عرض مشاركة واحدة
  #4  
قديم 11-22-2015, 08:11 PM
رافت ابراهيم رافت ابراهيم غير متواجد حالياً
عضو ذهبي
 
تاريخ التسجيل: Dec 2011
المشاركات: 520
افتراضي تحليل تحور الجين spastin (SPG4) في المرضى الذين يعانون من خزل سفلي تشنجي وراثي

 

http://jmg.bmj.com/content/37/10/759.full


ملخص

BACKGROUND راثي خزل سفلي تشنجي هو شرط غير المتجانسة وراثيا. مؤخرا، تم الإبلاغ عن حدوث طفرات في الجين spastin في الأسر المرتبطة بموضع SPG4 المشترك على الصبغي 2p21-22.
الأهداف لدراسة السكان من المرضى الذين يعانون من خزل سفلي تشنجي وراثي للطفرات في الجين spastin (SPG4) على الصبغي 2p21-22.
تم تحليل طرق DNA من 32 مريضا (12 من الأسر المعروفة لتكون مرتبطة SPG4) للطفرات في الجين spastin التي كتبها ضفيرة واحدة تحليل تعدد الأشكال متعلق بتكوين والتسلسل. تم فحص جميع المرضى أيضا سريريا.
النتائج تم تحديد ثلاثة عشر SPG4 الطفرات، منها 11 رواية. وتشمل هذه الطفرات مغلطة، هراء، انزياح الإطار، والطفرات موقع لصق، ومعظمها تؤثر على كاسيت AAA. وصفنا أيضا إجراء تبديل النوكليوتيدات خارج هذه المنطقة المحفوظة التي يبدو أنها تتصرف كما طفرة المتنحية.
الاستنتاجات الطفرات المتكررة في الجينات spastin غير شائعة. وهذا يقلل من سهولة الكشف عن الطفرات كجزء من العمل حتى التشخيص المرضى الذين يعانون من خزل سفلي تشنجي وراثي. النتائج التي توصلنا إليها انعكاسات هامة على وظيفة يفترض من spastin وخطط للكشف عن طفرة في المرضى الذين يعانون HSP.
خزل سفلي تشنجي وراثي (HSP) ويضم مجموعة من الاضطرابات العصبية الموروثة. ميزة تحديد السريرية هي أقل التدريجي ضعف الأطراف والتشنج، مع ميزة المرضية شيوعا هي انحطاط مساحات القشري. 1-3 HSP غير المتجانسة وراثيا. وقد وصفت جسمية مهيمنة، راثي متنحي، وX الميراث مرتبط مع 13 مواضع التي نشرت حتى الآن، 16/04 الأكثر شيوعا طريقة الميراث يجري جسمية مهيمنة.
وقد تم التعرف على الجينات لأربعة فقط من هذه المكاني. وX اثنين من ربط أحد أشكال في SPG1 وSPG2 (نماذج نادرة من HSP فيها المرض هو أليلية مع الظروف العصبية المعقدة الأخرى) هي نتيجة لطفرات في الجينات لL1 جزيء التصاق الخلايا والبروتين شحم بروتيني، على التوالي. 4 5 A المتنحية ويتسبب الشكل من المرض مرتبط 16q24.3 الصبغي (SPG7) من خلال الطفرات في جين paraplegin، 17 لmetalloprotease الميتوكوندريا عائلة البروتين AAA (ATPases المرتبطة مع مجموعة متنوعة من الوظائف الخلوية). 18
في الآونة الأخيرة، والطفرات في رواية البروتين، spastin، وقد وصفت في سبع عائلات مع ADHSP المرتبطة بموضع SPG4 على الصبغي 2p21-22. 19 20 غالبية العائلات مع يورث HSP (40-60٪) 21 22 إظهار الربط هذا الموضع. Spastin، مثل paraplegin، ينتمي إلى أسرة البروتين AAA، على الرغم من أن هذه البروتينات يشتركان تناظر قليلا خارج عزر AAA. على عكس paraplegin وهو البروتين الميتوكوندريا، وقد اقترح spastin أن يكون توطين النووية. لا يعرف الكثير عن وظيفة spastin على الرغم من أنه مثلي للغاية ل26S proteosome الوحيدات ويمكن أن تشارك في الجمعية أو وظيفة البروتين المجمعات. 19 في هذه الورقة نفيدكم 13 الطفرات في جين spastin، بما في ذلك واحدة التي هي موجودة homozygously .
طرق

