عرض مشاركة واحدة
  #25  
قديم 12-05-2015, 12:06 AM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي الآثار التفاضلية الميثيلفينيديت والكوكايين على انتقال gaba في نواة مهادي الحسية

 

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/1...jnc.12113/full
ABA في نواة مهادي الحسية

  • بيلين Goitia 1،2،
  • ماريانا رينيري 1،2،
  • لورا E. غونزاليس 1، †،
  • خوسيه L. روزاس 1،
  • إدغار غارسيا-الغدير 3،
  • فيرونيكا Bisagno 2، و‡
  • فرانسيسكو J. أوربانو 1، ‡، *
نشرت المقالة أولا متصلين: 7 JAN 2013
دوى: 10.1111 /

jnc.12113

ملخص

ميثيل (ميلا في الساعة) ويستخدم على نطاق واسع لعلاج الأطفال والمراهقين الذين يعانون من اضطراب الانتباه تشخيص العجز / فرط النشاط. على الرغم من أن سهم MPH الشبه الآلية لالكوكايين وتأثيراته على انتقال GABAergic في نواة مهادي الحسية غير معروفة. كان هدفنا لمقارنة الكوكايين وMPH آثار على توقعات GABAergic بين شبكي مهادي وventrobasal (VB) نوى. تعرض الفئران (P18-30) إلى حفلة تشبه الكوكايين وMPH الإدارات الحادة وشبه المزمنة. الكوكايين وMPH تعزيز hyperlocomotion، على الرغم من الآثار بوساطة الكوكايين شبه المزمنة كانت أقوى من الآثار ميلا في الساعة. الكوكايين وMPH إدارة شبه مزمن غيرت إقران النبض والمدخلات GABAergic عفوية بشكل مختلف. تغيرت آثار الكوكايين على أثار إقران النبض التيارات بوساطة GABA من الاكتئاب لتسهيل مع مدة البروتوكولات المستخدمة، في حين MPH يسببها زيادة مستمرة في جميع أنحاء بروتوكولات الإدارة. تم قياس المهادية نواة شبكي GAD67 وVB الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين باستخدام طخة غربية إلى فهم أفضل صلتها زيادة الإفراج GABA. وزادت كل من البروتينات عن طريق إدارة شبه المزمنة من الكوكايين. أظهر ميلا في الساعة الآثار المترتبة على انتقال GABAergic الذي يبدو أقل إرباكا من الكوكايين. آثار فريدة من نوعها من الكوكايين على التيارات الكالسيوم VB بعد المشبكي قد يفسر آثار الكوكايين الضارة على نواة مهادي الحسية. وتشير هذه النتائج إلى أن الكوكايين وMPH إنتاج التعديلات قبل المشبكي واضحة على انتقال GABAergic.

المختصرات المستخدمة ADHD
نقص الانتباه / فرط النشاط
CNQX
6-Cyano-7-nitroquinoxaline-2،3-ديون هيدرات الصوديوم والملح
DAT
نقل الدوبامين
DL-AP5
DL-2-الأمينية-5-phosphonovaleric حمض
GAD
كربوكسيل حمض الجلوتاميك
HVA
الجهد العالي تفعيلها
IPSC
كابح التيار بعد متشابك
LVA
الجهد المنخفض تفعيلها
MPH
ميثيل حمض الهيدروكلوريك
شبكة
نقل بافراز
PPR
نسبة إقران النبض
SERT
ناقل السيروتونين
TRN
نواة شبكي مهادي
TTX
سم الأسماك الرباعية الأسنان
VB
ventrobasal النواة

ويرتبط تعاطي المزمن للكوكايين مع الظروف العصبية الأمراض النفسية الكبرى (ديفلين وهنري 2008). وكانت إدارة مثل حفلة الحادة من الكوكايين قادرة على تغيير الخصائص الذاتية للخلايا العصبية مهادية قشرية وانتقال GABAergic عفوية، مما أدى إلى تحسينات من EEG النشاط التردد المنخفض في الفئران (أوربانو وآخرون 2009). إدارة النظامية من نوع T-حاصرات قنوات الكالسيوم في الجسم الحي ومنعت hyperlocomotion وGABAergic تعزيز العصبي على Ventrobasal (VB) الخلايا العصبية بعد حفلة الحاد تشبه إدارة الكوكايين (Bisagno وآخرون 2010)، مما يشير إلى الدور الرئيسي للقنوات T-نوع في آثار الكوكايين على شبكات GABAergic المهادية محددة.

نواة شبكي مهادي (TRN) هو عبارة عن طبقة رقيقة من الخلايا العصبية GABAergic أن المشروع لنواة مهادي الحسية (Spreafico وآخرون 1991)، ومترابطة الخلايا عن طريق محطات GABAergic (صن وآخرون 2012) وتقاطعات الفجوة (Landisman وآخرون . 2002). في القوارض، وهناك نقص في interneurons GABAergic في نواة VB، وتثبيط اللازم لالإدراك الحسي السليم يتم توفيرها من قبل afferents GABAergic TRN (دي بياسي وآخرون 1997). الخلايا العصبية تريليون لها خصائص الجوهرية التي تسمح لهم لتوليد إمكانات العمل وغشاء التذبذبات المحتملة في مجموعة واسعة من الترددات (التي استعرضتها Steriade 2005). الخلايا العصبية TRN تعبر عن الكالسيوم V 3.2 والكالسيوم V 3.3 T-نوع مفارز قناة الكالسيوم (تالي وآخرون 1999)، على الرغم من أن أكدت الدراسات الحديثة أيضا وجود الكالسيوم V 3.1 مفارز (كوفاتش وآخرون 2010). والتضمين TRN النظمية التي كتبها الأمينات الأحادية وGABA (بينو وديشين 1992؛ شمة-Lagnado وآخرون 1996؛ روتر وآخرون 1998؛ رودريغيز وآخرون 2011).

ميثيل (ميلا في الساعة)، منبه نفسي آخر لديه بعض المسؤولية عن الإدمان (Chait 1994)، ويستخدم على نطاق واسع لعلاج الأطفال والمراهقين بمرض نقص الانتباه / فرط النشاط (ADHD) (بيدرمان وآخرون 1999). في البشر، ميلا في الساعة وقد تعزز الآثار (المرتبطة زيادة مستويات الدوبامين خارج الخلية من خلال منع نقل الدوبامين، DAT) بعد الحقن الوريدي (Volkow آخرون 1999a). وقد وصفت الاستعداد خفضت إلى تعاطي المخدرات خلال مرحلة البلوغ بعد التعرض المبكر للMPH في البشر (بيدرمان وآخرون 1999) وفي النماذج الحيوانية (Carlezon وآخرون 2003). ومع ذلك، فقد اقترح مؤلفين آخرين على خلاف ذلك (براندون وآخرون 2001؛ Volkow وفي Insel 2003؛ Volkow وآخرون 1995). وقد ارتبطت الاختلافات في الدوائية بين الكوكايين وMPH في البشر مع عدم وجود تحسيس متصالب الاستخدام MPH قبل المراهقين (Guerriero وآخرون 2006). إدارة MPH تطبيع EEG النشاط التردد المنخفض (كلارك وآخرون 2003)، مما يشير إلى تورط مباشر للTRN في مسببات ADHD. وقد تبين أن إدارة MPH واحدة لمنع انتقال GABAergic من TRN من خلال تفعيل مستقبلات D4 على حد سواء في المختبر (Florán وآخرون 2004) والحية (Erlij وآخرون 2012). ومع ذلك، فإن آثار إدارة MPH المتكررة على انتقال GABAergic بين النوى المهادية الحسية لا تزال مجهولة.

وقد تبين الكوكايين لمنع نقل مونوامين (DAT، سرت، وNET)، ورفع مستويات متشابك الدوبامين (ريتز وآخرون 1987؛ الحكماء وBozarth 1987؛ هوز وآخرون 2000)، بافراز، والسيروتونين (Glowinski وأكسلرود 1966 ؛ روس وRENYI 1969؛ عموم وآخرون 1994؛ هوز وآخرون 2000). MPH يمنع أساسا DAT وNET، ولكن ليس SERT، الأمر الذي أدى الزيادة السريعة في مستويات الدوبامين خارج الخلية في العقد القاعدية (Kuczenski وسيغال 1997). تقارب MPH لDAT في الجسم الحي هو مشابه لذلك من الكوكايين (Volkow وآخرون 1999b، ولكن حركية الدوبامين كامل الدماغ بوساطة MPH تكون أبطأ من تلك التي من الكوكايين) (Volkow آخرون 1999a؛ Volkow وسوانسون 2003). في المرضى الذين يعانون ADHD الكبار، زادت MPH الدوبامين في الجسم المخطط البطني مع الحد من أعراضهم (Volkow وآخرون 2012).

وكان الهدف من هذه الدراسة لمقارنة آثار في الفئران من حفلة تشبه الكوكايين وحدة MPH (1 اليوم) وشبه المزمنة (3 اليوم) الإدارة على النشاط الحركي وانتقال GABAergic من TRN على الخلايا العصبية VB. أظهرت نتائجنا أن كلا من الكوكايين وMPH تعزيز hyperlocomotion، على الرغم من الآثار بوساطة الكوكايين كانت أقوى من MPH بعد تناوله شبه المزمنة. كل من الكوكايين وMPH تغير إقران النبض أثار وعفوية انتقال GABAergic من TRN. في حين الكوكايين زيادة كبيرة نسب إقران النبض بعد 24 ساعة فقط لمدة 3 أيام، MPH تعزيز منهم من يوم 1 حتى 3 إدارات اليوم. الكوكايين يتسبب في مزيد من GABA عفوية تردد الثياب مقارنة MPH بعد 1 يوم، ولكن ليس للإدارات التي استمرت 3 أيام. آثار الكوكايين على انتقال GABAergic مهادي والتيارات الكالسيوم بعد متشابك لوحظ في هذه الدراسة قد تكمن وراء تغيرات جذرية في التعبير البروتين من GAD و / أو قنوات T-نوع آخر متشابك. وكشف تحليل لطخة غربية زيادة في كا V 3.1 و مستويات GAD67 بعد تناوله شبه المزمنة من الكوكايين.

نتائجنا تشير إلى التقلبات كبير من انتقال مهادي GABAergic والتيارات الكالسيوم بعد متشابك الكوكايين، والتي قد تكمن وراء آثارها السمية العصبية طويلة الأمد. أيضا، MPH يسببها التعديلات الحالة المستقرة للتغيرات انتقال GABAergic، الذي من شأنه أن يؤدي إلى تغيرات طويلة الأمد في معالجة مهادي الحسي.

المواد والأساليب


الحيوانات

عموما، استخدمت 18-30 يوما من العمر من الذكور C57BL / 6 الفئران من مرفق المركزية الحيوان في جامعة بوينس آيرس. وكانت مبادئ رعاية الحيوان وفقا CONICET (2003)، والتي وافقت عليها السلطات في استخدام التوجيهات OLAW / ARENA (NIH في بيثيسدا، MD، الولايات المتحدة الأمريكية).

إدارة المخدرات

كانت تدار الكوكايين وميثيل الملكية الفكرية باستخدام بروتوكولات "مثل حفلة" (سبانجلر وآخرون 1993) لمدة 1 يوم (3 × 15 مغ / كغ، 1 ساعة بعيدا) أو لمدة 3 أيام (شبه المزمنة؛ 3 × 15 مغ / كغ ، 1 ساعة على حدة، كل يوم لمدة 3 أيام) (الشكل 1 أ). الحيوانات السيطرة تلقت حقن المياه المالحة موقوت على حد سواء.

الشكل 1. الكوكايين وميثيل البروتوكولات (MPH) إدارة استخدامها. أثار الممثل GABAergic التيارات الكالسيوم متشابك وأثار منحدر المسجلة من ventrobasal (VB) الخلايا العصبية. (أ) تستخدم بروتوكولات الكوكايين وMPH حفلة الإدارة. (ب) اليسار، GAD65 / 67 immunolabeled شريحة مهادية قشرية تظهر مواقع شبكي (متقاعد) ونوى VB، فضلا عن تسجيل (VB) وتحفيز كهربائي (STIM). (ب) أثار الصحيح، ممثل التيارات ما بعد المشبكية المثبطة (IPSCs) بعد 10 هرتز و 40 هرتز التحفيز إقران النبض في ظل وجود 50 ميكرومتر AP5 و 20 ميكرومتر CNQX قبل وبعد تطبيق Bicuculline حمام (50 ميكرومتر). وكانت إمكانية عقد -70 بالسيارات. (ج) التيارات الكالسيوم التمثيلية التي تولدها 500 طويلة MS-سلالم depolarizing قبل (الخط الأسود) و 20 دقيقة بعد تطبيق 20 ميكرومتر حمام mibefradil (خط رمادي). Mibefradil أساسا إلى انخفاض الجهد المنخفض تنشيط T-نوع المكون الحالي (السهم)، في حين تؤثر قليلا الجهد العالي تنشيط P / Q-نوع السعة الحالية (عنصر حساس ω-Agatoxin-IVA 100 نانومتر؛ أوربانو وآخرون 2009).

شرائح مهادي

وقد تم الحصول على شرائح مهادي قشري كما هو موضح سابقا (Bisagno وآخرون 2010)، 1 ساعة بعد مشاركة "مثل حفلة" الإدارة، إلا عندما 24 ساعة بعد أن تم استخدامها لمدة 3 أيام. سمح شرائح لاسترداد في 35 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة على الأقل في ACSF خالية من منبه نفسي (Bisagno وآخرون 2010).

تسجيلات خلية كاملة التصحيح، المشبك

وقدمت التسجيلات في 20-24 درجة مئوية باستخدام أقطاب التصحيح، المشبك (Bisagno وآخرون 2010). سجلت المثبطة المنمنمات بعد متشابك التيارات (الثياب) في وجود TTX (3 μΜ) وتحليلها باستخدام التحليل البسيطة (Synaptosoft، فورت لي، NJ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تركيب أمور الحدث منحنيات الفاصل إلى المعادلة الأسية واحدة (SigmaPlot؛ SYSTAT برامج، شيكاغو، IL، الولايات المتحدة الأمريكية)، وتمت مقارنة فترات صغيرة وسيطة بين المجموعات.

وقد أثار المثبطة التيارات ما بعد المشبكية (IPSCs) في وجود DL-AP5 (50 ميكرومتر) وCNQX (20 μΜ) (40-200 ميكرو ثانية، 200-1000 أمبير) باستخدام أقطاب القطبين (FHC المؤتمر الوطني العراقي، بودوين، ME، الولايات المتحدة الأمريكية ) المتمركزة على الحدود بين TRN وVB النوى (تشانغ وآخرون 1997). وقد استخدم Bicuculline (50 μΜ) للتأكد من أن التيارات تم بوساطة مستقبلات GABA-A (الشكل 1 ب). واستخدمت البقول يقترن في 10 هرتز أو 40 هرتز، وكانت IPSCs تطبيع إلى اتساع الأولى IPSC. وسجلت التيارات الكالسيوم التي تعتمد على الجهد مع بروتوكول مثل منحدر (0.3 فولت / ثانية؛ Bisagno وآخرون 2010). خفضت سلالم الجهد المتهدمة من التيارات الكالسيوم، مما يسمح لنا لحساب بدقة منخفضة الجهد النشط (LVA، T-نوع) والجهد العالي المنشط (HVA بوساطة P / Q-نوع والتيارات الكالسيوم ω-Agatoxin-IVA الحساسة، وانظر أوربانو وآخرون 2009) التيارات نسب الذروة (Bisagno وآخرون 2010). تم تسجيل إشارات باستخدام مكبر للصوت 700 MultiClamp بقيادة pCLAMP 10.0 (الأجهزة الجزيئية، سانيفيل، CA، الولايات المتحدة الأمريكية). استخدمت تركيزات منخفضة من mibefradil (20 μΜ) لمنع T-نوع التيارات (الشكل 1 ج)، كما هو موضح سابقا (Bisagno وآخرون 2010).

الدراسات السلوكية

تم تسجيل النشاط الحركي الماوس مع نظام الآلي (Ethovision XT7.0؛ Noldus، فاغينينغين، هولندا) كما هو موضح سابقا (Bisagno وآخرون 2010). سافر المسافة الإجمالية (سم) وكان كميا ليصبح المجموع 30 دقيقة قبل الحقن (خط الأساس)، و 45 دقيقة بعد الحقن الأخير من حفلة.

تجانس الأنسجة وصمة عار الغربية

تم تشريح TRN وVB من 350 ميكرون شرائح سميكة على مرحلة الجليد الباردة، التي تم جمعها في أنابيب بلاستيكية وتخزينها (-80 ° C). تم إذابة العينات والمتجانس في الترسيب المناعي الشعاعي فحص (RIPA) العازلة التي تحتوي على مثبطات الأنزيم البروتيني في 4 درجات مئوية. بعد الطرد المركزي (20 دقيقة في 21 500 غ)، وتم تحديد مستويات البروتين مع مجموعة البروتين BCA مقايسة (الحرارية العلمية، روكفورد، IL، الولايات المتحدة الأمريكية)، وحضنت 40 ميكروغرام من كل عينة مع تكسير العازلة (Laemmli 1970) لمدة 10 دقيقة في 100 ° C. تم تشغيل العينات على 10٪ بولي أكريلاميد حل جل وتم نقل البروتينات إلى غشاء النيتروسليلوز (سيغما الدريخ، سانت لويس، MO، الولايات المتحدة الأمريكية). تم بحثها وصمة عار مع الأجسام المضادة الأولية محددة، بما في ذلك الأرنب مكافحة GAD67 / 65 (1: 10 000، Chemicon، بيليريكا، MA، الولايات المتحدة الأمريكية)، الأرنب مكافحة الأكتين (1: 100، سيغما الدريخ)، والأرنب مكافحة كاليفورنيا V 3.1 (1: 200، Chemicon). كان الضد الثانوية المضادة للأرنب مترافق إلى البيروكسيديز الفجل (HRP) (1: 1000، داكو، غلوستروب، الدنمارك). وقد وضعت البقع مع chemiluminescent الفجل البيروكسيديز الركيزة (Immobilon الغربية، EMD ميليبور شركة، فالجهاز يبث اشعة تماثل، MA، الولايات المتحدة الأمريكية)، وتصور التوهج مع كاميرا CCD (LAS-1000، فوجي فيلم، طوكيو، اليابان). وكان كميا كثافة إشارة باستخدام يماغيج 1.43 م برنامج ( http://imagej.nih.gov/ij/index.html، NIH). وكانت العصابات الموافق GAD67 والكالسيوم V 3.1 تطبيع لالأكتين، وتم تطبيع جميع العينات للدلالة على مجموعة المالحة و.

التحليل الاحصائي

برنامج InfoStat (جامعة. ناسيونال دي قرطبة، الأرجنتين) كانت تستخدم لأغراض المقارنات الإحصائية. أجريت إحصاءات استخدام الطالب ر -test أو في اتجاه واحد أنوفا (ما لم ينص على خلاف ذلك) وتوكي-كرامر أو LSD فيشر مقارنات متعددة ظيفة واختبارات خاصة عند الاقتضاء. واعتبرت اختلافات كبيرة إذا ص < 0.05. كلما البيانات لم تمتثل الافتراضات من الاختبارات المعلمية، أجريت يتبع غير حدودي يلكوكسن-مان-ويتني أو كروسكال واليس اختبارات المقارنات المقترنة. عرض البيانات ± يعني كما الخطأ المعياري للمتوسط.

المواد

تم شراء الكوكايين، حمض الهيدروكلوريك من سيغما الدريخ، وميثيل حمض الهيدروكلوريك (مالينكرودت شركة، هازيلوود، MO، الولايات المتحدة الأمريكية) كان التبرع السخي من Osmotica الصيدلة SA (بوينس آيرس، الأرجنتين). خلال التسجيلات الكهربية، استخدمت الأدوية التالية: DL-AP5، CNQX، TTX، bicuculline، وmibefradil (كل من سيغما الدريخ).

النتائج


ميثيل المتكرر (MPH) التي يسببها إدارة حفلة تغييرات أكثر اعتدالا في hyperlocomotion من الكوكايين

قارنا في البداية آثار الكوكايين وMPH على تفعيل الحركي بعد تناوله بنهم الحاد 1 يوم (الشكل 2 أ). الكوكايين وMPH الناجم عن ارتفاع hyperlocomotion مقارنة مع المياه المالحة لكنها لم تختلف عن بعضها البعض (الشكل 2 ل؛ كروسكال واليس أنوفا، H = 11.08، ص < 0.05؛ الكوكايين مقابل المالحة: p < 0.001؛ MPH مقابل المالحة: p < 0.05؛ الكوكايين مقابل MPH: P> 0.05). بعد حفلة الإدارات لمدة 3 أيام، كل من الكوكايين وMPH يسببها hyperlocomotion (الشكل 2 ب، أنوفا، F (2،25) = 17.88، ص < 0.0001. LSD فيشر اللاحق الاختبار: كل العلاجات تختلف إحصائيا عن بعضها البعض مع ع < 0.01). ولوحظ hyperlocomotion العالي بعد 3 أيام إدارة الكوكايين حفلة مقارنة الردود بوساطة حفلة الكوكايين 1 يوم؛ ومع ذلك، أظهرت الفئران التي تديرها MPH hyperlocomotion مماثلة بعد 1 يوم و 3 الإدارة اليوم (1/3 القيم يوم = المالحة: 1690.62 ± 2149.19؛ الكوكايين: 7914.82 ± 1519.71، MPH: 630.05 ± 1754.81 أنوفا، F (2،24) = 5.73، p < 0.01؛ LSD فيشر اللاحق الاختبار: ص < 0.05، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة). لم يلاحظ أي الكوكايين أو بوساطة MPH الآثار على hyperlocomotion 24 ساعة بعد الحقن الماضي (الشكل 2 ج، أنوفا، ص> 0.05).

الشكل 2. ميثيل المتكرر (MPH) الإدارات حفلة أدى إلى حدوث تغييرات أكثر اعتدالا في hyperlocomotion من الكوكايين. (أ)، المسافة المقطوعة (في سم × 10 3) عن طريق حقن الفئران الملكية الفكرية بمحلول ملحي (شريط أسود؛ ثلاث حقن، 1 ساعة بعيدا)، والكوكايين، 1 يوم (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم. ** ف < 0.001، الكوكايين مقابل المالحة. * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة. (ب)، المسافة المقطوعة (في سم × 10 3) عن طريق الفئران الملكية الفكرية حقن بمحلول ملحي (شريط أسود)، 3 يوم الكوكايين (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم 45 دقيقة بعد تلقي الحقن الماضي. ** ف < 0.01، الكوكايين، MPH مقابل المالحة (LSD فيشر آخر اختبار خاص). سافر (ج) مسافة (في سم × 10 3) تسجيل 24 ساعة بعد الحقن الماضي لنفس العلاج (المالحة: شريط أسود؛ الكوكايين: شريط رمادي فاتح، MPH: شريط رمادي غامق). لم يتم العثور على فروق ذات دلالة إحصائية بين العلاجات. وسجلت قيم أساسية قبل الحقن في يوم 1.

أظهر الكوكايين ترددات أعلى من الثياب GABAergic عفوية من MPH في حين الكوكايين الوحيد غيرت ما بعد متشابك الجهد المنخفض المنشط (LVA) / الجهد العالي المنشط (HVA) النسب الحالية الكالسيوم

الثياب GABAergic (mIPSCs) المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد حفلة الكوكايين الحاد تتجلى ترددات أعلى مقارنة مع العلاجات ميلا في الساعة والمالحة (الشكل 3 أ و ب، كروسكال واليس أنوفا، الكوكايين مقابل MPH: H = 6.85، p < 0.01؛ الكوكايين مقابل المالحة: H = 15.75 ص < 0.05). وكانت فترات صغيرة لا تختلف كثيرا عند مقارنة المالحة وشرائح المعالجة ميلا في الساعة (الشكل 3 أ و ب، ص> 0.05). بعد 3 أيام البروتوكولات شبه المزمنة، أظهرت العلاجات الكوكايين وMPH ترددات أعلى من المياه المالحة (الشكل 3 ج، د، كروسكال واليس أنوفا، H = 9.9، P < 0.01)، في حين لوحظ عدم وجود فروق بين المجموعات 24 ساعة بعد آخر لمدة 3 أيام حقن شبه مزمن (الشكل 3 هاء وواو؛ P> 0.05).

أظهر الرقم 3. الكوكايين ترددات أعلى من الثياب GABAergic عفوية من ميثيل (ميلا في الساعة)، وتغير بعد متشابك الجهد المنخفض تنشيط (LVA) / عالية الجهد النشط (HVA) الكالسيوم النسب الحالية. (أ)، قطع الاحتمال التراكمي للفترات بين الحدث مصغرة GABAergic (يعني ± الخطأ المعياري للمتوسط) المسجلة في الخلايا العصبية VB من فئران حقنت بمحلول ملحي (المربعات السوداء)، 1-يوم حفلة الكوكايين (الدوائر الرمادية الخفيفة)، و1 -يوم حفلة ميلا في الساعة (الماس رمادية داكنة). (ب)، GABAergic فترات المتوسط ​​مصغرة من فئران حقنت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين 1-اليوم (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم. تم الحصول على القيم الوسيطة (أظهر في 3A مع الخطوط المنقطة) بعد الفردية المؤامرات الاحتمال التراكمي المناسب إلى وظيفة ذ = ذ 0 + ل* إكسب (-Time (مللي ثانية) / τ). * ع < 0.01، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة. (ج، د) قطع الاحتمال التراكمي للGABAergic فترات دقيقة بين الحدث وفترات المتوسطة المسجلة في الخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (المربعات السوداء والقضبان)، لمدة 3 أيام الكوكايين (الدوائر الرمادية الخفيفة والقضبان)، أو ميلا في الساعة (الظلام الماس الرمادي والقضبان) بنهم، وقتلت 1 ساعة بعد الحقن الماضي. أظهرت البيانات وتحليلها كما هو الحال في أ و ب. * ع < 0.05، المالحة مقابل الكوكايين، ميلا في الساعة. (ه، و) قطع الاحتمال التراكمي للGABAergic فترات مصغرة بين الحدث وفترات المتوسطة المسجلة في الخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (المربعات السوداء والقضبان)، لمدة 3 أيام الكوكايين (الدوائر الرمادية الخفيفة والقضبان)، أو ميلا في الساعة (الظلام الماس الرمادي والقضبان) بنهم، وقتلت 24 ساعة بعد الحقن الماضي. أظهرت البيانات وتحليلها كما هو الحال في أ و ب. (ز) الجهد المنخفض المنشط (LVA) / عالية الجهد النشط (HVA) الكالسيوم النسب الحالية في الخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين 1-اليوم (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم # ص < 0.05، الكوكايين مقابل ميلا في الساعة، والمياه المالحة. (ح) LVA / HVA الكالسيوم النسب الحالية للالخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين لمدة 3 أيام (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم، وقتلت 1 ساعة بعد الحقن الماضي. (ط)، LVA / HVA الكالسيوم النسب الحالية للالخلايا العصبية VB من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (شريط أسود) والكوكايين لمدة 3 أيام (شريط رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (شريط رمادي غامق) بنهم، وقتلت 24 ساعة بعد الحقن الماضي # ص < 0.01، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة (توكي-كرامر آخر اختبار خاص).

لم احدة MPH بنهم لن تتغير بعد متشابك الكالسيوم نسب LVA / HVA الحالية في الخلايا العصبية VB بالمقارنة مع المياه المالحة، في حين كانت نسب معاملة الحيوانات الكوكايين 1 اليوم أعلى بكثير من إما مالحة أو ميلا في الساعة (الشكل 3 غرام؛ في اتجاه واحد أنوفا، F (2،38) = 7،6، توكي-كرامر اللاحق الاختبار؛ المالحة مقابل ميلا في الساعة، ص> 0.05؛ الكوكايين مقابل MPH: p < 0.05؛ الكوكايين مقابل المالحة: p < 0.05). وقد لوحظت أي تغييرات في نسب LVA / HVA بين المياه المالحة و3 يوم (1 ساعة بعد) العلاجات الكوكايين وMPH (الشكل 3 ح، أنوفا، ص> 0.05). وقد لوحظت نسب أقل 24 ساعة بعد 3 ايام ادارة الكوكايين حفلة (الشكل 3 ط، في اتجاه واحد أنوفا، F (2،29) = 5.8، P < 0.01)، المتعلقة أعلى HVA، P / Q-نوع بوساطة الكثافة الحالية من دون تغيير في نوع T-الكثافة الحالية (253 ± 18٪ زيادة 24 ساعة بعد 3 ايام مقابل المالحة، ن = 10؛ كروسكال واليس أنوفا، H = 13.9، ص < 0.01). وقد لوحظت أي تغييرات في نسب LVA / HVA بعد العلاج MPH المتكررة مقارنة المالحة (الشكل 3 ح وأنا؛ P> 0.05).

الكوكايين وMPH تتأثر بشكل مختلف إقران النبض أثار انتقال GABAergic

تحظى بقبول واسع كمعلمة لتوصيف التعديلات قبل متشابك التي تعتمد؛ نسب إقران النبض (2ND-أثار التحفيز السعة / 1-أثار التحفيز السعة PPRs). قارنا نسب باستخدام كل 10 هرتز و 40 هرتز الترددات من التحفيز في جميع العلاجات. وكانت القيم PPR يعني أقل من واحد يشير إلى أن هناك الاكتئاب متشابك بين المحفزات. بعد العلاج بنهم 1 يوم، كانت نسب 10 هرتز لا تختلف كثيرا في العلاج (الشكل 4 أ، كروسكال واليس أنوفا، ص> 0.05). ومع ذلك، بالمقارنة الكوكايين والمالحة، وكانت 40 PPRs هرتز من مجموعة MPH أعلى حد سواء في ظروف التحكم (الشكل 4 أ، كروسكال واليس أنوفا، ف < 0.05) وبعد تطبيق حمام من mibefradil (20 ميكرومتر؛ 20-40 دقيقة؛ الشكل 4 ب، كروسكال واليس أنوفا، ف < 0.05)، مما يشير إلى عدم تورط كبير من القنوات T-نوع على إقران النبض الإفراج GABA بعد العلاج بنهم 1 يوم. واصلنا تميز آثار الكوكايين وMPH على أثار انتقال GABAergic في الفئران بعد بروتوكولات إدارة شبه المزمنة. مرة أخرى، أثارت MPH PPRs أعلى من المياه المالحة والكوكايين في كل من الترددات اختبار (الشكل 4 ج، 10 هرتز: أنوفا F (2،61) = 3.79، p < 0.05؛ توكي-كرامر اللاحق الاختبار، MPH مقابل. المالحة والكوكايين ص < 0.05؛ 40 هرتز: أنوفا F (2،48) = 8.64، p < 0.01؛ توكي-كرامر اللاحق الاختبار، MPH مقابل المالحة، الكوكايين، ص < 0.05). لم الكوكايين لن تتغير PPRs 1 ساعة بعد حفلة مقارنة المالحة إما 10 هرتز أو 40 هرتز (الشكل 4أنوفا، ص> 0.05)، في حين كانت PPRs أعلى بكثير من MPH والمالحة 24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين بنهم لكل 10 هرتز و 40 هرتز (الشكل 4 د و 10 هرتز: أنوفا F (2،42) = 20.27 ص < 0.01؛ توكي-كرامر اللاحق الاختبار، MPH مقابل الكوكايين، ص < 0.05، والمالحة مقابل الكوكايين، ص < 0.01؛ 40 هرتز: أنوفا F (2،34) = 18،8 ف < 0.01؛ توكي-كرامر اللاحق اختبار، ميلا في الساعة، مقابل الكوكايين، ص < 0.05 والمالحة مقابل الكوكايين، ص < 0.01). الأهم من ذلك، 40 PPRs هرتز 24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين حفلة (الشكل 4 أظهرت د) نسب متجاوزا عتبة 1،0، مشيرا إلى تسهيل النقي أثناء الإرسال GABA في وتيرة عالية. بحضور mibefradil (20 ميكرون)، و24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين بنهم 10 هرتز و 40 هرتز القيم PPR خفضت إلى حد كبير في مستويات المياه المالحة (10 هرتز: 0.61 ± 0.06، ن = 15؛ 40 هرتز: 0.74 ± 0.06، ن = 13؛ توكي-كرامر اللاحق اختبار، 24 ساعة بعد 3 يوم من دون مقابل mibefradil مع mibefradil، ص < 0.05؛ المالحة مقابل 24 ساعة بعد 3 أيام بحضور mibefradil، ص> 0.05). نسب MPH 24 ساعة بعد كانت 3 بروتوكولات إدارة اليوم أعلى من المياه المالحة فقط في 10 هرتز (توكي-كرامر اللاحق الاختبار، المالحة مقابل ميلا في الساعة، ص < 0.05). وكانت PPRs بعد تناوله MPH لا تختلف كثيرا مقارنة 1 ح (الشكل 4 ج) و 24 ساعة بعد 3 ايام حفلة (الشكل 4 د).

الرقم 4. الكوكايين وميثيل (MPH) تتأثر بشكل مختلف إقران النبض أثار انتقال GABAergic. (أ) نسب إقران النبض (IPSCs 2 الثانية التحفيز / IPSCs 1 الحادي والتحفيز) المسجلة من ventrobasal (VB) الخلايا العصبية بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض تحفيز النواة المهادية الشبكية (TRN) المحاور من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (الأسود الحانات) والكوكايين 1-اليوم (الحانات رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (أشرطة رمادية داكنة) بنهم. (ب) نسب المقترنة نبض المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض التحفيز من المحاور TRN بحضور mibefradil (20 ميكرومتر)، من الفئران التي عولجت كما في ألف (المالحة: أشرطة سوداء؛ الكوكايين: رمادي فاتح الحانات، MPH: أشرطة رمادية داكنة). * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة والكوكايين. (ج) نسب المقترنة نبض المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض التحفيز من المحاور TRN من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (أشرطة سوداء) والكوكايين لمدة 3 أيام (أشرطة رمادي فاتح)، أو ميلا في الساعة (أشرطة رمادية داكنة ) بنهم، وقتل 1 ساعة بعد الحقن الماضي. * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة والكوكايين. (د) نسب إقران النبض المسجلة من الخلايا العصبية VB بعد 10 هرتز و 40 هرتز إقران النبض التحفيز من المحاور TRN من الفئران التي عولجت بمحلول ملحي (أشرطة سوداء) والكوكايين لمدة 3 أيام (أشرطة رمادي فاتح) أو ميلا في الساعة لمدة 3 أيام (الظلام القضبان الرمادية)، وقتلت 24 ساعة بعد الحقن الماضي. * ع < 0.05، MPH مقابل المالحة والكوكايين. # ف < 0.01، الكوكايين مقابل المالحة، ميلا في الساعة. (ه) أضعاف تغيير ميلا في الساعة والكوكايين يعني نسب إقران النبض (تطبيع يعني نسب الملوحة) في 10 هرتز و 40 هرتز التحفيز. تم العثور على دلالة إحصائية مماثلة عند مقارنة نسب النسبية بين العلاجات.

في الختام، العلاج MPH زيادة PPRs مقارنة المالحة في جميع البروتوكولات الإدارة المستخدمة، ويجري عكسها 24 ساعة بعد تلقي العلاج لمدة 3 أيام في 40 التحفيز هرتز. ومع ذلك، يسببها الكوكايين سوى انتعاش في PPR القيم 24 ساعة بعد 3 ايام بعد إما 10 هرتز أو 40 هرتز التحفيز (الشكل 4 ه). انخفاض Mibefradil احظ القيم PPR أعلى 24 ساعة بعد العلاج الكوكايين لمدة 3 أيام.

زاد الكوكايين المهادية الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين

واقترح آثار الكوكايين على PPRs GABAergic وعلى النسب الحالية LVA / HVA وكذلك تخفيض بوساطة mibefradil في PPR 24 ساعة بعد 3 ايام علاج الكوكايين بنهم وجود تغيرات عابرة في TRN GAD67 متشابك أو VB الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين. الشكل 5 ويظهر مستويات البروتين GAD67 (تقاس طخة غربية) في ح TRN 1 و 24 ساعة بعد بروتوكول حفلة لمدة 3 أيام. وقد لوحظ عدم وجود فروق ذات دلالة إحصائية بين الفئران الكوكايين والمعالجة المالحة (P> 0.05). من ناحية أخرى، كانت الكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين في VB نواة أعلى بكثير 24 ساعة بعد بروتوكولات بنهم 3 يوميا بالمقارنة مع المياه المالحة (الشكل 5 ب، طالب تي -test، T = 4.0، P < 0.05).

الرقم 5. الادارة المتكررة من الكوكايين تغيرت الكالسيوم V 3.1، ولكن ليس GAD67 مستويات البروتين في ventrobasal (VB) وشبكي (TRN) نواة مهادي، على التوالي. (أ) مستويات البروتين GAD67 (تطبيع لالأكتين ومتوسط ​​قيمة المجموعة المالحة) تقاس طخة غربية في ساعة TRN 1 و 24 ساعة بعد الحقن الأخير من بروتوكول حفلة لمدة 3 أيام. (ب) كا V 3.1 مستويات البروتين (تطبيع لالأكتين ومتوسط ​​قيمة المجموعة المالحة) تقاس طخة غربية في ساعة VB 1 و 24 ساعة بعد الحقن الأخير من بروتوكول حفلة لمدة 3 أيام. تم العثور على فروق ذات دلالة إحصائية بين الكوكايين والفئران المعالجة المالحة عندما تم قتل الحيوانات 24 ساعة بعد آخر حقن < 0.05).

نقاش


النتائج المعروضة هنا تظهر تغيرات واضحة من قبل الإدارات حفلة تشبه شبه المزمن إما الكوكايين أو ميلا في الساعة على hyperlocomotion، التشكيل قبل متشابك من انتقال GABAergic والتيارات الكالسيوم بعد متشابك من النوى المهادية الحسية. نتائجنا تشير الى ان آثار الكوكايين كانت أقوى من MPH وتنوعت وفقا لبروتوكولات إدارة مختلفة. MPH تتأثر بشكل مطرد أثار انتقال GABAergic.

الكوكايين وMPH تتأثر بشكل مختلف hyperlocomotion

ارتبط تعزيز السريع الكوكايين وبوساطة MPH في الحركة في القوارض مع قدرتها على زيادة مستويات الدوبامين خارج الخلية وبافراز في النواة المتكئة والمذنبة-putamen (Kuczenski وسيغال 1992، 2001، سيجال وKuczenski 1999). على عكس الكوكايين، فشل MPH لزيادة مستويات السيروتونين خارج الخلية (Kuczenski وسيغال 1997؛ سيجال وKuczenski 1999) بسبب ضعف تقارب ملزم من أجل SERT (عموم وآخرون 1994؛ Gatley وآخرون 1996). MPH (IP) وقد استخدم على نطاق واسع في الفئران في مجموعة تركيز نفس الكوكايين (Kuczenski وسيغال 2001؛ Drerup وآخرون 2010؛ ثانوس وآخرون 2010). ومن المتفق عليه أن MPH والكوكايين قد تشترك الممرات العصبية لممارسة آثارها (Volkow وآخرون 1999b؛ أرجنتو وآخرون 2012). هنا، والإدارة MPH مثل حفلة، على غرار غير المنصوص عليها، MPH المتكررة الإدارة الذاتية وصفها في المراهقين (مورتون وستوكتون 2000)، ومقارنة مثل حفلة الكوكايين، ولم تظهر أي تغيير في hyperlocomotion بين أيام من العلاج، على الرغم من تعزيز hyperlocomotion فوق مستويات المالحة (Drerup وآخرون 2010). كانت يسببها MPH hyperlocomotion حساسة للنوع T-مانع قناة الكالسيوم 2-الأوكتانول (0.07 مغ / كغ، والملكية الفكرية؛ P> 0.05؛ لا تظهر البيانات). ذكرت مجموعتنا في وقت سابق ان شارك في إدارة إدارة النظامية من نوع T-قنوات الكالسيوم حاصرات خفضت بشدة hyperlocomotion الناجم عن واحد حفلة الكوكايين الحاد (Bisagno وآخرون 2010). كما تم وصفه أنه MPH زيادة مستويات الدوبامين في TRN، والحد من hyperlocomotion من خلال تفعيل مستقبلات D4 (Erlij وآخرون 2012)، مما يدل على أن عملية الحد الذي قد يفسر لماذا MPH الإدارة المتكررة لم تزد مستويات hyperlocomotion فوق بوساطة الحادة المستويات.

تغييرات الكوكايين والتي يسببها ميلا في الساعة على انتقال GABAergic من TRN: مستويات متشابك مونوامين مقابل الخصائص الذاتية

وقد لوحظت آثار الكوكايين وMPH على الإفراج GABA عدة ساعات بعد تشريح، مما يشير إلى الآثار طويلة الأمد متعددة من التفاعلات القاعدية العقد / الدماغ-TRN (كونتريراس وآخرون. 1993؛ شمة-Lagnado وآخرون. 1996). ومع ذلك، كانت القيم PPR من الفئران المالحة لا تختلف كثيرا إما عبر العلاجات أو الترددات. التردد استقلال PPRs المقدمة هنا هي في الاتفاق مع التقارير الأخيرة باستخدام اختبار PPR مماثل (تشانغ وآخرون. 2010).

وقد وصفت أن مستقبلات مونوامين يمكن أن تعدل الإفراج GABA من الكرة الشاحبة على TRN. في الواقع، وتفعيل مستقبلات الدوبامين من D4 يعزز PPRs 10 هرتز في afferents الكرة الشاحبة، دون تغيير انتقال GABAergic داخل TRN (Govindaiah وآخرون. 2010). حقيقة أن MPH هو معروف لتفعيل هذه المستقبلات في TRN (Erlij وآخرون. 2012)، ويمكن أن الكوكايين أيضا زيادة مستويات مونوامين في نواة مهادي الحسية الجسدية (روتر وآخرون. 1998)، واقتراح آلية أكثر تعقيدا الكامنة وراء الفروق الملحوظة في PPRs. التغييرات في PPR خلال شبه مزمن إدارات MPH أثرت على حد سواء 10 هرتز و 40 هرتز التحفيز، مما يشير إلى التشكيل من الخلايا العصبية TRN في كل من الترددات كما هو موضح في الجسم الحي (بينو وديشين 1992). بعد هذا التشكيل، قد تحتاج الخلايا العصبية TRN للتعافي من التغيير المباشر (حجب / فتح) من القنوات الأيونية غشاء فضلا عن انتقال GABAergic بعد شبه المزمنة الكوكايين وMPH الإدارات (شوجي وآخرون. 1998؛ فديريتشي وآخرون. 2005). وقد أكدت التجارب الأخيرة التي أدلى بها مجموعتنا هذه الفرضية، وتبين أن المطبقة حمام ميلا في الساعة (10 ميكرومتر) لم يكن لديها أي تأثير على وتيرة إطلاق الخلايا العصبية TRN، في حين الكوكايين (10 ميكرومتر) خفضت بشدة تواتر امكانات العمل (لا تظهر البيانات ؛ ن = 8). وهكذا، الكوكايين شبه مزمن العلاجات قد يوقف TRN النشاط الجسدي (من المعروف أن المطلوبة للنشاط مثير TRN-TRN بين الجسدي الصحيح؛ [الشمس وآخرون. 2012])، موضحا "انتعاش" لوحظ يعني إقران النبض 24 ساعة بعد تناوله الكوكايين لمدة 3 أيام. أن الآثار MPH أكثر اعتدالا على الخصائص الجوهرية للTRN شرح الآثار أكثر تواضعا، ولكن حقت على PPR. سوف GABA الثياب تردد الزيادة الكوكايين بعد يوم واحد (وتصل إلى ثلاثة أيام) يتم بوساطة تأثيره المباشر على ما قبل متشابك المحطات TRN GABAergic، بغض النظر عن العمل التردد المحتملين في مستويات جسدية TRN (أي بما يتوافق مع التقارير مجموعتنا السابقة في وجود TTX، [أوربانو وآخرون. 2009؛ Bisagno وآخرون. 2010]).

كما تم وصفها مستقبلات مثبطات لتعديل الخصائص الذاتية (على سبيل المثال، T-نوع قنوات الكالسيوم) من الخلايا العصبية الحسية المهادية. وتشارك قنوات الكالسيوم T-نوع في العابرين الكالسيوم شجيري البعيدة في الخلايا العصبية TRN مساعدة دمج afferents GABAergic شجيري (كراندال وآخرون. 2010؛ الشمس وآخرون. 2012). ومن المسلم به أنه ليس هناك سوى قنوات P / Q-نوع تقع في كل من التشعبات VB (Pedroarena ويناس 1997) وTRN محطات متشابك المسؤول عن الافراج GABA (إيواساكي وآخرون. 2000). ومن المثير للاهتمام، السيروتونين، ولكن ليس الدوبامين، وقد تم الإبلاغ عن أن تؤثر تأثيرا كبيرا T-نوع التيارات الكالسيوم (بيرغر وتاكاهاشي 1990؛ فريزر وMacVicar 1991)، مما يشير إلى آلية القائم على السيروتونين الممكنة التي تتوسط الكوكايين، ولكن ليس التغيرات التي يسببها ميلا في الساعة في آخر -synaptic LVA / HVA التيارات نسب خلال شبه المزمنة أظهرت الإدارات هنا. تأثيرات مختلفة في قنوات T-نوع بوساطة الكوكايين تتفق مع دون تغيير hyperlocomotion MPH بعد تناوله 2--أوكتانول، ولكن خلافا لعدم وجود آثار mibefradil على PPR بعد الحادة حفلة الإدارة من الكوكايين.

آخر تفسير مناسب لالفروق الملحوظة بين ميلا في الساعة والكوكايين شبه مزمن الإدارات على الإفراج GABA PPR قد يكون وجود تثبيط بوساطة MPH قبل متشابك الإفراج TRN GABA (فديريتشي وآخرون. 2005)، التي من شأنها أن توسط الزيادة في يعني القيم نسبة لوحظ في هذه الدراسة. على العكس من ذلك، فإن الكوكايين يكون لها تأثير أقوى حجب intersomatic TRN GABAergic تثبيط بينما تزايد الثياب عفوية في وقت واحد (أي، التي تعمل مباشرة على المحطات قبل متشابك)، وبالتالي تقدم احتمالات الإفراج GABA في نفس النطاق من محطات المعالجة المالحة (أي وهي حالة تجريبية تتميز PPRs متوسط ​​أصغر، [تشانغ وآخرون. 1997]). وفقا لذلك، حدوث انتعاش في PPR القيم 24 ساعة بعد العلاج الكوكايين 3 يوميا يمكن أن ينظر إليه باعتباره آلية تعويضية. اشتراك قنوات الكالسيوم T-نوع على TRN بين الخلايا GABAergic تثبيط يتسق مع الانخفاض الملحوظ من PPR القيم 24 ساعة بعد تناوله لمدة 3 أيام باستخدام تطبيق حمام من mibefradil. تخفيض بوساطة mibefradil في ارتفاعات عتبة منخفضة بوساطة قنوات T-نوع في TRN المستوى الجسدي (كراندال وآخرون. 2010؛ الشمس وآخرون. 2012) من شأنه أن يقلل الإفراج GABA بين الخلايا العصبية TRN. وبالتالي فإن انخفاض تثبيط الخلايا العصبية TRN تسمح للزيادة في الافراج GABA على الخلايا العصبية VB، الأمر الذي أدى في نهاية المطاف احتمالات أعلى من الإفراج GABA (أي استفزاز الاكتئاب القيم PPR). في اتفاق مع هذه الفرضية، دراسة سابقة من Huguenard والأمير (1994) وقد أظهرت كيف T-نوع التيارات مانع إيثوسكسيميد لم تخفض سوى انفجار اطلاق الخلايا العصبية TRN، ولكن يتزايد كل من أثار وعفوية الإفراج GABA على الخلايا العصبية VB في شرائح من قبل الفئران -adolescent. نحن اختبار هذه الفرضية أيضا بمقارنة القيم PPR التي تم الحصول عليها بعد 24 ساعة لمدة 3 أيام مقابل العلاج 4 يوم (الحيوانات قتلوا 1 ساعة بعد الحقن الماضي). إدارة الكوكايين يوم 4 مزيد من خفض القيم PPRs، على الرغم من أنها كانت أعلى بكثير من PPRs المالحة (ن> 15، المالحة؛ ن> 23 الكوكايين، لا تظهر البيانات).

ولذلك، نتائجنا تدعم فرضية وجود التحفيز الزائد الإفراج GABA عن طريق تغيير TRN تثبيط بين الجسدية بوساطة الكوكايين. بالإضافة إلى ذلك، آثار متباينة من MPH والكوكايين في نواة مهادي الحسية قد يكون لها علاقة مع التغيرات في تركيز الكالسيوم داخل الخلايا في الخلايا العصبية الحسية مهادي، كما ذكرت سابقا في المناطق القشرية (دو وآخرون. 2006). وهناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتميز بين الخلايا، والأحداث اللاحقة التي قد تفسر الاختلافات الملحوظة بين التغيرات الكوكايين والتي يسببها MPH في القيم GABAergic PPR المهادية.

GAD67 والكالسيوم V 3.1 مستويات البروتين

عابر، والآثار بوساطة الكوكايين مثل يرتد على انتقال GABAergic مهادي والتيارات الكالسيوم بعد متشابك يمكن أن تكمن وراء تغيرات جذرية في التعبير البروتين من GAD أو بعد متشابك الكالسيوم V 3.1 قنوات T-نوع. النتائج طخة غربية قدمت هنا عن التغيرات التي يسببها الكوكايين في GAD67 أو الكالسيوم V مستويات 3.1 البروتين يمكن اعتبار الجديد، عدم وجود دراسة سابقة نشرت على حد علمنا. ومع ذلك، فقد استخدمت الكمي لطخة غربية للإبلاغ عن زيادة مستوى GAD بعد انسحاب الكوكايين في الهايبوتلاموس (ما وآخرون. 2008). هنا، مستويات لا تختلف كثيرا من GAD67 (الموجود في الغالب على المستوى الجسدي TRN؛ [Esclapez وآخرون. 1994]) وقد لوحظت تصل إلى 24 ساعة بعد 3 ايام حفلة الإدارة. ومع ذلك، في يوم واحد إضافي الإدارة لم الزيادة GAD67 (لا تظهر البيانات)، ودعم فكرة أن الكوكايين قد تقلل بشكل كبير مستويات GABA قبل متشابك، مما يؤدي إلى ارتفاع تخليق البروتين GAD.

دور قنوات T-نوع في نواة مهادي الحسية وقد توسعت في الآونة الأخيرة، واصفا أن كلا TRN قبل متشابك وبعد متشابك أنواع الخلايا العصبية VB تبادل الكالسيوم V 3.1 مفارز تحتوي على قنوات الكالسيوم T-نوع (كوفاتش وآخرون. 2010). في ضوء هذه التقارير الجديدة، والتغيرات الملحوظة في VB نسب التيارات الكالسيوم بعد متشابك (LVA / HVA) في جميع أنحاء الكوكايين binge- شبه المزمن قد يكون مثل الإدارات مما يشير إلى وجود تعبير التعويضي للقنوات T-نوع كتبها VB و / أو محطات TRN. كان هناك زيادة في كا V 3.1 مفارز التعبير 24 ساعة بعد العلاج لمدة 3 أيام، ولكن ليس في أي وقت اختبار مباشرة بعد كانت تدار الكوكايين (بما في ذلك إدارة لمدة 4 أيام، لا تظهر البيانات). يجدر بالذكر أنه من المتوقع أن يتم غسلها تماما خارج بعد 24 ساعة مستويات الكوكايين البلازما.

كل من حجم وتأخر الوقت آثار بوساطة الكوكايين في GAD والكالسيوم V مستويات 3.1 بروتين توضيحية من دائمة، والآثار الضارة طويلة أن هذا المنشط يمكن أن تمارس على معالجة المهادي القشري الحسي.

الآثار الفنية من الكوكايين التعديلات TRN مستدامة للتفاعل مهادية قشرية

نتائج هذه الدراسة تشير إلى أن الكوكايين وMPH قادرون على تعزيز انتقال GABAergic متشابك في كل المنخفض (10 هرتز) وارتفاع وتيرة (40 هرتز) التحفيز من المحاور TRN وكذلك hyperlocomotion بعد شبه المزمنة بروتوكولات الإدارة. وهذا قد يؤدي إلى فرط الاستقطاب غير طبيعي للخلايا العصبية VB مهادي قشري التصميم، مما أدى إلى المهادي القشري المتكررة التردد المنخفض النشاط انفجار كلا TRN (يناس وGeijo-بارينتوس 1988؛ Huguenard والأمير 1992) وVB الخلايا العصبية (Jahnsen ويناس 1984a، ب؛ ماكورميك و Feeser 1990). وقد اقترح التماسك لفترات طويلة بين التردد المنخفض انفجر اطلاق وارتفاع وتيرة النشاط المهادي القشري خلال الدول مستيقظا لعرقلة المعالجة الحسية (ماكورميك وFeeser 1990)، وكذلك لحث على تغييرات في حس الألم في الفئران (لياو وآخرون. 2011)، والتي هي المعروف أن تقف وراء الامراض المتعددة التي تعرف باسم متلازمة خلل النظم المهادي القشري (يناس وآخرون. 1999؛ Jeanmonod وآخرون. 2003). ارتبط T-نوع القناة خلال تفعيل على مستوى TRN مع السلوكيات المرضية بما في ذلك الصرع (Steriade ويناس 1988؛ Tsakiridou وآخرون. 1995)، وهو اضطراب عصبي يرتبط أيضا مع إدارة المزمنة من الكوكايين، ولكن ليس MPH (ديفلين و هنري 2008). ومن شأن تفعيل أكثر من TRN بوساطة انتقال GABAergic أيضا تغيير الحركة الحسية من خلال نوى الحسية التتابع في المهاد، آلية يعتقد أنها وراء تشوهات EEG كبيرة في مرضى ADHD (رو وآخرون. 2005).

النتائج الموضحة هنا باستخدام بروتوكولات شبه مزمن، تأكيد وتوسيع نتائج مجموعتنا السابقة تظهر التقلبات انتقال GABAergic مهادي وبعد متشابك الكالسيوم النسب الحالية الآليات الرئيسية التي قد تكمن وراء آثار ضارة طويلة الأمد من الكوكايين. التغيرات التي يسببها MPH في انتقال GABAergic باستخدام بروتوكولات إدارة المتكررة تشير إلى أن MPH قد تغير أيضا المعالجة الحسية ولكن بطريقة أقل التخريبية. التعديلات الحالة المستقرة التي كتبها MPH أهمية خاصة لفهم تأثير تناول MPH إما العلاج الدوائي للمرضى ADHD أو في تعاطي المنشطات غير المقررة بين المستخدمين صحي. الدراسات المستقبلية باستخدام أطول، لا تزال هناك حاجة بروتوكولات المزمنة لتحديد ما إذا كانت آثار الكوكايين وبوساطة MPH الموصوفة هنا قد تتحول إلى تغيرات المهادية طويلة الأمد.

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس