، Fibiger HC (1989). عدم التسامح التي يسببها النيكوتين إطلاق الدوبامين في النواة المتكئة. اليورو J Pharmacol 168: 363-368. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• دي كيارا G، Imperato ألف (1988). المخدرات سوء المعاملة من قبل البشر تزيد تفضيلي تركيزات الدوبامين متشابك في النظام mesolimbic من الفئران تتحرك بحرية. بروك Natl أكاد العلوم USA 85: 5274-5278. | مجلات | ChemPort |
• Graybiel AM، Moratalla R، روبرتسون HA (1990). الأمفيتامين والكوكايين تتسبب في تنشيط المخدرات محددة لل-ج منظمات المزارعين الجينات في striosome مصفوفة والتقسيمات الحوفي من المخطط. بروك Natl أكاد العلوم USA 87: 6912-6916. | المادة | مجلات | ChemPort |
• هينينغفيلد JE، Heishman SJ (1995). دور الادمان النيكوتين في التبغ. علم الادوية النفسية 117: 11-13. | المادة | مجلات | ChemPort |
• هيريرا DG، روبرتسون HA (1996). تفعيل ج-منظمات المزارعين في الدماغ. بروغ Neurobiol 50: 83-107. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• Imperato A، Mulas A، دي كيارا G (1986). النيكوتين يحفز تفضيلي إطلاق الدوبامين في الجهاز الحوفي من الفئران تتحرك بحرية. اليورو J Pharmacol 132: 337-338. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• كيبا H، Jayaraman ألف (1994). النيكوتين التي يسببها-ج منظمات المزارعين وبوساطة التعبير في المخطط معظمهم من الدوبامين D1 مستقبلات ويعتمد على NMDA التحفيز. مول الدماغ الدقة 23: 1-13. | المادة | مجلات | ChemPort |
• كيم HS، هوانج SL، قام خلاله SY، أوه S (2001). التغيرات في [3 H] MK-801، [3 H] muscimol و[3 H] الفلونيترازيبام ملزمة في دماغ الفئران عن طريق ضخ البطين لفترة طويلة من جينسنوسيدي الصليب الأحمر وRG1. Pharmacol الدقة 43: 473-479. | المادة | مجلات | ChemPort |
• كيم HS، جانغ CG، يا KW، سيونغ YH، Rheu HM، تشو DH وآخرون (1996a). تأثير الجينسنغ مجموع سابونين على فرط النشاط ومكان مشروط تفضيل التي يسببها الكوكايين في الفئران. Pharmacol الكيميائية الحيوية Behav 53: 185-190. | المادة | ChemPort |
• كيم HS، جانغ CG، وبارك WK، يا KW، Rheu HM، تشو DH وآخرون (1996b). الحصار من قبل الجينسنغ سابونين الإجمالي لفرط النشاط ومكان مشروط تفضيل الناجم عن الميثامفيتامين في الفئران. الجنرال Pharmacol 27: 199-204. | ChemPort |
• كيم HS، كانغ JG، يا KW (1995a). عن طريق تثبيط الجينسنغ سابونين الكلي للتطوير المورفين عكس التسامح ومستقبلات الدوبامين supersensitivity في الفئران. الجنرال Pharmacol 26: 1071-1076. | المادة | ChemPort |
• كيم HS، كانغ JG، سيونغ YH، نام KY، يا KW (1995b). الحصار من قبل الجينسنغ سابونين الكلي للتطوير الكوكايين التي يسببها عكس التسامح ومستقبلات الدوبامين supersensitivity في الفئران. Pharmacol الكيميائية الحيوية Behav 50: 23-27. | المادة | ChemPort |
• كيم HS، كيم KS (1999). الآثار المثبطة من الجينسنغ مجموع سابونين على يسببها النيكوتين وفرط النشاط، عكس التسامح ومستقبلات الدوبامين supersensitivity. Behav الدماغ الدقة 103: 55-61. | المادة | مجلات | ChemPort |
• كيم S، K اهن، يا TH، قام خلاله SY، Rhim H (2002). تأثير كابح من ginsenosides على NMDA الإشارات بوساطة مستقبلات الخلايا العصبية في قرن آمون الفئران. الكيميائية الحيوية BIOPHYS الدقة COMMUN 296: 247-254. | المادة | مجلات | ChemPort |
• كيمورا T، سوندرز PA، كيم HS، Rheu HM، يا KW، هو ايك (1994). تفاعلات ginsenosides مع يجند الارتباطات من GABA A وGABA B مستقبلات. الجنرال Pharmacol 25: 193-199. | مجلات | ISI | ChemPort |
• كو SR، كيم SC، تشوي KJ (1992). عوائد استخراج ومحتويات سابونين مقتطفات من الجينسنغ الأحمر أعدت مع تركيزات مختلفة من الايثانول. كور J Pharmacogn 23: 24-28. | ChemPort |
• ليكا D، شيم I، E كوستا، جاويد JI (2000). تطبيق الجسم المخطط من النيكوتين، ولكن ليس من بيلين، خفف إطلاق الدوبامين لدى الفئران تتحرك بحرية. الفارماكولوجيا العصبية 39: 88-98. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Lidow MS، غولدمان راكيتش PS، راكيتش P، إنيس RB (1989). الدوبامين D 2 المستقبلات في القشرة الدماغية: توزيع وتوصيف الدوائية مع [3 H] raclopride. بروك Natl أكاد العلوم USA 86: 6412-6416. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Mansvelder HD، ماكجيهي DS (2002). الآليات الخلوية ومتشابك من إدمان النيكوتين. J Neurobiol 53: 606-617. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• مارشال DL، ريدفيرن PH، Wonnacott S (1997). قبل المشبكي النيكوتين التشكيل من إطلاق الدوبامين في مسار تصاعدي ثلاثة يدرسها في الجسم الحي microdialysis: مقارنة ساذجة والمزمنة المعالجة النيكوتين الفئران J نوروتشيم 68: 1511-1519. | مجلات | ISI | ChemPort |
• ماتا SG، فوستر CA، شارب BM (1993). النيكوتين يحفز التعبير عن بروتين الرؤساء الماليين في المناطق نواة مجاور للبطين والدماغ كاتيكولاميني صغير الخلايا. الغدد الصماء 132: 2149-2156. | المادة | مجلات | ChemPort |
• ميفسود JC، هيرنانديز L، Hoebel BG (1989). النيكوتين حقنها في النواة المتكئة زيادة الدوبامين متشابك مقاسا في الجسم الحي microdialysis. الدماغ الدقة 478: 365-367. | المادة | مجلات | ChemPort |
• ميرزا ​​NR، بى Q، Stolerman IP، Zetterstrom TS (1996). منبهات مستقبلات النيكوتين (-) - النيكوتين وisoarecolone تختلف في تأثيرها على إطلاق الدوبامين في النواة المتكئة. اليورو J Pharmacol 295: 207-210. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Moratalla R، Elibol B، M فاييخو، Graybiel AM (1996). تغييرات على مستوى الشبكة في التعبير عن محرض البروتينات فوس-يونيو في المخطط أثناء العلاج الكوكايين المزمنة والانسحاب. نيورون 17: 147-156. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• Nisell M، نوميكوس GG، سفينسون TH (1994a). النظامية التي يسببها النيكوتين إطلاق الدوبامين في النواة المتكئة الفئران ينظمه مستقبلات النيكوتين في منطقة السقيفية البطنية. سنبس 16: 36-44. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• Nisell M، نوميكوس GG، CHERGUI K، Grillner P، سفينسون TH (1997). النيكوتين المزمن يعزز القاعدية والتي يسببها النيكوتين فوس مناعية تفضيلي في قشرة الفص الجبهي وسطي من الفئران. Neuropsychopharmacology 17: 151-161. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Nisell M، نوميكوس GG، سفينسون TH (1994b). التسريب من النيكوتين في منطقة السقيفية البطنية أو النواة المتكئة من الفئران يؤثر بشكل مختلف إطلاق الدوبامين accumbal. Pharmacol Toxicol 75: 348-352. | مجلات | ISI | ChemPort |
• Panagis G، M Nisell، نوميكوس GG، CHERGUI K، سفينسون TH (1996). حقن النيكوتين في منطقة السقيفية البطنية زيادة الحركة وفوس مثل المناعية في النواة المتكئة من الفئران. الدماغ الدقة 730: 133-142. | مجلات | ISI | ChemPort |
• بانغ Y، كيبا H، Jayaraman ألف (1993). النيكوتين الحقن الحادة تحفز ج-منظمات المزارعين في الغالب في الخلايا العصبية غير الدوبامين في الدماغ المتوسط ​​من الفئران. مول الدماغ الدقة 20: 162-170. | المادة | مجلات | ChemPort |
• بارينو A، Saraza ML، Subero C (1985). A stabilimeter جديدة للحيوانات المختبرية الصغيرة. الفيزيولوجيا Behav 34: 475-478. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Paxinos G، C واتسون (1986). دماغ الفئران في الإحداثيات التجسيمي، 2ND أد. اضغط الأكاديمية: نيويورك.
• بيتكوف VW (1978). آثار الجينسنغ على الدماغ أحاديات الأمين الاحيائية و 3، 5'-AMP النظام: تجارب على الفئران Arzneim-Forsch 28: 388-393. | ChemPort |
• Pontieri FE، فرانشيسكو E، G تندا، فرانشيسكو O، دي كيارا G (1996). . آثار النيكوتين على النواة المتكئة والتشابه لتلك العقاقير المسببة للإدمان الطبيعة 382: 255-257. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• رن T، ساجار SM (1992). تحريض ج-منظمات المزارعين المناعية في الدماغ الفئران بعد إدارة النظامية من النيكوتين. الدماغ الدقة الثور 29: 589-597. | المادة | مجلات | ChemPort |
• روبرتسون GS، فنسنت SR، Fibinger HC (1990). الخلايا العصبية الإسقاط مخططي سودائي تحتوي على الدوبامين D1 تنشيط مستقبلات ج-منظمات المزارعين. الدماغ الدقة 523: 288-290. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Salminen O، Lahtinen S، Ahtee L (1996). التعبير عن بروتين فوس في مختلف مناطق دماغ الفئران التالية النيكوتين الحاد والديازيبام. Pharmacol الكيميائية الحيوية Behav 54: 241-248. | المادة | مجلات | ISI | ChemPort |
• سيونغ YH، شين CS، كيم HS، بابا ألف (1995). تأثير كابح من إجمالي السابونين الجينسنغ على الغلوتامات التي يسببها الورم من الخلايا النجمية مثقف. بيول فارم الثور 18: 1776-1778. | مجلات | ChemPort |
• شيم I، جاويد JI، كيم SE (2000). تأثير مجموعه الجينسنغ سابونين على إطلاق الدوبامين خارج الخلية التي تسببها ضخ المحلي من النيكوتين في الجسم المخطط من الفئران تتحرك بحرية. بلانتا ميد 66: 705-708. | المادة | مجلات | ChemPort |
• شيم I، جاويد JI، Wirtshafter D، جانغ SY، شين KH، لي HJ وآخرون (2001). ويرتبط التي يسببها النيكوتين التوعية السلوكية مع الخلية إطلاق الدوبامين والتعبير عن ج-فو في المخطط والنواة المتكئة من الفئران. Behav الدماغ الدقة 121: 137-147. | المادة | مجلات | ChemPort |
• يحترق I، دي كليبل N، S ساري، EBINGER G، Michotte Y (1995). منشط GABA-ergic التشكيل من الجسم المخطط إطلاق الدوبامين التي درسها في الجسم الحي microdialysis في الفئران تتحرك بحرية. اليورو J Pharmacol 284: 83-91. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Svenningsson P، لو Moine C (2002). الدوبامين D1 / 5 تحفيز مستقبلات يدفع-ج منظمات المزارعين التعبير في نواة تحت المهاد: احتمال تورط مستقبلات D5 المحلية. اليورو J Neurosci 15: 133-142. | المادة | مجلات |
• تاتشيكاوا E، K كودو، Kashimoto T، تاكاهاشي E (1995). السابونين الجينسنغ لحد من أثار أستيل نا + تدفق وإفراز الكاتيكولامينات في الخلايا أليفة الكروم الكظرية البقري. J Pharmacol إكسب ذر 273: 629-636. | مجلات | ChemPort |
• توكوياما S، يا KW، كيم HS، تاكاهاشي M، H Kaneto (1992). الحصار من قبل الجينسنغ مستخرج من تطوير التسامح العكسي لتأثير المتسارع التمشي من methaphetamine في الفئران. JPN J Pharmacol 59: 423-425. | مجلات | ChemPort |
• توث E، H Sershen، هاشم A، VIZI ES، Lajtha ألف (1992). تأثير النيكوتين على مستويات خارج الخلية العصبية المقررة من قبل microdialysis في مناطق الدماغ المختلفة: دور حمض الجلوتاميك نوروتشيم الدقة 17: 265-271. | المادة | مجلات | ChemPort |
• تسانغ D، يونغ HW، تسو WW، بيك H (1985). السابونين الجينسنغ: تأثير على امتصاص الناقلات العصبيه في synaptosomes دماغ الفئران بلانتا ميد 3: 221-224. | مجلات |
• الحب دينار، متى SG، شارب BM (1996). التي يسببها النيكوتين الرؤساء الماليين التعبير في نواة مجاور للبطين المخ تحت المهاد البصري يعتمد على آثار الدماغ: الارتباط مع الرؤساء الماليين في كاتيكولاميني والخلايا العصبية noncatecholaminergic في نواة السبيل المفردة. الغدد الصماء 137: 622-630. | المادة | مجلات | ChemPort |
• Wonnacott S، Drasdo A، E ساندرسون، رويل P (1990). مستقبلات النيكوتين قبل المشبكي والتشكيل إطلاق النواقل. في: بوك G، J مارش (محرران). وعلم الأحياء الاعتماد على النيكوتين. جون وايلي وأولاده: شيشستر. ص 87-101.