وشارك ما مجموعه 32 مريضا بريطانيا لا علاقة لها مع HSP في هذه الدراسة. اثنتا عشرة أعضاء تأثرت الأسر حيث سبق أن أظهرت الربط موضع SPG4 والباقي إما من الأسر حيث أظهر هذا المرض والنمط السائد وراثي جسمي من الميراث، ولكنها كانت صغيرة جدا لتحليل الربط، أو كانت القضية المعروفة فقط في عائلتهم. تم فحص واحد على الأقل من أفراد المتضررين من كل عائلة وتاريخ عصبي التفصيلية التي التقطها أحد مؤلفي (CMD، KW، ER).
وأجري استخلاص DNA من الدم الكامل من استخدام الإجراءات القياسية. تم تصميم كبسولة تفجير عن الكشف عن الطفرات التي كتبها ضفيرة واحدة تعدد الأشكال متعلق بتكوين (SSCP) تحليل 17 الإكسونات من الجين SPG4 باستخدام تسلسل [كدنا spastin (بنك الجينات الانضمام AJ246001) والتسلسل الجيني (بنك الجينات الانضمام AJ246003). 19 متواليات الاشعال هي هو مبين في الجدول 1.

الجدول 1
تسلسل الاشعال

تم تنفيذ PCR باستخدام درجات الحرارة الصلب لالاشعال هو مبين في الجدول 1. تم تنفيذ SSCP على نوعين من المواد الهلامية: 50٪ MDE TM (Flowgen) و 5٪ الهلام الجلسرين بنسبة 0.6٪ في TBE و 8٪ بولي أكريلاميد (49: 1 مادة الأكريلاميد: bisacrylamide) المواد الهلامية في 0.6٪ TBE. إلا أن النوع الأخير من هلام لا يسمح للكشف عن أية تغييرات من لم ينظر في هلام MDE، ولكن كان هذا الجل أفضل في فصل منتجات 1A اكسون و1B التضخيم. والتسلسل منتجات PCR تظهر التغييرات SSCP مباشرة على ABI377 DNA التسلسل. بالإضافة إلى ذلك، تم تأكيد بعض التغييرات عن طريق الاستنساخ في pGemTeasy (PROMEGA) ومتسلسلة. لكل تغيير SSCP في الكشف عن المرضى، تم فحص 100 الكروموسومات الطبيعية في ظل نفس الظروف.

النتائج

تم العثور على طفرات في الجين SPG4 في 14 عائلة، تسعة منهم كانت معروفة بالفعل أن تكون مرتبطة بموضع SPG4.
الفحص السريري للمرضى

تم فحص واحد على الأقل من أفراد المتضررين من كل عائلة. موجز للنقاط الرئيسية في تاريخ كل عائلة ومنهم من تم تحديد طفرة spastin هو مفصل أدناه في الترتيب الذي يتم عرض النتائج في الجدول 2. وتتلخص السمات السريرية لكل عائلة في الجدول 3. وقد وصفت المظاهر السريرية للعائلات C5، C7، C22، C24، C25، C27 وبمزيد من التفصيل السابق. 22

الجدول 2
طفرات جديدة في الكشف عن الجينات spastin


الجدول 3
المظاهر السريرية التي لوحظت في الأسر التي لديها طفرات الجينات spastin
N35

كان مريض واحد درست في هذه العائلة العضو الوحيد من عائلته (في السابق أو الأجيال اللاحقة، بما في ذلك أولاده الثلاثة وأحفاده 11) مع أي أعراض عصبية على الإطلاق. وقال انه اثنين sibs، أحدهم توفي عن عمر يناهز ال 39 عاما من احتشاء عضلة القلب، والآخر في سن 81 عاما من "الشيخوخة". لا كان لديه أي مشاكل في التنقل. ولم تتمكن لتشغيل، ولكن كان ذلك بدون أعراض حتى سن 60 عاما عندما بدأت تلاحظ بطء له مشية وصلابة من أطرافه السفلى مع وجود اتجاه لرحلة وصعوبة تسلق التلال. تقدمت هذه الأعراض ببطء، ولكنه بقي متنقل في سن 75 عاما. على الفحص العصبي، وقال انه قدم جوفاء خفيفة، وهو قطني قعس مبالغ فيه، ومتناظرة، خزل سفلي تشنجي متوسط ​​الشدة مع ضعف بسيط من شعور الاهتزاز في الأطراف السفلية. وأفاد درجة خفيفة من تردد البولية، ولكن كانت الأطراف العلوية العادي.
C24

وكانت المعلومات السريرية المتاحة لسبعة أعضاء المتضررين من جيلين من هذه العائلة، وجميعهم كان المظاهر السريرية النموذجية للشلل سفلي تشنجي النقي. العمر عند ظهور الأعراض تراوح 2-33 سنوات. تستخدم ثلاثة أعضاء الأسرة عصا واحدة، أعراض لمدة 30 عاما، وتستخدم كرسي متحرك. وكان أحد أفراد الأسرة تورط المثانة، يعاني أحد أفراد الأسرة من الإمساك، وآخر من الإلحاح البرازي. كان معدل تطور المرض متغير، تميل على الرغم من أن يكون بطيئا. وكان ثلاثة مرضى الطرف العلوي فرط المنعكسات. وكان ثلاثة مواضيع قدم جوفاء، وهما كان خفيفة الى معتدلة القاصي أطرافهم ضمور عضلي، وكانا قد غيرت الطرف السفلي الاهتزاز الإحساس. لم يكن أفراد الأسرة الادراكي العلني.
N4

وقد شوهدت خمسة أفراد الأسرة المصابين في هذه العائلة، ما بين 12 و 70 سنة من العمر. كان بداية في أصغر طفل قبل سن 5 سنوات، ولكن في أعضاء الأسرة من كبار السن تراوحت 20-37 عاما. باستثناء أحد أفراد الأسرة الإناث، والآن وهي في أواخر 30S، الذي يحتاج إلى كرسي متحرك في غضون ثلاث سنوات من التشخيص، كان التقدم بطيئا جدا. مشاركة الطرف العلوي هو الحد الأدنى (ردود الفعل السريع فقط في 4/5 أعضاء)، وثلاثة ديك مشاركة المثانة، والنتائج في الأطراف السفلية هي من خزل سفلي تشنجي النقي دون إضاعة أو التغيرات الحسية. يتم الإبلاغ عن أية تغييرات المعرفية في أي من أفراد الأسرة.
N5

ومن المعروف عشر موضوعات المتضررة في هذه العائلة الكبيرة، تتراوح أعمارهم بين 27 إلى 72. اثنين من أفراد الأسرة الأصغر سنا ولم يبلغ عن وجود الأعراض قبل سن 5 سنوات. كان بداية في أفراد الأسرة الأكبر سنا بين 20 و 50 عاما. لا تزال واحدة حاملة الجين تلزم بدون أعراض في 38 عاما. ثلاثة مواضيع هي مستخدمي الكراسي المتحركة، عن بعد 15 سنوات على الأقل من الأعراض. كما هو الحال مع N4 الأسرة (التي تعرف الآن لديهم نفس الطفرة، انظر أعلاه)، وكانت جميع النتائج متسقة مع خالص الشلل النصفي التشنجي وراثي، مع عدم وجود مشاكل في الادراك، على الرغم من شخص واحد قيل لديهم اضطراب الوجداني بجنون العظمة.
وأجري تشريح للخروج على عضو واحد من هذه العائلة وكانت النتائج متسقة تماما مع خالص HSP، تظهر أمراض تقتصر على مساحات القشري. أعلنت وشحوب المايلين وفقدان المحاور خصوصا في مساحات القشري الجانبي وبطني. وكانت خسارة المايلين في العمود الظهري الأبرز في الحبل الشوكي العنقي، ولكن مسارات القشري في السويقة المخية تم الحفاظ عليها بشكل جيد.
N3

معلومات قليلة نسبيا متاح في هذه العائلة. ومع ذلك، ذكرت بداية في جميع المواد حيث تم تسجيل هذا كان قبل سن 5 سنوات. شخص واحد يحتاج إلى كرسي متحرك.
N2

تم الإبلاغ عن هذه العائلة سابقا. 23 وكان ظهور المرض في الجيل الأصغر في العامين الأولين من الحياة والمراهقين في وقت متأخر من الأجيال السابقة. في لكن كل واحد من أفراد الأسرة، والنمط الظاهري يتفق مع خالص HSP. ومع ذلك، كان واحدا من أفراد الأسرة الأكبر سنا تاريخ من التدهور المعرفي التدريجي في العامين قبل وفاته. أظهر تشريح تاو منتشر التغييرات القشرية ذات الصلة. وكان أفراد الأسرة المتضررين آخر مشكلة المعرفية لديهم ضعف معمم التعلم اللفظي، والتعلم غير اللفظية، والذاكرة، والكشف عن مشاكل في التعلم في مرحلة الطفولة. أهمية هذه الصعوبات لها HSP غير معروف.
C27

تم فحص تسعة أعضاء المتضررين من ثلاثة أجيال من هذه العائلة. العمر عند ظهور الأعراض تراوح من 10 سنوات إلى 29 سنة. وكانت موضوعين المتضررة سريريا أعراض تتراوح أعمارهم بين 23 و 25 عاما. وكان معدل تطور المرض متغير، على الرغم من أن تميل إلى أن تكون بطيئة. موضوع واحد تحتاج إلى عصا المشي وثلاثة، وكلها أعراض لأكثر من 30 عاما، استخدام كرسي متحرك. وكان خمسة مرضى مشاركة المثانة وثلاثة من هذه اللازمة القسطرة البولية. عانى ثلاثة مرضى من الإمساك وهما من المواضيع الذكور عاجز. وكان ستة موضوعات الطرف العلوي فرط المنعكسات. وأظهر فحص أطرافهم السفلى علامات نموذجية من خزل سفلي تشنجي في جميع الحالات. وكان ستة مواضيع تشوه القدم، وكان واحد معتدل البعيدة أقل الهزال أطرافه، وكان الثلاثة في غياب الطرف السفلي الاهتزاز الإحساس. لم يكن أفراد الأسرة الادراكي العلني.
C5

تم فحص ثمانية أعضاء المتضررين من ثلاثة أجيال. كان العمر عند ظهور الأعراض تتراوح بين 5 و 50 عاما، وأحد أفراد الأسرة المتضررين عديمة الأعراض في سن 28 عاما. مطلوب اثنين من أفراد الأسرة عصا المشي وأحد أفراد الأسرة، أعراض لمدة 47 عاما، استخدام كرسي متحرك. وكان معدل تطور المرض متغير، على الرغم من كان بطيئا بشكل عام. كان تورط المثانة الحالي في ثلاث مواد، مع واحد تتطلب القسطرة سكنى، وعانى خمسة من أفراد أسرة من الإمساك. تم العثور على علامات نموذجية من الطرف السفلي خزل سفلي تشنجي في جميع المواد المتضررة. وكان أربعة من أفراد أسرته الطرف العلوي فرط المنعكسات، وكان خمسة موضوعات قدم جوفاء، وكان اثنان معتدل البعيدة أقل ضمور عضلي أطرافهم. وكان خمسة من أفراد أسرة انخفضت انخفاض الإحساس أطرافهم الاهتزاز واثنين قد تضاءلت الطرف السفلي الإحساس بالألم. ولم ترد تقارير عن ضعف الادراك العلني في أي من أفراد الأسرة. عانى ثلاثة من أفراد الأسرة أيضا من تنكس المشيمية، الذي فصل في الأسرة بشكل مستقل عن HSP.
N36

واعتبر عضو واحد فقط من هذه ثلاثة أجيال العائلة، وكان بداية مرضه في 40 عاما. وكانت حالة ببطء تدريجي وبعد مرور 12 عاما انه لا يزال متنقل. الفحص السريري يتسق مع HSP النمط الظاهري الخالص، مع بعض الهزال القاصي والحسية خسارة طفيفة على ما تستهلكه والاهتزاز في أطرافه السفلى. أظهر اختبار Neuropsychometric ضعف خفيف من التعلم اللفظي. يعقد تقييمه هو تاريخ من شلل الأطفال والسل التهاب السحايا في مرحلة الطفولة. والدته، الذي كان يفترض من التاريخ أن تتأثر مع HSP، وكان الخرف يصيب في وقت متأخر، كما فعل خالة.
C7

شوهد ستة أفراد الأسرة المتضررين من جيلين من هذه العائلة. العمر عند بداية للمرضى أعراض تراوح 2-37 سنوات، وكان موضوع المتضررين واحد بدون أعراض في 22 عاما. استخدام أحد أفراد الأسرة العصي واثنين، وكلاهما أعراض لأكثر من 20 عاما، وتستخدم كرسي متحرك. وكان معدل تطور المرض متغير، تميل على الرغم من أن يكون بطيئا. وكان ثلاثة من أفراد الأسرة تورط المثانة. وكان خمسة من أفراد أسرة كانت النتائج العلوي فرط المنعكسات الأطراف وأقل فحص أطرافهم نموذجية من خزل سفلي تشنجي موجودة في جميع الحالات. وكان اثنين من المرضى تشوهات القدم واحدة قد تضاءلت أقل اهتزاز الأطراف وإحساس مشترك الموقف. وذكر أيا من الموضوعات التي لديها ضعف الادراك.
C22

تم فحص خمسة أفراد الأسر المتضررة من جيلين من هذه العائلة. العمر عند بداية للمرضى أعراض تراوح 2-30 سنوات، وكان موضوع المتضررين واحد بدون أعراض في 23 عاما. مطلوب واحد من أفراد الأسرة عصا المشي على الرغم من أن لا شيء يلزم على كرسي متحرك. وكان ثلاثة من أفراد الأسرة تورط المثانة واشتكى أحد من الإمساك. معدل تطور المرض تميل إلى أن تكون بطيئة، على الرغم من أن المتغير. وكانت نتائج الفحص السريري نموذجية من خزل سفلي تشنجي موجودة في جميع الحالات. وكان أحد أفراد الأسرة الطرف العلوي فرط المنعكسات، كان ثلاثة مواضيع قدم جوفاء، وكان ثلاثة مواضيع غيرت مسة غرامة، والاهتزاز، أو مشترك الإحساس الموقف. لم يتم الإبلاغ عن ضعف الادراك في أي من أفراد الأسرة.
N37

هذا المريض هو القضية المعروفة فقط من HSP في عائلته. كان المرض بداية في 11 عاما، وكان ببطء شديد تقدمية. العلامة الوحيدة على المرض في الأطراف العلوية هي ردود الفعل وتر سريعة. في الأطراف السفلية، لديه ضعف القاصي معتدل درجة الحرارة والاهتزاز الإحساس. لديه مشكلات في الحالة المزاجية، ولكن لا الميزات الأخرى المرتبطة بها.
C25

تم فحص اثني عشر عضوا المتضررين من ثلاثة أجيال من هذه العائلة. العمر عند ظهور الأعراض تراوح 16-41 سنة، وكان موضوع واحد مع وجود علامات على الفحص بدون أعراض في 30 عاما. أربعة من أفراد الأسرة تحتاج إلى عصا المشي وخمسة، كل أعراض لمدة 30 سنوات على الأقل، مطلوب على كرسي متحرك. وكان خمسة مرضى مشاركة المثانة، مريض واحد يعاني من الإمساك، وآخر من الإلحاح البرازي. وكان معدل تطور المرض متغير، ولكن بطيئة عموما. وكان اثنين من المرضى خفيف الطرف العلوي فرط المنعكسات، في واحدة مصحوبة طفيف ضعف الطرف العلوي. في جميع الحالات كانت هناك علامات نموذجية من خزل سفلي تشنجي في الأطراف السفلية. وكان ستة مرضى قدم جوفاء وثلاثة عبوة الحزاز. خفيفة الى معتدلة أقل ضمور عضلي أطرافهم كان حاضرا في ثلاث حالات. وكان سبعة مرضى الطرف السفلي تشوهات الحسية، التي تنطوي على اتصال جيد، والإحساس بوخز أو الشعور موقف مشترك. وكان أحد أفراد الأسرة المتضررين الذين تتراوح أعمارهم بين 80 الخرف يصيب الراحل، على الرغم مزيد من التفاصيل السريرية حول هذه غير متوفرة.
N8

شوهد اثنين من أفراد الأسرة المتضررة سريريا. واحد 70 سنة حاملة الجين القديم هو غير متناظرة. وكان كل أفراد الأسرة المصابين ظهور المرض في 40 عاما، واحدة يتطلب على كرسي متحرك بعد سنوات عديدة. جميع المواد لها القاصي تلف العضلات وقدم جوفاء. ولم ترد أنباء عن تورط المثانة. في أحد أفراد العائلة المتضررين 86 سنة، كان هناك تاريخ أربع سنوات من الخرف التدريجي مع معتدل الصعوبات كلمة الحقائق وعلامات إطلاق الفص الجبهي على اليمين. أم لا هذا يتعلق مضاعفات HSP لها أو له علاقة عملية المرض من قبيل الصدفة آخر لم يثبت على وجه اليقين.
التحليل الجيني

باستخدام التحليل SSCP حددنا 13 طفرات جديدة في الجين SPG4. لم يكن أي من هذه الطفرات موجودة في لوحة التحكم من 100 الكروموسومات الطبيعية. كان واحد فقط من هذه الطفرات (859C> G) موجودة في أكثر من عائلاتنا. لم تكن معروفة من العائلتين N4 وN5 لتكون ذات صلة، ولكن على حد سواء الأسر تنبع من نفس المنطقة من انجلترا ولها نفس النمط الفرداني للعلامات D2S2203 وD2S2347 جانبي الجين SPG4، والتفسير الأكثر احتمالا هو أن كلا من سهم الأسر سلف مشترك.
اثنين من الطفرات 1298 + 1G> لو+ 1538 3del (aagt) وقد وصفت من قبل Fonknechten وآخرون 20 والطفرات المتبقية هي رواية.
معظم الطفرات (7/13) هي الطفرات لصق، وكلها تؤثر على موقع لصق المانحة. ومن المتوقع أن يؤدي إلى اكسون الطفر من اكسون السابقة هذه الطفرات، وسوف يؤدي إلى انزياح الإطار في التسلسل المتبقية، ما عدا في حالة من الطفرة التي تنطوي على اكسون 8 (المريض N3). ومن شأن كل هذه الطفرات تؤدي إلى اضطراب شديد في عزر AAA الحفاظ عليه.
ثلاث طفرات (859C> G، 411delG، و1406delT) تؤدي مباشرة أو غير مباشرة لوقف كودون سابقة لأوانها، وسوف تؤدي إلى إنتاج بروتين اقتطاع.
الطفرات مغلطة اللذين تتصرف بطريقة المهيمنة وكلاهما يقع في المنطقة كاسيت AAA الحفظ وكلاهما يؤثر على الأحماض الأمينية التي يتم حفظها للغاية بين spastin والبروتينات ترتبط ارتباطا وثيقا. 19 وطفرة في الأسرة N2 محل أرجينين، وهو حمض أميني أساسي مع الجلايسين ، وهو أصغر بكثير ومحايد. طفرة في N8 محل حمض الأسبارتيك، وهو من الأحماض الأمينية الحمضية مع الحامض الاميني، وهو حمض أميني أساسي مع سلسلة الجانب العطرية. يبدو من المرجح أن هذه التغييرات من شأنها تقلل بشدة أو تلغي وظيفة البروتين. هناك ما يميز هؤلاء المرضى ظاهريا من ذوي الطفرات هراء / لصق. عمر البدء متأخرا (40) في N8 الأسرة، ولكن كما يتبين من الجدول سن العام من بداية في هذه الأسر هو متغير جدا حتى داخل الأسرة. في كل من الأسر N2 و N8، وقد وصفت عضو من كبار السن الذين يعانون من الخرف، رغم أن هذه كانت موضوع واحدة في كل أسرة فقط.
كان المريض N35 متماثل (الشكل 1) لطفرة في اكسون 1 والتي تحل محل سيرين (حمض أميني قطبي) في موقف 44 مع يسين، وهو حمض أميني غير القطبية. وأكد العثور على التغيير متماثل باستخدام مجموعة مختلفة من الاشعال، وهذه المرة exonic تماما. تكرار تسلسل هذا المنتج تنتج نفس النتيجة. كان والدا هذا المريض ميتا، ولكن أيا منهما لم تظهر أي أعراض الشلل النصفي التشنجي في حياتهم. تم الإبلاغ عن المريض sibs والأطفال والأحفاد أيضا أن تكون خالية من المرض. ولم تعرف والدي المريض أن يكون ذو قربى، ولكن التفسير الأكثر ترجيحا هو أن كل أليل جاء من نفس المؤسس. وأظهر تحليل النمط الفرداني من العلامات المرافقة أن أقرب اثنين علامات، D2S2203 وD2S2351 على الجانب telomeric من الجين spastin، كان متماثل كما هو متوقع، في حين أن أقرب علامات على الجانب القسيم المركزي، D2S2325 وD2S2347، كان متخالف. هذه العلامات الأخيرة، ولكن، بعيدا عن الجينات spastin على خريطة المادية 24 وrecombinants بين هذه العلامات والجينات spastin وقد سبق لاحظت. كان هذا المريض من شمال شرق إنجلترا، كما كانت الكروموسومات مراقبة 100 تستخدم للتحقق من وجود هذه الطفرة في عدد السكان غير HSP. لم يتم العثور على عينات أخرى لهذا التغيير، لذلك نحن نعتقد أن هذا من المرجح أن يكون المرض المرتبطة تسلسل تغيير يتصرف بطريقة المتنحية. Fonknechten وآخرون 20 أيضا لا توجد الأشكال في أي الإكسونات من الجين spastin في 142 مواضيع تحليلها.

الشكل 1
SSCP وتسلسل تحليل المريض N35. (A) منتجات اكسون 1A PCR من N35 وطبيعية عينة من الحمض النووي S1 التالية الكهربائي على هلام بولي أكريلاميد (فضية الملون). لاحظ وجود غير طبيعي وعدم وجود العصابات العادية في المريض N35. (B) تسلسل المباشر الجزئي للمنتج PCR اكسون 1A لN35 وS1 العينة الضابطة، وتبين أن N35 غير متماثل للT في موقف 256.

نقاش

وقد أظهرت التحليل الجزيئي للجينات لspastin في هذه اللوحة من المرضى HSP البريطاني 13 الطفرات، 11 منهم رواية. كان اختبار (باستثناء عائلتين ربما يكون منشؤها من سلف مشترك) لكل عائلة طفرة مختلفة. وهذا يؤكد أن الكشف عن الطفرات في هذا الجين في المرضى الذين يعانون من الشلل النصفي التشنجي ستكون مهمة أكثر صعوبة مما لو كان قد تم تحديد عدد أقل من الطفرات المتكررة. 19 وما يزيد من تعقيد هذه المهمة، لدينا أدلة على أن ليس كل الطفرات SPG4 قد يتم الكشف عن استخدام هذه تقنيات الكشف عن الطفرات الروتينية، كما لم يتم العثور على طفرات في ثلاث عائلات حيث تم أظهرت الربط موضع SPG4. هذا العائد ناقصة من الطفرات حتى في الأسر التي يعرف أنها ترتبط إلى وأفيد أيضا عن طريق Fonknechten وآخرون موضع SPG4 23 في دراستنا، وهذا قد يعكس القيود المفروضة على SSCP الذي يكتشف بصورة روتينية فقط ما يقرب من 80٪ من الطفرات. بدلا من ذلك، فإنه قد يعني أن تسلسل خارج تحتاجه المنطقة الترميز لدراستها، مثل موقع المروج أو تذييل بعديد الأدينيلات. وهناك احتمال آخر، خصوصا أن الكثير من الطفرات وصفها حتى الآن يؤثر على الربط، يمكن أن يكون هذا التسلسل يتغير في إنترونات لم يتم الكشف عن استخدام هذه مجموعات من الاشعال قد تسبب المرض من خلال تفعيل وintronic لصق موقع خفي. ومن غير المعروف بعد ما اذا كانت توجد أشكال تقسم بدلا من spastin، التي يحتمل أن تحتوي على تسلسل اكسون إضافية، كما لم تصور النصوص RNA التي النشاف الشمالي، وذلك بسبب وفرة منخفضة. 19 وفي دراسة مستقلة سبقت تورط هذا الجين في HSP، تم عزل كدنا] spastin من الدماغ عن طريق Kikuno وآخرون 25 والبروتين المسمى KIAA1083. هذه النسخة كدنا] يفتقر اكسون 4، ولذلك فمن الممكن أن المتغيرات مزيد من لصق لا تزال تتسم.
درس عدد من الطفرات المختلفة الموجودة، جنبا إلى جنب مع العائد المنخفض من الطفرات في الأسر الصغيرة وحالات متفرقة، تشير أيضا إلى أن الكشف عن الطفرات في spastin قد لا يكون في حد ذاته وسيلة منطقية إلى الأمام من أجل التشخيص الجزيئي في HSP لبعض الوقت. وبالإضافة إلى ذلك، فإن المظاهر السريرية وصفها في هذه الأسر التي لديها طفرات spastin لا توفر أدلة كثيرة مفيدة للكشف عن أي من المرضى سريريا لاستهداف لتحليل الطفرة spastin. وقد HSP تصنف تقليديا إلى "النقي" والأشكال "معقدة" اعتمادا على ما إذا التشنج هو السمة الوحيدة أو ما إذا كانت هناك أعراض أخرى، مثل الصرع، والخرف، أو ترنح. 26 وكان معظم الأسر التي لديها طفرة في spastin على HSP النقي النمط الظاهري، مع اختلاف ملحوظ في العمر عند بداية وشدة المرض، على الرغم من المرض عموما معتدل نسبيا كان المعيار. من 66 المواضيع المتضررة فحص أو يعرف من في هذه الأسر، والمطلوب 18 فقط على كرسي متحرك، أكثر في مراحل متأخرة من المرض. علامات طفيفة فقط (ردود الفعل السريع) وعادة ما توجد في الأطراف العلوية، مع التغيرات الحسية اكتشفت في الأطراف السفلية في أقلية من المرضى. كان تورط المثانة متغير. أهمية تقارير التدهور المعرفي، مشاكل المزاج، أو الاضطرابات العاطفية في أفراد الأسرة في بعض الأحيان من الصعب تقييم. تاريخ بداية الخرف في وقت متأخر من N2 الأسرة أكثر وضوحا، ويتوافق مع التقارير السابقة من مشاكل في الادراك في الأسر SPG4. عموما، ومع ذلك، وفقا لتقارير سابقة الربط مقرها، 21 فمن الصعب أن نتبين ملامح محددة من شأنها أن تؤدي إلى الشك السريري للمشاركة spastin في حالة واحدة.
ومن المتوقع أن غالبية الطفرات الكشف حتى الآن في SPG4 أن يؤدي إما بروتين اقتطاع أو بروتين تغير بشدة، مؤكدا أن haploinsufficiency هو السبب في النمط الظاهري غير طبيعي. وتمثل طفرات الموقع وصلة لسبعة من أصل 13 الطفرات التي وجدنا ويقال هذا تيرة عالية من لصق الطفرات الموقع أيضا Fonknechten وآخرون. 20 واثنين من الطفرات مغلطة المهيمنة نفيدكم تؤثر الأحماض الأمينية في المجال AAA الحفاظ مشتركة مع 11 الطفرات مغلطة وصفها Fonknechten وآخرون، 20 مما يدل على أن هذه المنطقة هي حاسمة لوظيفة البروتين.
طفرة مغلطة في اكسون 1، وهو خارج عزر AAA الحفظ، موجود homozygously في المريض درسنا. هذا المريض ليس لديه أقارب المتضررة مع HSP. سريريا، لديه مرض خفيف جدا مع المتأخر. كان هذا التغيير تسلسل غير موجود في عدد السكان سيطرتنا. لسوء الحظ لم تكن هناك أعضاء آخرين من هذه العائلة المتوفر للدراسة. شريطة أن هذه ليست تعدد الأشكال النادرة مع المظاهر السريرية للHSP في هذا الشخص وجود سبب بديل، وهذا هو أول طفرة متنحية في spastin إلى وصفها. راثي مقهور HSP (ARHSP) هي العائلات النادرة والأقارب ترتبط الكروموسومات 8Q، 16q، ولقد وصفت 15q، 12-14 ولكن حتى الآن لم أسر مع الربط إلى مكان SPG4. هذه الطفرة، التي تحل محل سيرين مع بقايا يسين في موقف 44، هي في الجزء المبكر من البروتين، وهي المنطقة التي يظهر الحفظ كبير بين spastin والبروتينات ذات الصلة. 19 وفي الواقع، في وثيقة الصلة بروتين الخميرة SAP1، هناك ليسين في هذا الموقف. الفرضية الأكثر احتمالا هي أن هذه الطفرة يتصرف باعتباره ناقص المفعول، الأليل الذي ينتج المبلغ المخفض أو نشاط من المنتجات. إذا كان هذا التحول هو فقط على أليل واحد، لا يتم تقليل كمية spastin بما يكفي للتسبب أعراض، ولكن الموضوعات مع نسختين من أليل متحولة يكون غير كاف spastin. وقد تم بالفعل اقترح إمكانية أن "تأثير العتبة" لمستويات spastin قد تكون حاسمة. 23 وإذا كانت هذه التخمينات صحيحة، فإن هذا يمثل تفسيرا غير عادي من آثار السائدة والمتنحية من الطفرات المختلفة في نفس الجين. تم مؤخرا افترض هذه الفرضية أيضا لشرح الطفرات السائدة والمتنحية في الجينات connexin31 27 (جينة تسبب فقدان السمع غير متلازمات)، على الرغم إذ كانت كل من الطفرات السائدة والمتنحية في هذا الجين مغلطة انه ليس من الواضح ما إذا كانت الطفرات السائدة تسببت في المرض من خلال haploinsufficiency أو الآثار السلبية المهيمنة. إذا كان هذا الأخير هو الحال ثم الطفرات المتنحية في هذا الجين من المحتمل أن تكون الطفرات فارغة. اكتشاف طفرة المتنحية على ما يبدو في SPG4 يعني أن هذا البروتين يجب يحتمل أن ينظر في المرضى الذين يعانون من ARHSP وكذلك مرض المهيمن. سيكون من المثير للاهتمام أن نرى ما اذا كان يتم اكتشاف الطفرات المتنحية الأخرى، وإذا كانت هذه الخريطة إلى الجزء الأول من هذا الجين. قد توفر مثل هذه الطفرات خيوط مهمة لوظيفة البروتين التشنجي.

 

__________________
استشارى الادوية الطبيعيه وباحث وخبير فى علاجات التوحد
رد مع اقتباس