عرض مشاركة واحدة
  #3  
قديم 11-22-2015, 08:02 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي الطيف من الطفرات spg4 في راثي الشلل النصفي التشنجي المهيمن

 

http://hmg.oxfordjournals.org/content/9/4/637.full


وراثي جسمي الشلل النصفي التشنجي وراثي (AD-HSP) هو مجموعة من الاضطرابات العصبية غير المتجانسة وراثيا تتميز التشنج التقدمي المؤيد في الأطراف السفلية. تم تعيين خمسة مواضع AD-HSP إلى الكروموسومات 14Q، 2P، 15q، 8Q و12q. وقد تبين موضع SPG4 في 2p21-P22 لحساب ~40٪ من جميع الأسر AD-HSP. spastin ترميز SPG4، وهو بروتين AAA النووي المزعوم، وقد تم مؤخرا تحديد. هنا، وقد أدى تحليل تسلسل 17 الإكسونات من SPG4 في 87 لا علاقة لها المرضى AD-HSP في الكشف عن 34 طفرات جديدة. وتنتشر هذه الطفرات SPG4 على طول المنطقة ترميز الجين وتشمل جميع أنواع التعديل DNA بما في ذلك مغلطة (28٪)، هراء (15٪) ونقطة لصق موقع (26.5٪) الطفرات وكذلك الحذف (23٪) والإدراج (7.5٪). وكشف التحليل السريري للشركات طفرة 238 نسبة عالية من كلا الناقلين أعراض (14/238) والمرضى غير مدركين للأعراض (45/238)، ويسمح لإعادة تعريف هذا النموذج المتكرر للAD-HSP.

القسم السابق القسم التالي
تلقى 16 نوفمبر 1999؛ المنقحة ومقبول 5 يناير 2000.

مقدمة

الشلل النصفي التشنجي وراثي (HSP) هو مجموعة من الاضطرابات العصبية سريريا وغير متجانسة وراثيا تتميز بشكل رئيسي من قبل التشنج التدريجي والثنائي في الأطراف السفلية. الميزات المرضية الرئيسية للHSP هي انحطاط مساحات هرمي عبرت والتخفيف من الأعمدة الظهرية (1). تم تصنيف HSP وفقا لطريقة الميراث وجود أو عدم وجود أعراض إضافية. وقد تم تقسيمها إلى شكلين (2) اعتمادا على ما إذا التشنج يحدث في عزلة (HSP النقي) أو ما يرتبط بها مع مجموعة واسعة من الميزات سريرية إضافية (معقدة HSP). على الرغم من كل أشكال يمكن أن تكون موروثة في جسمية مهيمنة (AD-HSP)، وراثي متنحي (AR-HSP) أو (X-HSP) بطريقة ترتبط X كروموسوم، الشلل النصفي التشنجي النقي هو الشكل الأكثر شيوعا من AD-HSP . وقد ميز مجموعتين فرعيتين من AD-HSP وفقا لعمر في بداية (3، 4)، واحدة مع بداية <35 عاما (النوع الأول) والآخر مع بداية> 35 عاما (النوع الثاني). واقترح في وقت لاحق (5) بأن بزوغ فجر في 20 سنة من العمر قد تكون النقطة الفاصلة أكثر تمييزا لتجنب التداخل بين النوع الأول والنوع الثاني. ومع ذلك، فإن الاختلاف الملحوظ في سن بداية صفها على حد سواء بين وداخل الأسر وأشار إلى أن هذا المعيار تصنيف الأمراض غير مناسب التصنيف الفرعي لHSP (6).
وقد تبين النقي AD-HSP أن يكون مغاير وراثيا متجانس (7)، وقد تم تحديد خمسة مواضع حتى الآن على الكروموسومات 14Q (SPG3) (7)، 2P (SPG4) (8، 9)، 15q (SPG6) (10 )، 8Q (SPG8) (11) و12q (SPG10) (12). ما يقرب من 40٪ من الأنساب AD-HSP تظهر الربط كروموسوم 2P، مما يدل على ارتفاع معدل انتشار موضع SPG4 في هذا الشكل من المرض (13 - 15). بعد استبعاد إمكانية تكرار التوسع CAG في SPG4 AD-HSP (16)، ولقد عزل مؤخرا الجينات الكامنة وراء هذا النوع من AD-HSP باستخدام استراتيجية استنساخ الموضعية على أساس التسلسل الفاصل SPG4 بأكمله، وحددنا خمس طفرات مختلفة في سبع عائلات (17).
SPG4 (المعروف أيضا باسم SPAST؛ بنك الجينات انضمام أي AJ246003) يمتد على مسافة المادية لل~90 كيلوبايت، يتكون من 17 الإكسونات ويشفر عضوا النووي المزعوم من AAA [A TPases على ssociated مع الخلوية متنوع الأنشطة المحددة (18، 19 )] عائلة بروتين، يدعى spastin (بنك الجينات انضمام رقم AJ246001) (17). وقد اقترح تعديلات DNA خمسة (هراء واحد، لصق موقع واحد وثلاثة الطفرات مغلطة) الكشف حتى الآن في سبع عائلات AD-HSP بشكل غير متوقع أن هذه النتائج المهيمنة مرض التنكسية من فقدان وظيفة (17). في محاولة لإنشاء الارتباطات-النمط الظاهري النمط الجيني وتقييم وتيرة الطفرات SPG4 في AD-HSP، قمنا بترتيب SPG4 للطفرات في 17 SPG4 -linked قبائل AD-HSP إضافية وكذلك في 70 AD-HSP أسر مع الربط غير معروف .

النتائج

الطفرات SPG4 في الأسر AD-HSP

كما تم عرض عضوين المتضررين والسيطرة موضوع واحد من كل من 17 SPG4 الأسر -linked واحد الفرد المصاب من كل من 70 قبيلة مع الربط غير معروف للطفرات في SPG4 باستخدام PCR التضخيم وتحليل تسلسل بكل exons 17. ما مجموعه 39 طفرات مختلفة، بما في ذلك التعديلات DNA الخمس المذكورة سابقا (17)، تم الكشف في 44 الأسر AD-HSP (الجدول 1) تنشأ من مختلف الخلفيات الجغرافية (25 من فرنسا، و 5 من البرتغال، 3 من كل من سويسرا وإيطاليا وأيرلندا، و 1 في كل من المملكة المتحدة وألمانيا وإسبانيا وبولندا وتاهيتي). الطفرات في SPG4 المشارك تفصل مع المرض في 22 من 24 SPG4 -linked الأسر AD-HSP وفي 22 من 70 AD-HSP القبائل مع الربط غير معروف. النظر في جميع الأسر AD-HSP أن درسنا إما عن طريق تحليل الربط أو عن طريق فحص الطفرة، وتشير نتائجنا أن SPG4 HSP تمثل 37٪ على الأقل من AD-HSP.

الجدول 1.
الطفرات SPG4 في المرضى الذين يعانون من AD-HSP

وأكد اثنين من السمات البارزة في هذه الدراسة. (ط) وقد ثبت أن جميع أنواع التعديل DNA بما في ذلك 9 الحذف، 3 غرز و 27 استبدال قاعدة (11 مغلطة، 6 هراء و10 الطفرات موقع لصق) أن تؤثر SPG4 تقريبا في كل اكسون أو مواقع لصق المجاورة (الشكل 1). (ب) فيما عدا ثلاث طفرات (1416C → T، 1340del5 و1813-2a ز →) التي تم الكشف عنها في أكثر من قبيلة، وهي مختلفة طفرة المشارك يعزل مع المرض في كل عائلة. ومن بين هذه التعديلات تسلسل 39، 11 الطفرات (28٪) تؤدي إلى استبدال الحمض الأميني في تسلسل spastin في حين لا يقل عن 19 الطفرات (50٪) يؤدي إلى بروتين اقتطاع (الجدول 1). وقد تم تحديد أحد عشر الطفرات لصق موقع بما في ذلك حذف واحد وعشرة بدائل لدينا قاعدة في عينة الأسرة، وهو ما يمثل ~28٪ من الطفرات SPG4 الكشف حتى الآن.

الشكل 1. تمثيل تخطيطي من الجين SPG4 بما في ذلك توطين 39 الطفرات الكشف حتى الآن. يتم رسمها 17 الإكسونات من SPG4 تقريبا الحجم. يشار إلى تسلسل النووية ترميز spastin الحفاظ المجالات التي ألوان مختلفة: المفترضة إشارة توطين النووية (وظائف الأحماض الأمينية 11/07) في البرتقال، وهما الزخارف يسين سستة (وظائف الأحماض الأمينية 50-78 و508-529) باللون الأزرق، وكر زخارف A، موقع ATP ملزم، وB (وظائف الأحماض الأمينية 382-389 و437-442، على التوالي) باللون الأخضر، والحد الأدنى من التوافق AAA (وظائف الأحماض الأمينية 480-498) باللون الأصفر والحلزون حلقة حلزون تم تأطير مجال dimerization (بين المواقف الأحماض الأمينية 478-486) ​​من خلال شرطات في اكسون 12. الساحات، والطفرات مغلطة. الدوائر، والطفرات هراء. مثلثات، microdeletions. مثلثات مقلوبة، الإدراج؛ مقص، والطفرات موقع لصق.

الطفرات مغلطة والمجالات الوظيفية spastin

على الرغم من أن وجدت هذه الطفرات 39 المنتشرة على طول SPG4، باستثناء الإكسونات 1 و 4 و 6 و 17، يتم ترجمة كل 11 الطفرات مغلطة بين الإكسونات 7 و 16 (الشكل 1). وقد أظهرت هذه المنطقة من SPG4 لتتوافق مع مجال أتباز الحفظ جدا (17)، وتسمى أيضا الكاسيت AAA، الذي يتوقع أن تؤوي النشاط أتباز في أفراد الأسرة AAA (20). من 11 الطفرات مغلطة، ثمانية تؤدي إلى جذرية التغييرات الأحماض الأمينية بينهم أربعة بدائل تنطوي cysteines، في حين أن الثلاثة المتبقية، 1288A → G (K388R)، 1401C → G (L426V) و1792C → T (A556V)، يؤدي إلى الأحماض الأمينية المحافظ التغييرات (الجدول 1). هذه التعديلات تسلسل ثلاثة تقع في الإكسونات 8 و 10 و 15 على التوالي، لم تكتشف في 96-124 الكروموسومات السيطرة، مشيرا إلى حالة تحور بهم. وجود المحافظة تغييرات الأحماض الأمينية قد تكشف عن أهمية وظيفية من هذه المخلفات المتضررة. هنا، واثنين من الطفرات مغلطة، 1283T → G (N386K) و1288A → G (K388R) وقد أظهرت، أن تؤثر على spastin وكر الحافز والذي يتوافق مع المجال ATP ملزم لجميع ATPases (21). ومن المثير للاهتمام، ونتائج الطفرة 1283T → G في غير المحافظ تغيير الأحماض الأمينية (N386K) في موقف غير المحفوظة 5 من وكر أدنى فكرة الإجماع A، GPPG X GKT (تحور الحمض الأميني بالخط العريض)، في حين أن الطفرة 1288A → G يولد تغيير المحافظ (K388R) في موقف غاية الحفاظ جيدا 7 من وكر عزر A. وتشير هذه البيانات مجتمعة أن Lys388 تشارك مباشرة في ملزمة ATP، وبالتالي يبدو أن تكون حاسمة من أجل وظيفة spastin.

الأشكال

وأجري تحليل تسلسل بكل exons SPG4 والحدود اكسون-إنترون خارجا على 142 فردا (واحد لم يتأثر وعضوين المتضررين من 24 SPG4 الأسر -linked ومريض واحد من كل من 70 قبيلة غير المرتبطة). على الرغم من أن هذا التحليل يكشف وجود intronic الأشكال واحدة النوكليوتيدات (النيوكلوتايد)، فإنه فشل في الكشف عن أي تعدد الأشكال في الإكسونات الترميز، بما في ذلك التغيرات كودون مرادف أو المحافظة على الكروموسومات غير الحاملة والمناطق غير تحور من الكروموسومات الحاملة.

التحليل السريري للمرضى SPG4

وقد تم تحديد ما مجموعه 238 ناقلة تحور بما في ذلك 179 مريضا على بينة من أعراض في 44 SPG4 الأسر. كان النمط الظاهري الشلل النصفي التشنجي النقي في 41 من هذه الأسر ولوحظ شكل معقد من AD-HSP المرتبطة مع وجود علامات المعرفية في ثلاث قبائل. وتظهر الخصائص السريرية الرئيسية لأفراد الأسرة المتضررين في الجدول 2. وكان ما مجموعه 45 مريضا (~20٪) غير مدركين للأعراض في الامتحان رغم أن 10 منهم تأثرت بالتأكيد، 30 ربما تأثرت و5 كان احتمال الشلل النصفي التشنجي. بالإضافة إلى ذلك، 14 ناقلة أعراض (متوسط ​​العمر عند فحص 36 ± 18 عاما، ومجموعة 19-73 سنة) تم الكشف عنها بواسطة هذا الفحص الطفرة. متوسط ​​العمر عند بداية كان 29 ± 17 عاما، ومجموعة 0-74 سنوات، وهو ما يتسق مع بداية الكبار تحديدها ل61 مريضا من 12 SPG4 -linked قبائل AD-HSP (29 ± 15 عاما) (13). ومع ذلك، فإن التوزيع من العمر في بداية لأعضاء المتضررين من 44 SPG4 الأسر (الشكل 2) أظهرت أن 40٪ من المرضى قد بدء قبل 30 عاما.

الشكل 2. توزيع العمر عند بداية في 172 SPG4 المرضى.


الجدول 2.
الخصائص السريرية للمرضى SPG4

كان العرض الأولي لظهور غدرا من تصلب في الساقين عن 86٪ من المرضى (130/151). تسعة عشر في المائة من أفراد الأسرة المتضررين (28/151) اشتكى من عدم الثبات بالمشي أو السقوط، و 5٪ (8/151) عانت من ألم في الأطراف السفلية. علامات الهرمية كانت مرتبطة بنسب مختلفة مع العديد من المظاهر السريرية التي كثيرا ما لوحظ في الشلل النصفي التشنجي النقي، مثل انخفاض الشعور اهتزاز في الأطراف السفلية (58٪)، والإلحاح البولي (38٪)، قدم جوفاء (21٪)، والجنف (5٪ ). أيا كان المخيخ مشية ترنح ولكن تم تشخيص متلازمة المخيخ خفيفة في الأطراف العلوية في أربعة مرضى. ولم يكن لدى أي علامات باركنسوني، خلل التوتر أو نقصان في حدة البصر. وقد لوحظت ردود الفعل السريع في الأطراف العلوية في 27٪ من المرضى.
وكانت شدة المرض متغير بدرجة كبيرة بين المرضى (الجدول 3). قارنا تردد من العلامات السريرية بين أربع مجموعات من المرضى تظهر زيادة مدة المرض (الشكل 3). بحضور مختلف الأعراض تختلف مع مدة المرض: الداني ضعف الطرف السفلي (P <0.001)، القريبة والهزال البعيدة (P <0.001)، وانخفضت شعور الاهتزاز في الأطراف السفلية (P <0.001)، التشنج في بقية (P < كانت 0.05) والبولي الاستعجال أو سلس البول (P <0.01) بشكل ملحوظ أكثر تواترا مع زيادة مدة المرض (الشكل 3). على النحو الذي اقترحه هاردينغ (3)، والنمط الظاهري من المرضى الذين يعانون من الاصابة المبكرة (≤35 عاما) يختلف عن الأفراد المتضررين مع بداية الراحل (> 35 سنة). على الرغم من أن وتيرة علامات سريرية مماثل بين المجموعتين من المرضى، وكان تطور المرض يحددها مؤشر شدة أسرع بشكل ملحوظ في المجموعة متأخرة بداية (P <0.001) (الشكل 4)، وهو ما يؤكد البيانات هاردينغ (3).

الشكل 3. تطور العلامات السريرية بوصفها وظيفة من مدة المرض. المرضى الذين يجهلون أعراض = 45)، والأفراد المتضررين مع مدة المرض بين 0 و 14 سنة = 64)، ما بين 15 و 29 سنة = 72) و> 30 عاما = 36). LL، الأطراف السفلية، UL، الأطراف العلوية. قيم P تمثل فروق ذات دلالة إحصائية في كل علامات سريرية بين أربع مجموعات مختلفة من المرضى الذين يعانون من زيادة مدة المرض: * P <0.05، ** P <0.001.


الرقم 4. مرض تقدم بوصفها وظيفة من مدة المرض لكل مرحلة العجز في المرضى الذين يعانون من بداية قبل أو بعد 35 سنوات.


الجدول 3.
متوسط ​​مدة المرض وفقا لمراحل الإعاقة

كان انتفاذ سن المعالين وغير مكتملة حتى في ناقلات طفرة القديمة. وكان المريض البالغ من العمر 73 عاما (من 1611 عائلة) مع طفرة موقع لصق بدون أعراض تماما في الامتحان، في حين أقدم يتأثر الفرد يجهل الأعراض ولكن سريريا المتضررين والذين تتراوح أعمارهم بين 62. انتفاذ، وهذا هو الذي يعرف بأنه نسبة حاملات التحور أعراض ، وزيادة مع عمر في الامتحان، من 60٪ في مجموعة من المرضى الأصغر سنا (10-19 سنة) إلى 76٪ في 20- للمرضى البالغ من العمر 40 عاما و 85٪ بعد 40 سنوات.

راثى-النمط الظاهري علاقة

مقارنة بين الظواهر لاحظت في المرضى الذين يحملون طفرة مغلطة = 36) مقابل المرضى الذين يعانون من spastin اقتطاع = 103) فشلت في الكشف عن أي اختلاف في وتيرة علامات سريرية وشدة المرض الذي قدر قبل مدة المرض يعني في كل مرحلة العجز. وعلاوة على ذلك، ونحن لم نلاحظ أي اختلاف كبير في السن عند بداية بين المرضى الذين يعانون من طفرة مغلطة والمرضى الذين يعانون من البروتين اقتطاع (24 ± 18 مقابل 31 ± 17، P = 0.08). الظواهر من المرضى يحملون طفرة مغلطة المحافظة (أسر 019، 027 و 627) مماثلة لتلك التي لوحظت في المرضى الذين يعانون من طفرة مغلطة غير متحفظة أو بروتين اقتطاع: كانت المظاهر السريرية لا أقل تواترا أو أقل حدة في المرضى الذين يعانون من مغلطة المحافظة الطفرات، والتي تميل إلى تأكيد أهمية البقايا تتأثر هذه التغييرات في وظيفة spastin.

نقاش

SPG4، ترميز عضوا جديدا في أسرة البروتين AAA، ومؤخرا تم تحديدها على أنها المسؤولة عن الشكل الأكثر شيوعا للAD-HSP (17). تم العثور على خمس طفرات متخالف مختلفة تقع في المنطقة الترميز لهذا الجين في سبع عائلات AD-HSP. في هذه الدراسة، وقد أدى تحليل تسلسل 17 الإكسونات من SPG4 في 87 مريضا لا علاقة لها المتضررة مع AD-HSP في الكشف عن 34 طفرات جديدة. النظر في جميع الأسر AD-HSP التي تم التحقيق فيها إما عن طريق تحليل الربط أو عن طريق فحص الطفرة، ونحن قد تأكد من SPG4 حسابات AD-HSP عن 37٪ من جميع AD-HSP. وتتناثر 39 SPG4 الطفرات الإبلاغ عنها حتى الآن على طول المنطقة ترميز الجين وتشمل مغلطة (28٪) وهراء (15٪) الطفرات والحذف (23٪)، المدرجة (7.5٪) والطفرات نقطة لصق موقع (26.5٪ ). كما اقترح سابقا (17)، وجميع هذه الأنواع من تغيير الحمض النووي تشير إلى أن هذا النوع من AD-HSP النتائج من فقدان وظيفة spastin (22).
الطفرات موقع لصق، والحذف أو الإدراج توليد البروتين اقتطاع كلها ضارة لأنها يبدو أن يؤدي إلى النصوص الشاذة غير مستقرة، وبالتالي قد يؤدي إلى انخفاض في spastin. Haploinsufficiency، على الرغم من غير متوقعة للجسمية مهيمنة اضطراب الاعصاب، وقد لوحظ في 50٪ على الأقل من SPG4 الأسر AD-HSP تحليلها حتى الآن. من ناحية أخرى، يتم ترجمة كل الطفرات مغلطة ضمن المجال الوظيفي spastin، وAAA كاسيت المذكور، وبالتالي قد يتسبب في فقدان نشاطها. منذ spastin ينتمي إلى عائلة البروتين AAA، فإنه يمكن أن تشارك في الجمعية، وظيفة أو التفكيك المجمعات البروتين وبالتالي يكون بمثابة جزيء كوصي (23). طفرات ينتج فقدان وظيفة إما عن طريق تثبيط المجال الوظيفي أو انخفاض في كمية spastin قد تسبب بالتالي انخفاضا في عدد من المجمعات البروتين الوظيفية التي تعتبر حاسمة للحفاظ محور عصبي في مجموعة فرعية من الخلايا العصبية. في هذه الحالة، يمكن أن يعزى إلى الناتج الخلل مع البروتينات يقابل تشكيل هذه المجمعات النمط الظاهري غير طبيعي. ومع ذلك، فإن احتمال أن spastin عادة تعمل على مقربة من مستوى عتبة لا يمكن استبعاده. كل من فرضيات يمكن حساب التغير المهم في شدتها والعمر في البداية، وانتفاذ غير مكتملة من SPG4 AD-HSP.
كما لوحظ في غيرها من الصفات السائدة والمتنحية وراثي جسمي المسببة للأمراض، مثل PAX6 مسؤولة عن انعدام القزحية (24) وأجهزة الصراف الآلي وراء ترنح توسع الشعيرات (25)، أكثر من 39 SPG4 الطفرات الكشف بحيث يؤدي بكثير من البروتين اقتطاع بينما 28٪ فقط هي الطفرات مغلطة. وعلاوة على ذلك، وتواتر SPG4 لصق الطفرات الموقع (28٪) هو أعلى بكثير من تلك التي ذكرت في الاستطلاعات من الاضطرابات الجينية البشرية الأخرى، التي وجدت 15٪ من الطفرات تؤثر مرنا الربط (26، 27). ومن المثير للاهتمام، يمكن تحديد أي تعدد الأشكال الترميز (cSNPs)، بما في ذلك الأشكال مرادفة، في الإكسونات SPG4 كما وصفها كارجيل وآخرون. (28) ل13 من 106 الجينات التي تم تحليلها في مسح منهجي لcSNPs. غياب cSNPs على الكروموسومات غير الحاملة وجود الطفرات مغلطة المحافظة قد توحي بأن أي استبدال قاعدة التي تؤثر على تسلسل SPG4 الترميز هو ضار. ومع ذلك، فإن توطين الطفرات مغلطة المحافظة الثلاثة داخل الكاسيت AAA يميل إلى تسليط الضوء على أهمية وظيفية من بعض المخلفات مقارنة مع الآخرين.
قادنا التحليل السريري من 224 مريضا يحملون طفرة في SPG4 لإعادة تعريف هذا النموذج المتكرر للAD-HSP. SPG4 AD-HSP لا ينبغي النظر فيه إلا بوصفه النموذج الذي يصيب البالغين من HSP، على عكس ما كان في السابق اقترح (8، 13)، حيث أن 40٪ من المرضى البدء بها قبل 30 عاما. ومع ذلك، فإن متوسط ​​العمر عند بداية هو في وقت لاحق، ومجموعة من الأعمار في بداية أكبر في SPG4 AD-HSP مما كانت عليه في غيرها من أشكال HSP مثل SPG3، SPG5 أو SPG7. معظم المرضى الذين عرض علامات الهرمية (أي زيادة ردود الفعل في الأطراف السفلية، وردود الفعل الباسطة أخمصي، رمع الكاحل وضعف العضلات في الأطراف السفلية) وانخفض شعور الاهتزاز في الكاحلين. كانت علامات الكلاسيكية الأخرى من الذهب الخالص HSP مثل اضطرابات العضلة العاصرة والعضلات البعيدة الهزال في الأطراف السفلية، قدم جوفاء، الجنف أو متلازمة المخيخ خفيفة في الأطراف العلوية أقل تواترا. كما تم العثور على هذه العلامات بنسب مختلفة في أشكال أخرى من AD-HSP. وكان ضعف الادراك أعراض غير نمطية الوحيد لوحظ في 9 من 19 فردا المتضررين من ثلاث قبائل. وكانت شدة المرض اختلافا كبيرا داخل وبين العائلات على حد سواء: لاحظنا حاملات التحور أعراض> 70 عاما وكذلك المرضى المصابين بشدة الذين كانوا على كرسي متحرك محددة في العقد الثالث.
لقد أكد أن تطور المرض في المرضى الذين يعانون من تأخر ظهور SPG4 AD-HSP هو أسرع بكثير مما كان عليه في المرضى الذين يعانون من الاصابة المبكرة، وهو ما يتسق مع استنتاج هاردينغ على العام AD-HSP (3). وقد أنشأت نتائجنا أيضا أن تقلب النمط الظاهري يعتمد بشكل واضح على مدة المرض في SPG4 AD-HSP. كل من اضطراب وظيفي يقاس على نطاق والعجز خمس نقاط وتردد بعض العلامات السريرية مثل الضعف والهزال ونقص الشعور اهتزاز في الأطراف السفلية، واضطرابات العضلة العاصرة والتشنج في زيادة الراحة مع مدة المرض. لم مقارنة بين الظواهر بين الناقلين طفرة مغلطة والمرضى الذين يعانون من spastin اقتطاع لم تكشف عن أي اختلاف كبير في تطور المرض، شدة الأعراض أو العمر عند بداية. على الرغم من أن هذه النتائج تحتاج إلى تأكيد لعينات المرضى أخرى، فإنها تشير إلى أن الطفرات مغلطة من غير المرجح أن تمارس التأثير المهيمن سلبية على النشاط spastin الذي ينبغي أن يؤدي إلى النمط الظاهري أشد من اقتطاع الطفرات المنتجة haploinsufficiency. وينبغي توفير مزيد من التوضيح للآلية الجزيئية الكامنة وراء هذا اضطراب الاعصاب من خلال إنشاء نماذج الماوس لSPG4 AD-HSP إما مع طفرة مغلطة أو بروتين اقتطاع.
كما تبين للSPG7 الطفرات (29)، وكلاهما أشكال نقية ومعقدة من AD-HSP تسببها طفرات SPG4 منذ عقدين من هراء ومغلطة واحد الطفرات شارك تفصل مع المرض في العائلات 2971، 1010 و 1002، والتي تعرض لشلل سفلي تشنجي المرتبطة مع وجود علامات المعرفية. وتشير هذه النتائج إلى أن التمييز بين نقية وتعقيدا لا تزال غامضة. ومع ذلك، كان الخرف غير موجودة في جميع الأفراد المتضررين (19/9) من هذه العائلات الثلاث وليس الطفرات SPG4 تم الكشف في أسر أخرى مع معقد AD-HSP. لذلك، نقية AD-HSP لا تزال حتى الآن العرض الأكثر شيوعا من العيوب spastin. النظر في تمديد الجيني geneity heterog من AD-HSP، ينبغي أن تستند إلى معيار تصنيف الأمراض أكثر دقة في مواضع مختلفة مسؤولة عن HSP.
أول تطبيق لتحديد الجينات المسببة للمرض هو وضع التشخيص الجزيئي قبل وبعد الولادة من الفوضى. يبدو واضحا الآن أن التشخيص الدقيق للSPG4 AD-HSP لا يمكن الحصول عليها عن طريق تحليل طفرة بسبب النسبة العالية من كلا الناقلين طفرة أعراض والمرضى يجهلون الأعراض. إذا يمكن الكشف عن المرضى الأخير قبل الفحص السريري التفصيلي، لا يمكن تحديدها ناقلات أعراض التي كتبها التحليلات الجزيئية. هذه الملاحظة وتباين داخل الأسرة ملحوظ في شدة تجعل الاستشارة الوراثية للتشخيص قبل الولادة واختبار سابق للأعراض حساسة بشكل خاص.

المواد والأساليب

المرضى والتحليل الإحصائي

بالإضافة إلى ذكر سابقا SPG4 -linked الأسر (618، 624، 625، 627، 645، 4014، A، 2992، 5330، 5226، 1620، 3266، 2971 و 1001) (13، 30، 31)، 80 عائلة مع تقدمية الشلل النصفي التشنجي تم تعيينهم باستخدام المعايير التالية: وجود اثنين على الأقل من المرضى الذين يعانون من الشلل النصفي التشنجي واضح سريريا وانتقال المرض في اثنين على الأقل من الأجيال المتعاقبة. تم تصنيف المرضى وجود: (ط) الشلل النصفي التشنجي واضح، أي التشنج، وزيادة ردود الفعل والباسطة استجابة أخمصي. (ب) الشلل النصفي التشنجي المحتمل، أي زيادة فقط ردود الفعل أو الاستجابة الباسطة أخمصي. و (ج) من الممكن الشلل النصفي التشنجي، أي ردود الافعال أنشط في الأطراف السفلية مقارنة مع الأطراف العلوية. وقد عرفت بداية كسنة من ظهور الأعراض الأولى وفقا للمريض. أشكال معقدة من الشلل النصفي التشنجي فصل في خمس من هذه العائلات منذ علامات سريرية إضافية، مثل الخرف في أربع عائلات (2971، 1001، 1002 و 1010)، ومتلازمة المخيخ في قبيلة 610 وبالاعتلال العصبي في عائلة 627، تم تشخيصها في اثنين على الأقل أفراد الأسرة المصابين. تم تقييم الإعاقة على مقياس من خمس نقاط: 1، مشية عادية أو تصلب طفيفة جدا في الساقين. 2، متوسطة الصلابة مشية. 3، غير قادر على تشغيل ولكنها قادرة على المشي وحدها؛ 4، والمشي مع مساعدة؛ 5، على كرسي متحرك. أبلغت وتم الحصول على موافقة خطية من كل فرد.
تم تحديد الدلالة الإحصائية باستخدام اختبار χ 2 مع التصحيح ييتس "عند الاقتضاء، وغير المعلمية مقارنة مان ويتني U. منذ تم اختيار الأسر عن وجود عضوين على الأقل المتضررين في جيلين، استبعدت هؤلاء الأفراد من تقدير انتفاذ أن تأخذ في الاعتبار التحيز في الاختيار.

فحص التحور

وتضخمت 17 الإكسونات الترميز من SPG4 بواسطة PCR من 100 نانوغرام من الحمض النووي الجيني والتسلسل على المنظم ABI 377 (PE النظم البيولوجية التطبيقية، يزأولي، فرنسا) كما هو موضح سابقا (17). تم استخراج الحمض النووي الريبي مجموع من خطوط الخلايا lymphoblastoid المريض عندما تكون متاحة باستخدام عدة RNA PLUS (نظام Bioprobe؛ الكم Aplligene، إلكيرش، فرنسا) قد أنجز وكدنا] التوليف على ~500 نانوغرام إلى 1 ميكروغرام لكل عينة الحمض النووي الريبي مع 100 بمول من البادئات العشوائية (أمرشام فارماسيا في مجال التكنولوجيا الحيوية، ساكلاي، فرنسا) و 200 U من مرتفع الثاني RT (GIBCO BRL، لايف تكنولوجيز، روكفيل، MD) وفقا للاجراءات المتبعة. نفذت أربعة التكبير PCR التي ولدت شظايا متداخلة تغطي SPG4 إطار القراءة المفتوحة خارج على cDNAs المريض ووالتسلسل جميع المنتجات PCR على المنظم ABI 377 (PE النظم البيولوجية التطبيقية) كما ذكرت سابقا (17). تتوفر في http://www.genoscope.cns.fr كل الاشعال تستخدم لتضخيم وتسلسل كلا الإكسونات SPG4 وSPG4 كدنا]. عندما كشف تحليل تسلسل النوكليوتيدات الاختلاف في المريض، والتي تشترك في الفصل مع المرض ثم التأكد في بقية أفراد الأسرة. ، تم فحص كل من الإكسونات ثلاثة و 8 و 10 و 15، والذي تم تحديد الطفرات المحافظة في 48-62 الضوابط المحددة من الأسر CEPH.

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس