عرض مشاركة واحدة
  #23  
قديم 11-20-2015, 11:00 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي البروتين اعصاب (adnp) المعارض التي تعتمد على النشاط الجنسي ضرب الانقسام التي تؤثر على أمراض التوحد والزهايمر

 

http://www.nature.com/tp/journal/v5/...p2014138a.html


شرت على الانترنت 3 فبراير 2015 البروتين اعصاب (ADNP) المعارض التي تعتمد على النشاط الجنسي ضرب الانقسام التي تؤثر على أمراض التوحد والزهايمر
فتح


A Malishkevich N عمرام G-هكوهين كليمان I ماجن E جلعادي 1 وأنا Gozes 1
1 إن ليلى وابراهام Gildor كرسي التحقيق من عوامل النمو. مختبر التون لNeuroendocrinology الجزيئية، قسم علم الوراثة الجزيئية البشرية والكيمياء الحيوية، ساكلر كلية الطب، كلية Sagol العلوم العصبية ومركز آدمز سوبر لدراسات الدماغ، جامعة تل أبيب، تل أبيب، إسرائيل
المراسلات: د I Gozes، قسم علم الوراثة البشرية الجزيئية والكيمياء الحيوية، ساكلر كلية الطب، جامعة تل أبيب، تل أبيب 69978، إسرائيل. البريد الإلكتروني: igozes@post.tau.ac.il
2 هؤلاء المؤلفين اثنين ساهمت بالتساوي على هذا العمل.
تلقى 6 أغسطس 2014. المنقحة 4 أكتوبر 2014؛ قبلت 17 نوفمبر 2014

أعلى الصفحة ملخص

البروتين اعصاب (ADNP) التي تعتمد على النشاط هو الأكثر شيوعا اضطراب طيف التوحد (ASD) الجين -associated والبروتين الوحيد انخفاض ملحوظ في المصل من مرض الزهايمر (AD) من المرضى. وADNP المرتبطة ASD يكون أكثر انتشارا عند الذكور وإعلان أكثر انتشارا في النساء؟ وكشفت النتائج خلافاتنا التعلم / الذاكرة المرتبط بالجنس في الفئران، مما يعكس التغييرات التعبير قرن آمون في ADNP وتسيطر ADNP-الجينات خطر AD / ASD. وقد تضاعف الحصين ADNP محتوى النص في الذكور مقابل إناث الفئران، مع الإناث تظهر التعبير يساوي ADNP haploinsufficient (ADNP + / -) ذكور و أي تخفيض المرتبط الوراثي كبير. تم تكرارها زيادة الذكور ADNP التعبير في عينات الحصين بعد الوفاة الإنسان. وقد تضاعف نسخة الحصين لئي E (الجين خطر رئيسي لAD) في الفئران الإناث مقارنة مع الذكور، وكذلك تضاعف في ADNP + / - إناث، المتناقضة انخفاض في ADNP + / - الذكور. سابقا، أدى overexpression من بدء ترجمة حقيقية النواة عامل 4E (eIF4E) إلى ASD تشبه النمط الظاهري في الفئران. هنا، حددنا مواقع ملزمة على ADNP لeIF4E وشارك في مناعي. وعلاوة على ذلك، تم زيادة الحصين التعبير eIF4E تحديدا في ADNP الشباب + / - ذكور الفئران. سلوكيا، ADNP + / - ذكور الفئران أظهرت أوجه القصور في التعرف على الأشياء والذاكرة الاجتماعية مقارنة مع ADNP + / + الفئران، في حين ADNP + / - ولم يدخر جزئيا الإناث. وأظهرت المتناقضة الذكور، والتي يفضل الرواية على الفئران مألوفة، ADNP + / + إناث أي تفضيل على الفئران جديدة وADNP + / - الإناث لا تفضل الفئران على الكائن. ADNP التعبير المتمركزة كمنظم رئيسي من ASD ومخاطر AD الجينات الرئيسية، يقدم مفهوم جديد للقرن آمون إزدواج الشكل الجنسي التنظيم الجيني وADNP + / - نموذج حيواني للطب النفسي متعدية.

أعلى الصفحة مقدمة

اضطراب طيف التوحد (ASD) يؤثر ~ 1.5٪ الأطفال مع انتشار لثلاثة أولاد / فتاة واحدة وبنسبة 50٪ وظيفة الفكرية ناقصة أو الحد الفاصل ~، في الولايات المتحدة. 1 والاعتلال المشترك عال من ASD مع الإعاقة الذهنية تشير الجينات والممرات المشتركة. 4 التركيز على إزدواج الشكل الجنسي والوظائف المعرفية والمتناقضة مع ASD، هناك انتشار أكبر لمرض الزهايمر (AD) عند النساء مقارنة مع الرجال، في حين قد يكون الرجال أكثر عرضة للالضعف الادراكي المعتدل، مرحلة وسيطة بين الشيخوخة العادية والخرف . 5
التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين (ADNP)، قدر مؤخرا أن دي نوفو تحور في 0،17٪ على الأقل من حالات ASD، 8 تم اكتشافه في مختبرنا ويدعى الحيوي لتكوين الدماغ. 10، 11، 12، 13 أدى نقص جزئي في ADNP في hyperphosphorylation من البروتين تاو MT المصاحب (مما يؤدي إلى AD / الخرف الجبهي الصدغي مثل تاو علم الأمراض) توازيها العجز المعرفي. NAP (NAPVSIPQ)، مقتطف من ADNP، 12 تعزيز التفاعل تاو-MT 14، 15 وتثبيط، في جزء منه، تاو التجميع، 16، 17، 18 عكس القصور ADNP في الجسم الحي، 12 مع زيادة ADNP-MT نهاية التفاعل بروتين ملزمة من خلال المجال SIP المشتركة. 19 ارتبط تاو ترسب أيضا يعانون من مرض التوحد. 20 الفئران التي تعاني من نقص GSK3beta (كيناز تاو مفرط النشاط في ADNP + / - الفئران 12)، وأظهرت تحسين السلوك الاجتماعي مقابل السيطرة على الفئران، 21 مما يشير إلى أن overactivation من GSK3beta والناتجة تاو hyperphosphorylation يضعف السلوك الاجتماعي، كما رأينا في التوحد. في موازاة ذلك، تم استنفاد (MAP2) التعبير MT المرتبطة بالبروتين 2 في المرضى الذين يعانون من التوحد. 22 وفي هذا الصدد، أدى ADNP إسكات في استنزاف MAP2 23 والعلاج NAP زاد MAP2 التعبير. 24
أظهرنا مؤخرا أن ADNP + / - الفئران معارضها تخفيض beclin1 قرن آمون (عاملا رئيسيا في تنظيم الالتهام الذاتي، الذي تم تخفيض أيضا في الفصام الحصين بعد الوفاة مقارنة مع الضوابط). على مستوى البروتين، ADNP شارك immuoprecipitated-مع MT المرتبطة بالبروتين 1 ضوء سلسلة 3، منظم رئيسي آخر لعملية الالتهام الذاتي، الذي تم تعزيزه من خلال برنامج العمل الوطني، 25 حماية تدفق ذاتية البلعمة. 26 ارتبط الالتهام الذاتي المصابين بالتوحد، 27 على سبيل المثال، في الفئران haploinsufficient لambra1 (منظم الإيجابي للbeclin1)، والتي تبين السلوك مثل التوحد يقتصر على الجنس الأنثوي. 28 وبالإضافة إلى ذلك، وقد ثبت آليات التقارب أخرى مشتركة بين انفصام الشخصية ومرض التوحد، بما في ذلك الطفرات التي تؤثر على قوة متشابك والنشاط الهيكل الخلوي. 29
الأهم من ذلك، ورفع القيود ADNP التعبير، وترتبط البروتينات ذات الصلة في الفصام العقول بعد الوفاة. 30
تحديد الجين الكامل تحليل التعبير ميكروأري محتوى النص تغيير في ADNP + / - الفئران 12 مقارنة مع ADNP + / +، بما فيها نسخة الناقل المذاب، والمشاركة في داخل الخلايا مما يشير إلى شلال، وتحويل عامل النمو، والمشاركة في الأوعية الدموية وPax6، 11 المشاركة في هجرة الخلايا العصبية وaxogenesis، التي هي إما تحور أو تغيير في التعبير عنها في الأشخاص الذين يعانون من مرض التوحد. 11، 12، 20، 31، 32 وبالإضافة إلى ذلك، كان مرتبطا ADNP haploinsufficiency أيضا مع العجز في الذاكرة الاجتماعية. 12، 33
من وجهة نظر التشخيص نظر، وتقييم ADNP الخلايا الليمفاوية التعبير أظهرت زيادة التعبير في المرضى الذين يعانون من الفصام مقارنة مع الضوابط الملائمة، التي تم تخفيض مع تطور المرض فقط في المرضى الإناث. 25 ويتناقض هذا التعبير زيادة في الفصام التي انخفضت التعبير في الخلايا وحيدة النواة الدم المحيطي 34 من التصلب المتعدد المرضى، وعلى مستوى البروتين، والبروتينات في الدم الكاملة حددت ADNP كما البروتين الوحيد تناقص في مصل الدم من المرضى ميلادي مقارنة مع الضوابط. 35
نظرا للذكور / الاختلافات الإناث في ASD وAD، فمن المثير للاهتمام أن نلاحظ أن التعبير ADNP في النواة المقوسة من منطقة ما تحت المهاد القوارض، وهي منطقة الدماغ المرتبطة الشهية والسلوك الجنسي، وتقلبات عرضت خلال دورة وداقية، أقسام proestrous كونها معظم أقسام ADNP-مناعيا وداقية على الأقل، في حين أن الذكور المقوسة نواة ADNP مثل مناعية كان أقل بكثير من ذلك من ودقي الإناث. 36
هنا، سألنا إذا كان يتم التعبير عن ADNP تفاضلي في حصين من الذكور والإناث، وإذا كانت التغييرات في ADNP التعبير تنظيم ASD ومخاطر AD الجينات الرئيسية، مما أدى إلى الاختلافات الإدراكية والاجتماعية مصنفة حسب الجنس. فهم أفضل للADNP، الذي ينظم> 400 الجينات خلال تطوير 13 سيمهد الطريق لعلاجات مستهدفة بشكل أفضل.

أعلى الصفحة المواد والأساليب

الحيوانات

وقد تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تنطوي على الحيوانات من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان في جامعة تل أبيب ووزارة الصحة الإسرائيلية. ADNP الفئران متخالف على C57BL مختلطة و 129 / سيفرت الخلفية، نموذجا للإدراكيا، 12 تم إيواؤهم في 12 ساعة ضوء / 12 ساعة مرفق دورة الظلام مع حرية الوصول إلى طعام القوارض والمياه.
الإجراء لتوليد ADNP + / - وصفت الحيوانات سابقا. 11، 12 نظرا للمشاكل التزاوج الفطرية الشديدة، التزاوج مع مجلس النواب، وهو خط الماوس الأباعد، تم تنفيذ السماح لتربية مستمرة وآله ممتازة. تم إجراء التنميط الجيني عن طريق Transnetyx (ممفيس، TN، الولايات المتحدة الأمريكية). ADNP + / - وتتزاحم ADNP + قورنت / + الفئران. تعرض شاب يبلغ ستة أشهر أو إناث الفئران مرتين يوميا (5   ميكرولتر في الأنف) لإدارة الأنف، من حل مركبة، 37 التي شملت كل مل 7.5   ملغ من كلوريد الصوديوم، 1.7   ملغ من مونوهيدرات حامض الستريك، 3   ملغ من الصوديوم ثنائي الهيدرات فوسفات، و 0.2   ملغ من محلول كلوريد البنزالكونيوم (50٪).
تعرض الفئران لامتحانات السلوكية = 16-18 لكل مجموعة من المجموعات الذكور، ن = 11 لكل مجموعة من المجموعات النسائية) على النحو المبين أدناه. مجموعة فرعية من هذه الفئران (ذكور فقط، ن = 5 لكل مجموعة) لقوا مصرعهم وتعرض RNA الحصين من الكمية في الوقت الحقيقي RT-PCR. وشملت مجموعة مستقلة من المجموعات مع RNA الحصين تحليلها من قبل الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR الفئران من العمر 6 أشهر السذاجة 5- ل(ن = 6-8 في المجموعة).
التعرف على وجوه

وكانت وADNP + / + الفئران 7 أشهر من العمر في ذلك الوقت من الاختبار - موضوع ADNP + /. ويشمل الاختبار يومين متتاليين من التعود (5   دقيقة يوميا) واليوم التجريبي الذي يتكون من ثلاث مراحل. في المرحلة 1 (التعود)، وجهاز حقل مفتوح (50 × 50   سم) الواردة كائنين متطابقة (البلاستيك أو المعدن، 4 × 5   سم 2) وتم وضع الماوس في جهاز ووجهه إلى الحائط وسمح لاستكشاف الكائنات بحرية (5   دقيقة). بعد 3   ساعة في قفص المنزل، وضعت الماوس مرة أخرى إلى الجهاز لمدة 3   دقيقة للمرحلة 2 (خيار الاحتفاظ قصيرة)، تم خلالها استبدال واحدة من الأشياء المألوفة مع كائن الرواية. ما يقرب من 24   ساعة بعد الانتهاء من المرحلة 2، وضعت الماوس في جهاز ل3   دقيقة للمرحلة 3 (خيار الاحتفاظ الطويل)، تم خلالها استبدال واحدة من الأشياء المألوفة مع كائن الرواية. ابقى الماوس في قفص وطنه بين المرحلتين 2 و 3. في الوقت الذي يقضيه استنشاق / لمس تم قياس كل كائن. وقد تم تحليل البيانات باستخدام صيغة قدرة التمييز: D2 = (ب-أ) / (أ + ب)، حيث "أ" المعين وقت الاستكشاف من وجوه مألوفة و'ب' المعين وقت الاستكشاف من وجوه الرواية. 38
مهمة النهج الاجتماعية

وكانت وADNP + / + الفئران 7-8 أشهر من العمر في ذلك الوقت من الاختبار - موضوع ADNP + /. الفئران تستخدم رواية (الهدف الفئران) إلى أن تستكشف من قبل الفئران الخاضعة كانوا من 129 / SVJ سلالة (في مستعمرة لدينا)، والمعروف عن طبيعتها سهلة الانقياد (7- 8 شهرا من العمر). وقد ذكرت سابقا المهمة نهج الاجتماعية. 39 تم تقسيم مربع من الزجاج إلى ثلاث غرف متجاورة، كل 20   سم (طول) × 40.5   سم (عرض) × 22   سم (ارتفاع)، مفصولة اثنين من الأبواب القابلة للإزالة. أكواب قلم رصاص أسلاك الفولاذ (10.16   سم (قطر)، 10.8   سم (ارتفاع))، www.kitchen-plus.com استخدمت، على حد سواء الاحتواء للفئران الهدف والجماد كما (أوزان الفئران منعت من قلب الكؤوس). وأجريت التجارب في منطقة مضاءة بشكل خافت خلال المرحلة الخفيفة من الفأرة. وقد تم قياس سطوع اليمين واليسار غرف مع ضوء متر (MRC المختبر، حولون، إسرائيل) والاحتفاظ بها في ~ 6 + 0.5 لوكس قبل أن بدأت التجارب، لتجنب التحيز. كانت مغطاة ثلاثة جوانب من مربع لمنع الفئران من استخدام الاشارات المكانية. تركت الجانب الطويل التي تواجه المجرب مفتوحة لمشاهدة المجرب.
وضعت الفئران المستهدفة (الذكور للذكور والإناث للإناث) داخل الكأس الأسلاك في إحدى الغرف الجانبية لثلاث جلسات 10-مين في اليوم قبل الاختبار لالتعود. في اليوم التالي، تم اختبار كل فأر يخضع في تجربة مع ثلاث مراحل، كل فترة طويلة 10 دقيقة (قياس مع جهاز توقيت بسيط): الأول والثاني، ومراحل التعود (ضمان عدم التحيز)، والثالثة، وهي مرحلة تجريبية، سجلت مع كاميرا الفيديو. لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية بين فترات الوقت الذي يقضيه في غرف مختلفة في مرحلة التعود.
في المرحلة الثالثة، وضعت سلك كوب فارغ (كائن رواية) في وسط اليمين أو اليسار غرفة ووضعت الكأس الذي يحتوي على الماوس الهدف في وسط الغرفة الأخرى. ويوازن موقع السلك كوب فارغ (وجوه الرواية) والفئران جديدة لتجنب تفضيل الجانب التباس. والأبواب ثم إزالتها وبدأ الموقت لمدة 10 مين. خلال هذه المرحلة، توقيت المجرب متى الماوس موضوع استكشاف السلك كوب فارغ والكأس سلك مع الماوس الرواية مع اثنين من الوقف الصامتة (أولا التعرض الماوس رواية). تم تنظيف الجهاز ثلاثة غرفة بين الفئران.
وقد استخدم المهمة نهج الاجتماعية كما التعود للقيام بهذه المهمة الذاكرة الاجتماعية، 3   ساعة بعد المرحلة الأولى (التعرض 3 دقيقة)، وضعت الماوس مرة أخرى إلى الجهاز لمدة 3 آخر   دقيقة (المرحلة الثانية)، وخلالها كوب واحد يحتوي على الماوس على دراية والآخر يحتوي على الماوس الرواية. ويوازن مواقف الماوس على دراية ورواية خلال المراحل 1 و 2 داخل وبين المجموعات لاستبعاد احتمال الآثار الموضعية، فيما أبقي على نفسه لحيوان معين. تم تحليل قدرة التمييز (ذاكرة الاجتماعية) باستخدام الصيغة: D2 = (ب-أ) / (ب + أ)، أما بالنسبة لاختبار التعرف على الأشياء.
رائحة التعود-إزالة التعود

تم إجراء هذا الاختبار كما هو موضح. 40
إجراءات البيوكيميائية ومناعى

ذكر ADNP + / - وADNP + / + تتزاحم (النوع البري) الفئران (5- 6 أشهر من العمر) ومقطوعة الرأس، تم تشريح الحصين، المجمدة في النيتروجين السائل والحفاظ مجمدة (-80   درجة مئوية) حتى مزيد من المعالجة. تم استخراج الحمض النووي الريبي والبروتينات باستخدام Macherey-ناجل NucleoSpin RNA / مجموعة البروتين (بيت لحم، PA، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تحديد نقاء RNA والتركيز مع معمل (معمل NanoDrop تكنولوجيز، ويلمنجتون، DE، الولايات المتحدة الأمريكية). وقدرت كمية البروتين البروتين عدة BCA-200 (بيرس، روكفورد، IL، الولايات المتحدة الأمريكية). وقد أجريت تجربة RNA الكمي إضافية على كمية محدودة من النصوص في الفئران الأكبر سنا (ذكور الفئران عمره 9 أشهر). قبل استخراج الحمض النووي الريبي الحصين، عولجت الفئران عمره 9 أشهر = 5 لكل مجموعة) مع سيارة (المحددة أعلاه)، وتعرضوا للاختبارات سلوكية على النحو المبين في أرقام 1 و 2.
الشكل 1.

ADNP + / - تختلف عن ADNP + / + الفئران الذكور: التعرف على الأشياء، والتفاعلات الاجتماعية والانقسام الجنسي. وأظهرت أداء الحيوان في اختبار التعرف على وجوه = 16-18 لكل مجموعة من المجموعات الذكور، ن = 11 لكل مجموعة من المجموعات النسائية). (أ، ب) ADNP + / - ذكور الفئران تعاني من نقص في التعرف على الأشياء. وقد قدمت أول كائنين متطابقة، وحل محله أحد الكائنات مماثلة من قبل كائن الرواية 3   ساعة بعد استنشاق شيء مألوف (خيار الاحتفاظ قصيرة) (أ) أو في اليوم التالي (24 ~   ح في وقت لاحق، واختيار الاحتفاظ الطويل) (ب). يتم التعبير عن البيانات كما يعني (± SEM) من قبل مؤشر التمييز النسبي (D2 = (ب-أ) / (ب + أ)، (ب) = المرات استنشاق جسم الرواية، و= المرات استنشاق جسم مألوف ). وكشف تحليل اتجاهين التباين (ANOVA) عدم وجود فروق كبيرة في اختيار الاحتفاظ قصيرة (أ). في اختيار الاحتفاظ طويلة (ب)، وأظهرت في اتجاهين ANOVA تأثير كبير في التركيب الوراثي فقط في مجموعة الذكور (F (1،49) = 5.022، P = 0.030). ذكور الفئران التي تعاني من نقص ADNP قضى وقتا أقل بكثير (> 2-أضعاف) في استكشاف وجوه جديدة بالمقارنة مع السيطرة على الفئران (ADNP + / +). كشفت آخر LSD اختبار خاص فيشر فرق كبير بين ADNP + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP + / + الفئران (* P <0.05). (ج) وقت الشم من كوب فارغ ورواية اختبار الاعتراف الماوس الاجتماعي. يتم التعبير عن البيانات كما يعني (± SEM) الوقت الإجمالي (ق) قضى استكشاف الفئران أو الكائنات. واستخدم قفص ثلاثة غرفة. اتجاهين التدبير المتكررة ANOVA مع مجموعة كعامل الثابتة ومشموم البند (أي الفأرة مقابل كوب) كما كشفت عامل تكرار أي تأثير الرئيسي لمجموعة (F (3،48) = 1.051، P = 0.379) على الوقت شم فترات ماوس رواية والكأس. ومع ذلك، تم العثور على التأثير الرئيسي لهذا البند مشموم (F (1،48) = 75.761، P <0.001)، مما يدل على تفضيل قوي للماوس رواية على الكأس. بالإضافة إلى ذلك، مشموم تأثير التفاعل بين مجموعة × تم العثور على بند (F (3،48) = 3.296، P = 0.028). وكشف اختبار آخر LSD خاصة فيشر فروق ذات دلالة إحصائية بين استنشاق الفترة الزمنية من الكأس والماوس في جميع الفئات (* P <0.05، * * * P <0.001 مقابل كوب في نفس المجموعة، ذكرا كان أو أنثى). كشفت Bonferroni آخر اختبار خاص فروق ذات دلالة إحصائية بين استنشاق الفترة الزمنية من الكأس والماوس في جميع الفئات (* * P <0.01) باستثناء ADNP + / - الإناث (P = 0.18). كانت المرة استنشاق الماوس في المجموعة الأخيرة أقل بكثير مما كانت عليه في ADNP + / - الذكور (# P <0.05)، مع عدم وجود تغيير في الوقت استنشاق الكأس (P> 0.99 بعد التعديل للمقارنات متعددة). (د) ADNP + / - الفئران عرض انخفاضا كبيرا في الذاكرة الاجتماعية. وأظهرت أداء الحيوان في اختبار الذاكرة الاجتماعية (3   ساعة بعد التعرض الأصلي 3 دقيقة). يتم التعبير عن البيانات كما يعني (± SEM) الوقت الإجمالي (ق) قضى استكشاف الماوس أخرى وفقا لما تقرره مؤشر نسبي التمييز (ب = الوقت استنشاق ماوس رواية، و= الوقت استنشاق ماوس مألوفة. إجمالي الوقت المسموح به للاستنشاق في كان التعرض الثاني 3   دقيقة). في اختبار الذاكرة الاجتماعية، أنفقت من الذكور والإناث الفئران التي تعاني من نقص كبير ADNP وقت أقل استكشاف الماوس رواية بالمقارنة مع السيطرة على الفئران (ADNP + / +). أظهر ANOVA اتجاهين تأثير كبير الوراثي (F (1،47) = 31.357، P <0.001) في اختبار الذاكرة الاجتماعية (ADNP + / + مقابل ADNP + / - الفئران)، لكن ليس له تأثير الجنس العامة (الذكور مقابل الإناث )، (F (1،47) = 1.563، P = 0.217). وكشف اختبار آخر LSD خاصة فيشر فرق كبير بين النمط الجيني ADNP + / + وADNP + / - في المجموعة الذكور (* * * P <0.001)، وكذلك في مجموعة الإناث (* P <0.05)؛ كان هناك أيضا تأثير الجنس كبير في ADNP + / + مجموعة (* P = 0.05 الذكور مقابل الإناث). ADNP، التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين. LSD، الفارق الأقل أهمية.
الرقم الكامل وأسطورة (117 K)

الرقم 2.

رائحة التعود / إزالة التعود سليمة في ADNP + / - ICR نموذج اظهار الانقسام الجنسي. تم اختبار كل فأر خلال ثلاث فترات 2-مين متتالية لكل رائحة مع فترات 2-دقيقة بين العروض التقديمية. وسجلت الوقت الذي الماوس رائحة مسحة (البداية عندما الحيوان موجهة الخياشيم تجاه مسحة القطن المعطرة رائحة، في غضون 2   سم أو أقل). ذكر ADNP + / + الفئران أداء أفضل في اختبار رائحة التعود / إزالة التعود مقارنة مع الإناث ADNP + / + الفئران. * * * P <0.001، * P <0.05 مقابل الإناث في نفس المحاكمة، تي -test # # P < 0.01 مقابل استنشاق السابق (رواية مقابل رائحة مألوفة). ADNP، التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين.
الرقم الكامل وأسطورة (127 K)

مناعي

البروتينات (400-500   ميكروغرام) والمستخرج من الحصين ومخففة في تحلل العازلة لمزيد من مناعي باستخدام بروتوكول COIP مجموعة (بيرس). تم تحميل عشرين ميكرولتر من الخرز A / G PLUS-الاغاروز إلى عمود غسلها مع العازلة اقتران في 90   ز ل1   دقيقة. أضيفت عشرة ميكروغرام من أرنب الماوس ADNP الأجسام المضادة (مختبرات Bethyl، مونتغمري، TX، الولايات المتحدة الأمريكية) إلى الخرز وحضنت ل1   ساعة عند 24   ° C. عبر ربط باستخدام 2.5   وقد أجريت م M disuccinimidyl suberate عن طريق زيادة 1   ح الحضانة. ثم طهرت 500   أضيفت ميكروغرام من المحللة المخ إلى العمود وحضنت (16   ح، 4   درجة مئوية). للكشف عن مستضد مزال، تم فصل البروتينات عن طريق الكهربائي على 15٪ هلام الأكريلاميد تحتوي على 0.1٪ SDS، 10 تحويلها إلى مرشح النيتروسليلوز (ميليبور، بيدفورد، MA، الولايات المتحدة الأمريكية) وimmunostained مع الأرنب بولكلونل الأجسام المضادة ضد الماوس eIF4E (1: 500)، (هدية عينية من أستاذ أورنا إلروي-شتاين، جامعة تل أبيب). 41 تم تصور البروتينات باستخدام الكواشف تعزيز التوهج والتعرض لhyperfilm (كوداك، بتاح تكفا، إسرائيل). وتم قياس كمية البروتين العصابات على hyperfilm باستخدام تحليل photochromatography.
الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR

كميات متساوية من الحمض النووي الريبي مجموع (1   تعرض ميكروغرام RNA / عينة، تم الحصول عليها من الفئران عمره 6 أشهر) لعكس النسخ (RT) باستخدام أدوات qScript كدنا] التجميعي (كوانتا العلوم البيولوجية، غايثرسبيرغ، MD، الولايات المتحدة الأمريكية). في الوقت الحقيقي أجريت PCR باستخدام بالطاقة SYBR الخضراء PCR مزيج الرئيسي (كابا تكنولوجيز، برن، MA، الولايات المتحدة الأمريكية) وABI PRISM 7900 تسلسل نظام الكشف عن الصك والبرمجيات (النظم البيولوجية التطبيقية، فوستر سيتي، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تحديد مستويات التعبير RNA باستخدام بادئات الماوس محددة: الشعور eIF4E 5'-TCTGGCTAGAGACACTGCTG-3 '، ومكافحة الشعور 5'-AGTCCATATTGCTATCTTATCACC-3، الاشعال APOE بمعنى 5'-ACCGCTTCTGGGATTACCT-3'، ومكافحة الشعور 5'-ATCAGTGCCGTCAGTTCTT- 3 "، ADNP الشعور 5'-ACGAAAAATCAGGACTATCGG-3 '، ومكافحة الشعور 5'-GGACATTCCGGAAATGACTTT-3"، ADNP2 الشعور 5'-GGAAAGAAGCGAGATACCG-3'، ومكافحة الشعور 5'-TCCTGGTCAGCCTCATCTTC-3 ". Neuroligin تم تصميم (1-4) الاشعال واستخدامها كما هو موضح من قبل. 42 وقد تم اختيار فسفوريبوزيل هيبوزانتين-جوانين باسم الجينات المرجعية مع الاشعال المناسبة للماوس الشعور 5'-GGATTTGAATCACGTTTGTGTC-3 '، ومكافحة الشعور 5'-AACTTGCGCTCATCTTAGGC-3 ". يتم عرض النتائج على هيئة2 - ΔCT ( http://de-de.invitrogen.com/etc/medialib/en/filelibrary/Nucleic-Acid-Amplification-Expression-Profiling/PDFs.Par.83765.File.dat/relative-quant-ct.pdf ). 43
المعلوماتية الحيوية

وقد استخدم ADNP تحليل تسلسل للتعرف على إجماع KclYcnyLp وcekYkpgVLL -elF4E المواقع كما في الكتابات المنشورة ملزمة. 44
التحليل الاحصائي

(وهذا هو، كوب مقابل ماوس رواية) كعامل المتكررة، وكان يستخدم في اتجاهين تحليل التدابير المتكررة التباين، تليها اختبار الفرق الأقل أهمية فيشر، مع مجموعة كعامل ثابت (المجموعة) ومشموم البند لتحليل البيانات في مهمة التعرف الاجتماعية. في جميع القياسات أخرى، تم استخدام تحليل التباين الثنائي تليها أقل فرق كبير فيشر. تحليل التباين الأحادي أو تي الطالب -test كانت تستخدم عند الحاجة. أجريت جميع التحاليل مع برنامج SigmaPlot (شيكاغو، IL، الولايات المتحدة الأمريكية) لنظام التشغيل Windows.

أعلى الصفحة النتائج

ADNP التعبير التضمين السلوك بطريقة جنسية التي تعتمد على: ADNP + / - الذكور، ولكن لا تعرض الفئران الإناث العجز في التعرف على الأشياء

لم ADNP الفئران haploinsufficient لا تختلف في سلوكها حقل مفتوح 38 (لا تظهر البيانات). في المقابل، في حين لم يكن هناك اختلاف في اختيار الاحتفاظ قصيرة الأجل (3   ح، الشكل 1A)، في اختيار الاحتفاظ على المدى الطويل، قضى ADNP + / + الفئران الذكور أكبر من الضعف الوقت مع موضوع الرواية، مقارنة مع ADNP + / - تتزاحم الذكور. وهكذا، لوحظ وجود عجز محتمل في الذاكرة أو تكرار السلوك نوعا ما، وتفضيل حالة مألوفة مع نقص ADNP ( الشكل 1B). وعلى النقيض من الذكور، لم يكن هناك اختلاف التركيب الوراثي في ​​الإناث يمثلون فرق كبير الجنس ( الشكل 1B).
ADNP + / - الفئران تبدي الفروق بين الجنسين في الاعتراف الاجتماعي

عند المقارنة بين تفضيل كائن جماد إلى ماوس (ذكور، في حالة الذكور، والإناث، في حالة من الإناث)، وكلها ذكور الحيوانات على كوب فارغ (فضل الشكل 1C)، واظهار يعد استنشاق فترات مع الحيوان. تم اكتشاف اختلاف كبير الجنس، مع ADNP + / - الإناث، والتي تبين سوى الاتجاه من كونها أكثر اهتماما في الحيوان على كوب فارغ (المتناقضة ADNP + / + إناث) وكونها أقل اهتماما اجتماعيا (2 أضعاف أقل وقت التفاعل مع الماوس امرأة أخرى مقارنة مع الذكور). مقارنة الذكور مع الإناث، يمكن أن يكون أن ADNP + / - ذكور تعاني من نقص في التعلم على التعرف على الحيوانات الأخرى، وبالتالي لا تزال مستمرة زيادة الوقت تفاعلها، في حين أن الإناث قد يتعرف بسرعة، وبالتالي يحمل سلوك أقل اهتماما.
ADNP + / - عرض ذكور الفئران تفضيل كبير للماوس على دراية وليس رواية واحدة (انخفاض الذاكرة الاجتماعية)

في اختبار الذاكرة الاجتماعي، كان هناك اختلاف الجنس كبير في السيطرة على الفئران، مع الذكور يفضلون الماوس الرواية والإناث تظهر أي تفضيل ( 1D الشكل). لم يكن لوحظ هذا في ADNP + / - الفئران، وهذا هو، ADNP + / - ذكور الفئران تتصرف مثل ADNP + / - الإناث ولكن على عكس ADNP + / + الذكور. وهكذا، كما رأينا في اختبار التعرف على الأشياء، ADNP + / - أظهرت الفئران الذكور أفضلية هامة للغاية إلى ما هو مألوف خلال الماوس الرواية، والعكس إلى ADNP + / + الفئران. وبالمثل، ADNP + / - يفضل إناث الفئران أيضا الأنثى مألوفة. في التجارب السابقة، ADNP الفطرية + / - الفئران الذكور (وليس تزاوج مع الفئران ICR 12، 33) أظهرت أيضا العجز في الذاكرة الاجتماعية. ومع ذلك، لا يمكن تكرار هذه التجارب في نفس الطريق (ساحة مفتوحة)، كخلفية ICR المستخدمة هنا أسفرت الفئران عدوانية جدا، والإمكانية الوحيدة لأداء الاختبارات كانت الماوس التفاعل مع الفئران موضوعة في حجرة معزولة.
ADNP + / - أظهرت الفئران رائحة سليمة التعود-إزالة التعود

رائحة التعود-إزالة التعود قياس معلمتين بما في ذلك (1) وظيفة حاسة الشم سليمة و(2) الذاكرة الشمية. هنا، مقارنات الجنس يكشف فروق ذات دلالة إحصائية بين الذكور والإناث في المجموعات ADNP سليمة وناقصة، مع الذكور فقط تظهر سليمة رائحة التعود-إزالة التعود والهوية كاملة بين ADNP الذكور + / - وADNP - / - الجماعات، وهذا هو، لا الوراثي الاختلافات ( الشكل 2). وبالتالي، يمكن أن يعزى الفروق الملحوظة أعلاه للاضطراب العاطفي المعرفي / فصل من الذاكرة الشمية.
آلية المرتبطة بالتوحد: ترجمة حقيقية النواة عامل بدء 4E (eIF4E)

وتناول نشر مؤخرا آليات مركزية من أي إس دي إس وأظهرت أن overexpression من بدء ترجمة حقيقية النواة عامل 4E (eIF4E) أدى إلى ASD تشبه النمط الظاهري. 42
حددت المعلوماتية الحيوية اثنين eIF4E المفترضة تسلسل عزر ملزمة للADNP تسلسل البروتين KclYcnyLp وcekYkpgVLL -elF4E مواقع الربط 44 ( الشكل 3A). هذه المتتاليات توريط ADNP كمنظم المحتمل للترجمة البروتين في السيتوبلازم العصبية والدبقية 23، 44 من خلال التفاعل elF4E. تحليل elF4E التعبير النشاف الغربي ( الشكل 3B) كشفت زيادة البروتين التعبير في حصين ADNP + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP + / + الفئران الذكور ( الشكل 3B، الممرات 1 مقارنة مع 2 و 5 مقارنة مع 7، تجربتين مستقلة). أظهر المشارك مناعي مع الأجسام المضادة ADNP تليها تحليل الغربية مع eIF4E الأجسام المضادة هطول elF4E معين إلا في وجود أجسام مضادة ADNP (الممرات 3،4،6 و 8)، مع زيادة هطول الأمطار في ADNP + / - الفئران كما هو متوقع من العموم استخراج النتائج. وقد تأكدت هذه النتائج على مستوى الحمض النووي الريبي الكمي في الوقت الحقيقي RT-PCR. وزادت كميات الحصين elF4E مرنا (أعربت نسبة إلى كمية من هيبوزانتين جوانين فسفوريبوزيل) بشكل ملحوظ بنسبة 25٪ في ADNP + / - الفئران مقارنة مع ADNP + / + الفئران ( الشكل 4A).
الرقم 3.

تحديد والتحقق من مواقع التفاعل ADNP وeIF4E. (أ) رسم تخطيطي لبروتين eIF4e توقع زخارف ملزمة للADNP البشري. 10، 44 (ب) ADNP والتفاعل eIF4E. واستخدمت المقايسات المشترك مناعي لتحليل ADNP وeIF4E ملزمة. الممرات 1،5: 20   ميكروغرام من المحللة الدماغ من ADNP + / + ذكور الفئران والممرات 2،7: 20   ميكروغرام من المحللة الدماغ من ADNP + / - ذكور الفئران immunoblotted مع الأجسام المضادة لمكافحة eIF4E. حارة 3: 500   ميكروغرام من المحللة دماغ ADNP + / + ذكور الفئران وحارة 4: 500   ميكروغرام من المحللة دماغ ADNP + / - تم immunoprecipitated ذكور الفئران مع مكافحة ADNP الأجسام المضادة وimmunoblotted مع الأجسام المضادة لمكافحة eIF4E. حارة 6: 500   ميكروغرام من المحللة دماغ ADNP + / + وحارة 8: 500   ميكروغرام من المحللة دماغ ADNP + / - تم immunoprecipitated الفئران دون الأجسام المضادة وimmunoblotted مع الأجسام المضادة لمكافحة eIF4E. ADNP، التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين.
الرقم الكامل وأسطورة (173 K)

الرقم 4.

التوحد محددة تعديل الجينات في حصين ADNP + / - الفئران: الانقسام الجنسي. تم تحليل الحمض النووي الريبي الحصين من الفئران البالغ من العمر 6 اشهر 5- عليها الكمي في الوقت الحقيقي PCR = 6-8 الفئران في كل مجموعة). (أ) eIF4E: أظهر تحليل اتجاهين التباين (ANOVA) ليس له تأثير كبير الجنس (P = 0.692) وراثى (P = 0.137). لكن، وكما كان هناك اتجاه الوراثي هامشية، وكان أداؤها في اتجاه واحد ANOVA أيضا تظهر زيادة كبيرة في محاضر eIF4E في ADNP + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP + / + الفئران الذكور (# P <0.05). (ب) ADNP: أظهرت اتجاهين ANOVA تأثير كبير من الجنس (F (1،15) = 8.760، P = 0.010) ولها تأثير كبير في التركيب الوراثي (F (1،15) = 14.660، P = 0.002). كشفت آخر LSD اختبار خاص فيشر كبير إلى انخفاض 2 أضعاف في ADNP + / - ذكور الفئران مقارنة مع السيطرة على الفئران (* * * P <0.001). بالإضافة إلى ذلك، كشفت آخر LSD اختبار خاص فيشر زيادة بنسبة 2 أضعاف كبيرة في ADNP + / + ذكور الفئران مقارنة مع ADNP + / + إناث الفئران (* P <0.05). (ج) ADNP الإنسان: ADNP الإنسان الحصين تستخدم قبل 30 تم تحليل مقارنة الذكور والإناث. كما لم يكن هناك اختلاف في مستويات النص ADNP بين المواضيع العادية والفصام، وكان يتم تجميع الأفواج للحصول على 22 رجلا وست نساء. وأظهرت النتائج زيادة ذات دلالة إحصائية عند الرجال (الطالب ر -test، * P <0.05). (د) ADNP2: اتجاهين أظهرت ANOVA ليس له تأثير كبير الجنس (P = 0.977) وليس له تأثير كبير في التركيب الوراثي (P = 0.498). (ه) APOE: في اتجاهين أظهر ANOVA تأثير كبير من الجنس (F (1،23) = 128،734، P <0.001) ولها تأثير كبير في التركيب الوراثي (F (1،23) = 13.430، P = 0.001). كشفت آخر LSD اختبار خاص فيشر زيادة بنسبة 2 أضعاف كبيرة في ADNP + / - إناث الفئران مقارنة مع ADNP + / + إناث الفئران (* * * P <0.001). بالإضافة إلى ذلك، كشف اختبار آخر LSD خاصة فيشر انخفاضا كبيرا للغاية في ذكور الفئران مقارنة مع إناث الفئران على حد سواء ADNP + / + وADNP + / - (* * * P <0.001). في اتجاه واحد وأظهر ANOVA انخفاض ملحوظ في ADNP + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP + / + الفئران (# P <0.05). (و) ذكور الفئران القديمة تسعة أشهر، eIF4E: لا تأثير التركيب الوراثي المحدد، على عكس (أ) 5- ل6 أشهر من العمر. ADNP، التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين. LSD، الفارق الأقل أهمية.
الرقم الكامل وأسطورة (102 K)

ADNP التعبير الحصين يسلك إزدواج الشكل الجنسي الصارخ

نظرا للاختلافات الجنس والتركيب الوراثي في ADNP + / - الفئران، ونحن مهتمون لمعرفة ما إذا ADNP التعبير في قرن آمون، وهي منطقة الدماغ المرتبطة مباشرة مع التعلم والذاكرة التي تعتمد على الجنس. أوحينا، لأول مرة، وانخفاض معنوي 2 أضعاف ADNP التعبير في قرن آمون الإناث، على غرار النقص المرتبط الوراثي في ADNP + / - الذكور، مع انخفاض الوراثي (ADNP haploinsufficiency) في الإناث كونها تافهة ( الشكل 4B). ليعكس هذا الاختلاف الجنسي للرجال، قمنا إعادة تقييم البيانات السابقة لدينا أيضا في الأنسجة الحصين الإنسان بعد الوفاة 25، 30 اكتشاف نفس الاختلاف بين الجنسين، مع الذكور التعبير عن ~ 25٪ أكثر نص ADNP من الإناث ( الشكل 4C). وعلى النقيض من ADNP، لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية في ADNP2 ذات الصلة ( الشكل 4D)، والاتفاق مع نتائجنا السابقة تظهر أي تأثير الوراثي-ADNP نقص من ADNP2 التعبير. 45 APOE، الجين خطر رئيسي لAD، وهو ما ثبت أن قمعها من قبل ADNP أثناء التطور الجنيني، 13 وانخفضت مرتين في الذكور مقارنة مع الإناث (الشكل 4E)، المتناقضة زيادة ADNP قرن آمون في الذكور (الشكل 4B). ومع ذلك، فإن نقص ADNP لا يؤدي إلى زيادة APOE في الذكور، بدلا من ذلك، لوحظ وجود انخفاض طفيف، مما يشير إلى آليات تعويضية. مقارنة مع الذكور، ADNP + / + إناث، كشفت تضاعف محتوى APOE-نص الذي تضاعف أكثر في ADNP + / - الإناث (الشكل 4E).
أجريت جميع التجارب المذكورة أعلاه في 5- إلى 6 أشهر من العمر الفئران. استخدمت تجربة متابعة عمره 9 أشهر بين الذكور والفئران تبين عدم وجود تأثير التركيب الوراثي للeIF4E في الفئران الأكبر سنا (الشكل 4F) بالإضافة إلى انخفاض كبير في مستويات eIF4E النص بين ADNP + / + 'الشباب' ذكور الفئران وADNP + / + "القديم" الفئران الذكور (P = 0.001، وإرفاقها ر -test، مقارنة الشكل 4F إلى الشكل 4A)، لوحظ وجود انخفاض سن تعتمد مماثل أيضا في ADNP + / - الفئران (P = 0.001، وإرفاقها ر -test ).
وأخيرا، تم اقتراح تشوهات في neuroligins، (NLGNs)، والتي هي المصب لelF4E، كما سببية للتوحد 42 مع جمعية جنس معين من المتغيرات مشتركة من الجينات neuroligin (NLGN3 وNLGN4X) مع ASD. 46 لذلك فإننا التحقيق في neuroligin 4 تعبير نص في ADNP + / - بالمقارنة مع ADNP + / + الذكور والإناث الفئران، على التوالي، في 5-6 أشهر من العمر (أرقام 5A-د). بينما النتائج لم تظهر التغييرات المرتبطة الوراثي في ذكور أو إناث، كانت هناك اختلافات الجنس كبيرة مع زيادات كبيرة في NLGN1 و3 (أرقام 5A-ج) وانخفاض في NLGN4 (الشكل 5D) في ADNP + / - الإناث مقارنة للذكور. لم NLGN2 لا تظهر الاختلافات (الشكل 5B)، في حين أظهرت أيضا زيادة NLGN1 التعبير في التحكم (ADNP + / +) ذكور، مقارنة مع الإناث التحكم (الشكل 5A).
الرقم 5.

عرض Neuroligins التعبير التي تعتمد على الجنس. تم تحليل الحمض النووي الريبي الحصين من الفئران من العمر 6 أشهر 5 لمن الكمية في الوقت الحقيقي PCR = 6-8 الفئران في كل مجموعة). وقورنت 4 NGLN الجينات. (أ) NGLN1: أظهر تحليل التباين الثنائي (ANOVA) تأثير كبير من الجنس (F (1،26) = 16.754، P <0.001)، ولكن ليس له تأثير كبير في التركيب الوراثي (P = 0.561). LSD فيشر اللاحق كشف اختبار فرق كبير بين ذكور الفئران مقارنة مع الفئران الإناث على حد سواء ADNP + / + وADNP + / - (* P <0.05). (ب) NGLN2: في اتجاهين ANOVA أظهرت أثرا مهما للجنس (P = 0.777) وليس له تأثير كبير في التركيب الوراثي (P = 0.450). (ج) NGLN3: في اتجاهين أظهر ANOVA تأثير كبير من الجنس (F (1،24) = 7.800، P = 0.010)، ولكن ليس له تأثير كبير في التركيب الوراثي (P = 0.771). LSD فيشر اللاحق كشف اختبار فرق كبير بين ADNP + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP + / - إناث الفئران (* P <0.05). (د) NGLN4: في اتجاهين أظهر ANOVA تأثير كبير من الجنس (F (1،25) = 12.258، P = 0.002)، ولكن ليس له تأثير كبير في التركيب الوراثي (P = 0.482). LSD فيشر اللاحق كشف اختبار فرق كبير بين ADNP + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP + / - إناث الفئران (* P <0.05). (ه) ذكور الفئران من العمر تسعة أشهر، NGLN1: لا تأثير النمط الجيني محددة، مثل (أ) 5- ل6 أشهر من العمر. (و) ذكور الفئران من العمر تسعة أشهر، NGLN2. (ز) ذكور الفئران القديمة تسعة أشهر، NGLN3. (ح) ذكور الفئران القديمة تسعة أشهر، NGLN4. ADNP، التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين. LSD، الفارق الأقل أهمية.
الرقم الكامل وأسطورة (124 K)

وأشارت تجربة المتابعة على الفئران الذكور عمره 9 أشهر أي تغييرات المرتبطة الوراثي، كما وجدت للفئران الشباب (أرقام 5A-ح). تحليل للفرق التي تعتمد على العمر وكشف أي تغيير في NLGN3 وNLGN4 ومع ذلك، تم العثور على خفض تعتمد على سن كبير لنسخة NLGN1 مقارنة ADNP + / + 'الشباب' مقابل ذكور الفئران "القديم" (P = 0.023، وإرفاقها ر - اختبار، أرقام 5A وه) وعلاوة على ذلك، لوحظ وجود انخفاض سن يتوقف كبير لNLGN2 محاضر في ADNP "القديم" + / - الفئران الذكور مقارنة مع ADNP 'الشباب' + / - الفئران الذكور (P = 0.049، وإرفاقها ر -test ، الأرقام 5B و f).

أعلى الصفحة نقاش

من النتائج المفاجئة الأكبر من العمل الحالي ان تضاعف التعبير الحصين من ADNP في الذكور مقابل الماوس الإناث التي تم العثور عليها لمحاكاة الدماغ البشري بعد الوفاة، تليها انخفاض مزدوج في ADNP haploinsufficient الذكور، وليس انخفاضا كبيرا في وADNP + / - الإناث. الزيادة في ADNP التعبير يتوازى الأداء السلوكي المحسن في ADNP الذكور سليمة مقارنة مع الإناث في مهمة الذاكرة الاجتماعية، وتقديم التمييز حاسة الشم سليمة. في المقابل، أدى ADNP haploinsufficiency في ضعف الادراك شديد في الذكور مع الإناث بمنأى إلى حد ما في اختبار التعرف على الأشياء، ومحاكاة النتائج في الأطفال الذين يعانون من الطفرات ADNP مع المريضات أربع تظهر الإعاقة الذهنية الخفيفة، في حين أن معظم الذكور (خمسة من ستة) تظهر الإعاقة الذهنية الشديدة. 6
ومن المهم أيضا أن نضع في الاعتبار أن لدينا مستعمرة، الأباعد مع الفئران مجلس النواب، لا يزال يظهر آثار سلوكية كبيرة في ADNP + / - الذكور، والتي تورط تأثير الوراثي قوي، كما هو متوقع من الدراسات البشرية. وترد هذه النتائج أيضا في الإناث، مع ADNP + / - الفئران تتجه معنويا فقط يفضلون الفئران على الأجسام في اختبار الاعتراف الاجتماعي، على عكس ADNP + / + إناث والذكور. الفرق بين الجنسين في الحصين التعبير ADNP هو أكثر إثارة للانتباه عند مقارنتها مع النتائج السابقة في النواة المقوسة من منطقة ما تحت المهاد التي تبين النتيجة المعاكس، مع ADNP انخفضت التعبير في الذكور ومراقبة دورة وداقية التي تنطوي على تأثيرات الإستروجين. 36 وفي هذا الصدد، ADNP هو جزء من SWI / لونين SNF إعادة عرض تعقيدا 47 بما في ذلك BAF57 تنظم تحديدا مستقبلات هرمون الاستروجين α (ER α) النسخ بوساطة 48، وتبين ADNP لتنظيم التعبير الخاص بها. 13، 49 فضلا عن ذلك، ADNP-التفاعل SWI / SNF عضو BRG1، يتفاعل أيضا مع الاندروجين الذاتية مستقبلات تستجيب المروجين 50 وتشارك كل من BRG1 وBAF57 في تعزيز نشاط مستقبلات الاندروجين. 51 وتشير دراساتنا التفاعل المباشر من ADNP في هذه العمليات، موضحا في جزء الاختلاف الجنسي المرتبطة ADNP راثى -deficient.
دراسة الإنسان على الأطفال الذين يعانون من التوحد تظهر من جديد الطفرات في ADNP المشار إليها ADNP باعتبارها SWI / عضو الجبهة الوطنية الصومالية 6 مع توطين النووية السائد، كما أشارت الدراسات الأصلية لدينا. 47 نحن يعرض حاليا على تفاعل ADNP مع eIF4E حشوية وزيادة eIF4E التعبير في قرن آمون من ADNP البالغ من العمر 6 اشهر 5- إلى + / -. الماوس الذكور، الذي كان قد اقترح كما السببية لASD 42 ومن المثير للاهتمام، وهذا التعبير زيادة eIF4E لم تستمر في 9 أشهر من العمر، والذي اقترن ل قد انخفضت بشكل عام eIF4E التعبير في الفئران الأكبر سنا. هذه النتائج قد تكون ذات صلة إلى حقيقة أن تخليق البروتين الكلي يتناقص مع المخ من الشيخوخة 52، 53 بالإضافة إلى حقيقة أن التوحد هو اضطراب يصيب المبكر يرتبط مع رفع القيود خلال التنمية.
إلى جانب elF4E، يتفاعل ADNP مع العديد من البروتينات الأخرى، بما في ذلك قوات الأمن الفلسطينية (عامل تاو الربط) 54 وكلا PSF وelF4E يتم فسفرته التي كتبها MNK كيناز. 55 وهكذا، ADNP ملزم إما البروتين قد تؤثر الفسفرة وتفعيل حالة eIF4E، وهو المرتبطة بتنظيم الترجمة.
تم العثور على إزدواج الشكل الجنسي أيضا على مستوى neuroligin التعبير، تبين ان تكون ينظمها eIF4E. 42 وعلاوة على ذلك، تم تحديد إزدواج الشكل الجنسي دراماتيكية في التعبير عن APOE مما يشير إلى تأثير أوسع من ADNP على التوحد والجينات ذات الصلة م. مع APOE يجري الجين خطر رئيسي لAD، يتم إجراء اتصال لأعلى خطر AD في الأفراد الذين يعانون من التوحد.
الزيادة الكبيرة للغاية من APOE التعبير في قرن آمون الإناث مقترنة إلى زيادة في ADNP + / - قد تكون مرتبطة الإناث مع زيادة انتشار AD عند النساء مقارنة مع الرجال. 5 وعلاوة على ذلك، neuroligin1 (الضعف في الحصين الماوس الإناث مقارنة مع الذكور ) يتفاعل مع اميلويد بيتا الببتيد لزيادة تشكيل oligomers بيتا اميلويد، 56 حالة مرضية رئيسيا في AD. ومن المثير للاهتمام، في الفئران الأكبر سنا (9 مقابل 5-6 أشهر من العمر)، تم العثور على خفض كبير في محضر NLGN1 مما يشير إلى أن الزيادات في neuroligin1 قد تكون ذات صلة إلى المراحل الأولى من AD.
وقد تبين أن الأمراض الرئيسي الثاني في AD، تاو hyperphosphorylation وتراكم تاو التشابك الليفي العصبي أن تكون جزءا من أمراض الفئران ADNP التي تعاني من نقص. 12 وبالإضافة إلى ذلك، زيادة أولية في ADNP التعبير، يعقبه انخفاض هائل المرتبط بالشيخوخة ، التنبؤ تاو علم الأمراض في الفئران مع ADNP التفاعل مع تاو مرنا الربط. 54، 57 كما هو مبين أعلاه، البروتينات شاملة حددت ADNP كما انخفض البروتين الوحيد في مصل المرضى ميلادي مقارنة مع الضوابط. 35
الدراسة الحالية تضع العلاج ببدائل ADNP كهدف رئيسي للمخدرات. وADNP المشتقة، وثمانية من الأحماض الأمينية الببتيد اعصاب NAP (davunetide)، الحماية من نتائج نقص ADNP في الفطرية ADNP + / - الماوس، وهذا هو، تاو علم الأمراض وإدراكيا 12 وقد أظهرت ومؤشرات إيجابية لزيادة الدرجات المعرفية في الشيخوخة المرضى معتدل المعرفي انخفاض القيمة. 58، 59، 60 على الرغم من أن برنامج العمل الوطني (davunetide) أظهرت وجود نشاط في الضعف الادراكي المعتدل، وكانت النتائج السريرية في فوق النووي التدريجي مرضى الشلل مخيبة للآمال. 61 وفي المقابل، في المرضى الذين يعانون مرض انفصام الشخصية، أشارت NAP (davunetide) معالجة حماية الأنشطة من الحياة اليومية 62 وظيفة خلايا الدماغ (القياسات التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي). 63 حددت النتائج الحالية خشبة المسرح مع نموذج من نقص ADNP أن يقدم نموذجا جديدا لل(1) فهم أفضل لدور المحوري للADNP في النمو العصبي والعصبية في الذكور والإناث، ويمهد الطريق ل(2) تحسين وتحسين NAP (davunetide) والمركبات ذات الصلة 18، 57 للتنمية المستقبلية المحتملة السريرية في ASD والوقاية من ظهور لاحق من AD، مع إيلاء الانتباه إلى الفروق بين الجنسين مثيرة نحو دقيق الطبية تدخل / الطب النفسي متعدية العقلاني.

أعلى الصفحة تضارب المصالح

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح.

أعلى الصفحة المراجع

  • Maenner MJ، رايس CE، Arneson CL، Cunniff C، Schieve LA، نجار LA آخرون. التأثير المحتمل لDSM-5 المعايير على طيف التوحد تقديرات انتشار الفوضى. JAMA الطب النفسي 2014؛ 71: 292-300. | المادة | مجلات | ISI |
  • جيلبرج C، E. Billstedt التوحد ومتلازمة اسبرجر: التعايش مع الاضطرابات السريرية الأخرى. اكتا Psychiatr Scand 2000؛ 102: 321-330. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • بينتو D، Pagnamenta AT، Klei L، Anney R، Merico D، R ريغان وآخرون. تأثير وظيفي من التباين العالمي في عدد النسخ النادرة في اضطرابات طيف التوحد. الطبيعة 2010؛ 466: 368-372. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • Talkowski ME، روزنفيلد JA، بلومنتال I، Pillalamarri V، شيانغ C، A Heilbut وآخرون. تسلسل شذوذ الكروموسومات يكشف مواضع النمو العصبي التي تمنح المخاطر عبر الحدود التشخيص. الخليوي 2012؛ 149: 525-537. | المادة | مجلات | CAS |
  • Mielke MM، Vemuri P، روكا WA. علم الأوبئة السريرية لمرض الزهايمر: تقييم الفروق بين الجنسين والمساواة بين الجنسين. كلين Epidemiol 2014؛ 6: 37-48. | المادة | مجلات |
  • Helsmoortel C، Vulto-فان Silfhout AT، كو BP، Vandeweyer G، غرف L، فان دن ده J وآخرون. A SWI / متلازمة المتعلقة SNF-التوحد الناجمة عن دي نوفو الطفرات في ADNP. نات جينيه عام 2014؛ 46: 380-384. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • O'Roak BJ، بيبس L، فو W، Egertson دينار، Stanaway IB، فيلبس IG آخرون. تعدد التسلسل المستهدف يحدد تحور الجينات متكرر في اضطرابات طيف التوحد. العلوم 2012؛ 338: 1619-1622. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • O'Roak BJ، بيبس L، Girirajan S، كاراكوتش E، كروم N، كو BP وآخرون. تكشف exomes التوحد متفرقة شبكة البروتين مترابطة للغاية من دي نوفو الطفرات. الطبيعة 2012؛ 485: 246-250. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • بسام M، Zamostiano R، ديفيدسون A، Pinhasov A، E جلعادي، بيرل O آخرون. التسلسل الكامل للبروتين جديد يحتوي على الببتيد اعصاب femtomolar المعتمد على النشاط. J نوروتشيم 1999؛ 72: 1283-1293. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • Zamostiano R، Pinhasov A، E جيلبر، Steingart RA، Seroussi E، E جلعادي وآخرون. الاستنساخ وتوصيف تعتمد على النشاط اعصاب البروتين البشري. J بيول كيم 2001؛ 276: 708-714. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • Pinhasov A، S ماندل، Torchinsky A، E جلعادي، Pittel Z، Goldsweig AM آخرون. . تعتمد على النشاط اعصاب البروتين: جين رواية ضروري لتشكيل الدماغ الدماغ بحوث الدماغ ديف الدقة 2003؛ 144: 83-90. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • Vulih-Shultzman I، Pinhasov A، S ماندل، Grigoriadis N، Touloumi O، Pittel Z آخرون. التي تعتمد على نشاط البروتين اعصاب قصاصة NAP يقلل تاو hyperphosphorylation ويعزز التعلم في رواية نموذج الفأر المعدل وراثيا. J Pharmacol إكسب ذر 2007؛ 323: 438-449. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • ماندل S، G Rechavi، Gozes I. تعتمد على آخر اعصاب البروتين (ADNP) تتفاعل بشكل مختلف مع لونين لتنظيم الجينات الأساسية للمرحلة التطور الجنيني. ديف بيول 2007؛ 303: 814-824. | المادة | مجلات | ISI | CAS |
  • أوقية S، إيفاشكو-Pachima Y، Gozes أولا ADNP الببتيد المشتقة، NAP ينظم بركة تويولين: الآثار المترتبة عن التغذية العصبية والأنشطة اعصاب. بلوس واحد 2012؛ 7: e51458. | المادة | مجلات |
  • Quraishe S، كوان CM، مظهر A. NAP (davunetide) ينقذ ضعف الخلايا العصبية في نموذج ذبابة الفاكهة من tauopathy. مول الطب النفسي 2013؛ 18: 834-842. | المادة | مجلات | ISI |
  • Shiryaev N، Jouroukhin Y، جلعادي E، E Polyzoidou، Grigoriadis NC، روزنمان H آخرون. NAP يحمي الذاكرة، ويزيد تاو القابلة للذوبان ويقلل تاو hyperphosphorylation في نموذج tauopathy. Neurobiol ديس 2009؛ 34: 381-388. | المادة | مجلات | ISI |
  • Gozes I، إرم T، Maryanovsky E، C Arviv، روزنبرج L، Schirer Y آخرون. رواية تويولين وتاو اعصاب شظايا تبادل أوجه التشابه الهيكلي مع NAP عقار مرشح (Davuentide). J الزهايمر ديس 2014؛ 40: S23-S36. | مجلات | ISI |
  • Gozes I، Schirer Y، عيدان-فيلدمان A، ديفيد M، فرمان العساف S. NAP حمض الفا لaminoisobutyric (IsoNAP). J مول Neurosci 2014؛ 52: 1-9. | المادة | مجلات | ISI |
  • أوقية S، Kapitansky O، Ivashco-Pachima Y، Malishkevich A، E جلعادي، Skalka N وآخرون. عزر NAP التي تعتمد على النشاط اعصاب البروتين (ADNP) ينظم العمود الفقري شجيري من خلال البروتينات ملزمة نهاية أنيبيب. مول الطب النفسي 2014؛ 19: 1115-1124. | المادة | مجلات | ISI |
  • Garbern JY، نيومان M، Trojanowski JQ، لي VM، فيلدمان G، نوريس JW آخرون. A الطفرة التي تؤثر على الصوديوم / مبادل بروتون، SLC9A6، يسبب التخلف العقلي مع تاو الترسيب. الدماغ عام 2010؛ 133: 1391-1402. | المادة | مجلات | ISI |
  • Latapy C، Rioux V، غيتون MJ، بوليو JM. حذف مختارة من الدماغ الأمامي الجليكوجين سينسيز كيناز 3beta يكشف دورا مركزيا في القلق الحساسة السيروتونين والسلوك الاجتماعي. Philos ترانس R سوك وند B بيول العلوم 2012؛ 367: 2460-2474. | المادة | مجلات |
  • Mukaetova-Ladinska EB، أرنولد H، Jaros E، R بيري، بيري E. استنفاد التعبير MAP2

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس